一种无汞环保伊红染色液及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种无汞环保伊红染色液及其制备方法，属于病理诊断技术领域。该无汞环保伊红染色液由水溶性伊红Y，焰红，氯化钙，卡松和水组成，并且用酸调节伊红染色液的pH值至4.6‑5.6。该伊红染色液成功解决了长期困扰医学病理诊断领域HE染色，关于伊红染液稳定性差、保质期短、易沉积、易腐败、染色层次不分明、颜色暗淡或者浅等问题。同时解决了常规伊红染液添加的助染液使染色切片长期保存后的褪色问题，也降低了伊红染色的生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种无汞环保伊红染色液及其制备方法
本专利技术涉及一种无汞环保伊红染色液及其制备方法，属于病理诊断

技术介绍
组织病理学历史悠久，伊红染色液属于常用的病理学染色试剂之一，通常用于病理切片的染色，目前常用的伊红染色液稳定性差、易沉积、容易被微生物污染腐败变质、且大多数含有汞、氨及易挥发性甲醛等有机试剂，不仅危害工作人员的身体健康，对环境也是极大的污染。苏木素、伊红染色(HE染色)是将细胞涂片或组织切片分别浸没在苏木素染液和伊红染液中，使细胞的不同的成分染成深浅不同的颜色。但目前大多数伊红染液存在如下问题：1)稳定性差、易浑浊；2)层次不分明、色彩暗淡或浅；3)含有多种促染剂，染色后的切片长期保存容易褪色；4)无防腐能力，不但自身易腐败浑浊变质，染色组织也会因腐败而影响观察和保存；5)染液制作成本高，染色效率低下，其他成分对体外病理诊断存在干扰。现有常规伊红染色液制片如图1所示。
技术实现思路
为解决现有伊红染液稳定性差、易沉淀、长时间放置容易滋生微生物而浑浊、细胞质染色浅或染色暗淡不鲜亮、易腐败浑浊变质等问题，本专利技术提供了一种无汞环保伊红染色液及其制备方法，采用的技术方案如下：本专利技术的目的在于提供一种无汞环保伊红染色液，每100.00mL该无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.20g-1.00g；焰红0.01g-0.08g；氯化钙0.00g-0.04g；卡松0.01mL-0.50mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至4.6-5.6。优选地，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.40g-1.00g；焰红0.02g-0.06g；氯化钙0.00g-0.02g；卡松0.05mL-0.20mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至4.8-5.2。更优选地，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.80g；焰红0.04g；氯化钙0.00g；卡松0.10mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至5.0。更优选地，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.80g；焰红0.04g；氯化钙0.04g；卡松0.10mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至5.0。优选地，所述酸为醋酸溶液、硼酸溶液或柠檬酸溶液。更优选地，所述酸为36％-38％(质量)醋酸溶液、40％(质量)硼酸溶液或40％(质量)柠檬酸溶液。优选地，所述水为蒸馏水或去离子水。本专利技术还提供了一种上述无汞环保伊红染色液的配置方法，该方法是将水溶性伊红Y、焰红、氯化钙和卡松依次加入到水中，搅拌均匀后用水定容，滴加酸调节pH后静置，过滤分装得伊红染色液。优选地，所述静置的时间为24h。本专利技术所述水溶性伊红Y，中文别名：2’,4’,5’,7’-四溴-3’,6’-二羟基螺[异苯丙呋喃-1(3H),9’(9H)-占占吨]-3-酮二钠盐、伊红Y、朝红、曙红Y(水溶)、曙红变性次甲蓝、曙红钠盐、水溶伊红、四溴荧光黄、四溴荧光素二钠、黄光曙红、曙红水溶性、四溴荧光素钠、酸性红87[CI45380钠盐]、红21色淀[CI45380色淀]、红22[CI45380]、弱酸性紅A、伊红Y水溶、曙红Y、水溶性的曙红Y、黄色曙红Y，它是一种染料及颜料，其分子式为C20H6Br4Na3O5，分子量为714.8434，CAS号：17372-87-1，结构式如下：本专利技术所述焰红，中文别名：酸性红92、荧光桃红，荧光桃红B、酸性红92、荧光桃红、溴四氯荧光素、焰红B、石南红、玫瑰红、焰红染料B、标记红、2’,4’,5’,7’-四溴-4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羟基-螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)占吨]-3-酮、红色28。它用于生物染色、吸附指示剂、荧光指示剂、检定汞。