一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA及制备方法和应用技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA及制备方法和应用。本发明专利技术飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA的制备方法，包括以下步骤：a，设计上游引物序列和下游引物序列，并合成；b，提取RNA反转录成第一链cDNA，以此做为模板，结合设计飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的上下游引物，通过PCR扩增获得脂肪酸延伸酶基因全长片段，将得到的产物进行纯化，连接至T4载体，后转入Trans1‑T1感受态细胞中培养，挑斑、检测，并测序；c，基于飞蝗脂肪酸合成酶基因序列SEQ ID NO：1，设计dsRNA上下游引物，其序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4，上下游引物均携带T7启动子序列；d，转录合成dsRNA。

【技术实现步骤摘要】
一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA及制备方法和应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA及制备方法和应用。
技术介绍
飞蝗是一种重要的农业害虫，具有较强的弹跳与迁飞能力，进而使得其具有很强的生存适应环境能力，因而对农作物造成巨大危害。目前，对于农业害虫的防治主要还是依靠化学农药防治，虽然这种办法防治速度快、效率高且效果稳定，但是它具有不可忽视的缺点：1)污染环境，威胁人类健康并且影响其他非靶标生物的生存；2)害虫抗药性的产生，使得防治效率下降甚至消失，这都将对生态环境产生巨大影响。因此，迫切需要开发新型的绿色害虫防控方法。昆虫表皮主要化学成分是几丁质、蛋白质和脂类物质。昆虫表皮是作为一个双向的屏障行使作用，既可以防止昆虫体内水分的蒸发，还能够反向的防止外界病原微生物的入侵。而表皮脂类物质在这一过程中发挥着重要功能。昆虫表皮脂类物质的合成涉及多种酶类的参与，如脂肪酸合成酶，其是昆虫表皮脂类合成通路中的关键酶之一，参与催化由乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶A合成软脂酸的整个过程。目前已本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA，其特征在于：该dsRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。/n

【技术特征摘要】
1.一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA，其特征在于：该dsRNA的核苷酸序列为SEQIDNO:2。


2.一种飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的dsRNA的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
a，基于飞蝗转录组数据库,采用生物信息学方法对飞蝗脂肪酸合成酶基因进行搜索，经过序列分析，拼接及比对后，获得飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS序列，设计上游引物序列和下游引物序列，并合成；
b，选取生长健康，大小一致雌雄各半的五龄飞蝗若虫，将其表皮快速解剖下来，并提取RNA，将所提RNA反转录成第一链cDNA，以此做为模板，结合设计飞蝗脂肪酸合成酶基因LmFAS的上下游引物，通过PCR扩增获得脂肪酸延伸酶基因全长片段，将得到的产物进行纯化，连接至T4载体，后转入Trans1-T1感受态细胞中培养，挑斑、检测、并测序，测序结果与转录组搜索结果比对，验证并获得该基因的核苷酸序列全长，其核苷酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵小明，张建珍，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14