【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含神经系统细胞或神经组织和非神经上皮组织的细胞团块的制备方法及该细胞团块
本专利技术涉及由多潜能干细胞制备包含神经系统细胞或神经组织和非神经上皮组织的细胞团块的方法及该细胞团块。
技术介绍
在非专利文献1中，报告了通过将由人iPS细胞制作的聚集体在Wnt信号转导途径抑制物质及源自小鼠肉瘤的基膜制剂(基质胶)的存在下悬浮培养，制作了人角膜类器官。然而，从避免异种成分及未确定因素的混入的观点出发，迫切期望也可以不使用源自小鼠肉瘤的基膜制剂的包含神经系统细胞或神经组织和非神经上皮组织的细胞团块的制备方法。在非专利文献2中，报告了将人iPS细胞在平面上贴壁培养，制作了立体的晶状体。在非专利文献3中，报告了将人iPS细胞在平面上贴壁培养，二维地形成了包含中枢神经，视网膜，角膜，晶状体，表皮的集群。然而，迫切期望通过不需要实施有特定处理的容器，并能够容易地扩大规模的悬浮培养，有效地制备包含神经系统细胞或神经组织和非神经上皮组织的细胞团块的方法。在专利文献1中，报告了通过在不存在Wnt信号转导途径抑制物质的条件下...
【技术保护点】
1.细胞团块的制备方法，所述细胞团块包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织，所述方法包括下述步骤(1)及(2)：/n(1)第一步骤，将多潜能干细胞在Wnt信号转导途径抑制物质的存在下悬浮培养，使细胞的聚集体形成；/n(2)第二步骤，将第一步骤得到的聚集体在BMP信号转导途径作用物质的存在下悬浮培养，得到包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织的细胞团块。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171124 JP 2017-2263081.细胞团块的制备方法，所述细胞团块包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织，所述方法包括下述步骤(1)及(2)：
(1)第一步骤，将多潜能干细胞在Wnt信号转导途径抑制物质的存在下悬浮培养，使细胞的聚集体形成；
(2)第二步骤，将第一步骤得到的聚集体在BMP信号转导途径作用物质的存在下悬浮培养，得到包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织的细胞团块。
2.细胞团块的制备方法，所述细胞团块包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织，所述方法包括下述步骤(a)、(1)及(2)：
(a)a步骤，将多潜能干细胞在不存在饲养细胞的条件下，在包含1)TGFβ家族信号转导途径抑制物质和/或Sonichedgehog信号转导途径作用物质，以及2)未分化维持因子的培养基中维持培养，
(1)第一步骤，将在a步骤中维持培养的多潜能干细胞在Wnt信号转导途径抑制物质的存在下悬浮培养，使细胞的聚集体形成，
(2)第二步骤，将第一步骤得到的聚集体在BMP信号转导途径作用物质的存在下悬浮培养，得到包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织的细胞团块。
3.根据权利要求1或2所述的细胞团块的制备方法，其中，所述Wnt信号转导途径抑制物质为PORCN抑制剂。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的细胞团块的制备方法，其中，所述步骤(1)和/或步骤(2)中的培养还在TGFβ信号转导途径抑制物质的存在下进行。
5.细胞团块，其为根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法得到的包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织的细胞团块。
6.非神经上皮组织片的制备方法，包括下述步骤(1)～(4)：
(1)第一步骤，将多潜能干细胞在Wnt信号转导途径抑制物质的存在下悬浮培养，使细胞的聚集体形成；
(2)第二步骤，将第一步骤得到的聚集体在BMP信号转导途径作用物质的存在下悬浮培养，得到包含1)神经系统细胞或神经组织及2)非神经上皮组织的细胞团块；
(3)第三步骤，从第二步骤得到的细胞团块回收2)非神经上皮组织；
(4)第四步骤，使第三步骤得到的2)非神经上皮组织分散，在平面上培养，由此得到非神经上皮组织片。
7.非神经上皮组织片的制备方法，包括下述步骤(a)及下述步骤(1)～(4)：
(a)a步骤，将多潜能干细胞在不存在饲养细胞的条件下，在包含1)TG...
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