产品型号：CAS18472-87-2，结构式如下：本专利技术有益效果：本专利技术提供了一种伊红染色液，成功解决了长期困扰医学病理诊断领域HE染色，关于伊红染液稳定性差、保质期短、易沉积、易腐败、染色层次不分明、颜色浅或暗淡等问题。本专利技术通过采用水溶性伊红Y和焰红染料作为染料，并且控制染色液的pH值在4.6-5.6之间，可以解决伊红染色液稳定性差、易浑浊、产生残渣、染色层次不分明、色彩暗淡或浅等问题，获得了染色层次分明且色彩鲜艳、稳定性好、不易浑浊的伊红染液，若pH低于4.6或高于5.6时染色液，稳定性差、易浑浊。若pH低于4.6色彩较暗淡、且浑浊有沉积，若pH高于5.6时色彩较浅，因此本专利技术染色液pH值在4.6-5.6之间，效果较好，且当pH值在4.8-5.2之间染色效果更佳，pH值为5时染色效果最佳。本专利技术首次将卡松用于伊红染色液，卡松可以起到抑菌、杀菌的作用，防止染色液腐败浑浊变质，延长染色液的保质期，此外，卡松还能够促进染色液渗透到待染色标本中，使得染色更加快速。本专利技术中氯化钙作为保存过程中的缓冲液，相比于不添加氯化钙，更好的控制染液的pH值缓冲效果，提高稳定性能，也会使染液表面产生微量金属膜，但是对染色效果无影响。附图说明图1为常规伊红染液制片(HE×40)。图2为本专利技术伊红染液制片(HE×40)。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受实施例的限制。实施例1本实施例提供了一种伊红染液，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.20g；焰红0.01g；氯化钙0.04g；卡松0.01mL；余量为水；用醋酸溶液(质量浓度为36％-38％)调节伊红染色液的pH值至5。具体配制过程如下：一、向90.00mL去离子水或蒸馏水中加入水溶性伊红Y，并不断搅拌至完全溶解。二、向步骤一获得的溶液中加入焰红，不断搅拌至完全溶解。三、向步骤二获得的溶液中加入氯化钙，并不断搅拌至其完全溶解。四、将卡松溶于十倍去离子水或蒸馏水中，加入到步骤三获得的溶液中并搅拌均匀。五、用蒸馏水或去离子水将步骤四获得的溶液定容至100.00mL。六、用醋酸溶液(质量浓度为36％-38％)调节步骤五获得的溶液至目标pH后静置24h，过滤分装。当配置更大体积的染色液时按照本实施例配方成比例扩大即可。实施例2本实施例提供了一种伊红染液，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：即水溶性伊红Y1.00g；焰红0.06g；氯化钙0.02g；卡松0.5mL；余量为水；用醋酸溶液(质量浓度为36％-38％)调节伊红染色液的pH值至5。具体配制过程参照实施例1。当配置更大体积的染色液时按照本实施例配方成比例扩大即可。实施例3本实施例提供了一种伊红染液，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.40g；焰红0.02g；氯化钙0.04g；卡松0.05本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无汞环保伊红染色液，其特征在于，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y 0.20g-1.00g；焰红0.01g-0.08g；氯化钙0.00g-0.04g；卡松0.01mL-0.50mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至4.6-5.6。/n

【技术特征摘要】
1.一种无汞环保伊红染色液，其特征在于，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.20g-1.00g；焰红0.01g-0.08g；氯化钙0.00g-0.04g；卡松0.01mL-0.50mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至4.6-5.6。


2.根据权利要求1所述的无汞环保伊红染色液，其特征在于，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.40g-1.00g；焰红0.02g-0.06g；氯化钙0.00g-0.02g；卡松0.05mL-0.20mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至4.8-5.2。


3.根据权利要求1所述的无汞环保伊红染色液，其特征在于，每100.00mL所述无汞环保伊红染色液由如下成分组成：水溶性伊红Y0.80g；焰红0.04g；氯化钙0.00g；卡松0.10mL；余量为水；用酸调节伊红染色液的pH值至5.0。


4.根据权利要求1所述的无汞环保伊红染色液...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏东辉，王金涛，
申请(专利权)人：哈尔滨格林标本技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙;23