新型抗癌肽的设计及其在抗肿瘤中的应用制造技术

两种具有抗肿瘤效果的抗癌肽，具有如下氨基酸序列。实验证明，SZG3和SZG5对肿瘤细胞具有很好的选择性和抑制活性。本发明专利技术公开了两种抗癌肽的氨基酸序列和抗肿瘤活性。SZG3:MAMVGTRHHHHHSZG5:MWAIVLLRHHHHH。

【技术实现步骤摘要】
新型抗癌肽的设计及其在抗肿瘤中的应用
本专利技术涉及新型抗癌肽的设计与在抗肿瘤中的应用。
技术介绍
肿瘤是一类多因素导致的复杂性疾病，当人体内的某些细胞基因突变达到一定程度后就会导致机体失去对其生长的正常调控而形成的了肿瘤。癌症是最常见的恶性肿瘤，如肝癌、肺癌、胃癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌等。根据最新的全球统计，将近900万人在一年中因为癌症失去了生命，等同于每天有2.2万癌症患者发生了死亡。在未来，由于世界人口增长和人口老龄化问题，全球的癌症负担将继续加重。到2030年，每年将有2100万癌症新增患者和1300万癌症死亡患者。我国是一个癌症大国，中国癌症病发人数持续上升，约占世界的40％，很多普通人难以承受患癌的高昂诊疗费用。而且，很多抗癌药物出现了耐药性。因此，为了癌症患者的健康利益，为了防治癌症的发生和发展，新的抗癌药物的研发刻不容缓。本专利技术基于两种抗菌肽的两亲特性，对其进行改造，加入甲硫氨酸以及组氨酸尾巴，使其既能通过固相合成技术进行合成，也能通过大肠杆菌进行表达，并具有良好的抗肿瘤特性。
技术实现思路
本专利技术涉及两种新型抗癌肽SZG3和SZG5的设计与在抗肿瘤中的应用。本专利技术的技术方案如下：两种抗癌肽分子，SZG3和SZG5的设计策略：(1)在抗菌肽数据库APD(AntimicrobialPeptideDatabase)中筛选出2种长度少于6个氨基酸的抗菌肽。(2)加入碱性氨基酸精氨酸到以上2种氨基酸C端末尾，得到肿瘤专一性强的阳离子抗菌肽。(3)C段加入His标签，得到SZG3和SZG5，使整个肽链的阳离子性更强，也方便表达和纯化。(4)SZG3和SZG5通过固相合成方法合成。其氨基酸序列如下：SZG3(对应SEQIDNO:1):MAMVGTRHHHHHSZG5(对应SEQIDNO:2):MWAIVLLRHHHHH本专利技术的两种抗癌肽在抗肿瘤中具有较好的效果，并具有良好的靶向性。具体实施方式通过以下实施例进一步详细说明本专利技术，但本专利技术的范围并不受这些实施例的任何限制。实施例一：SZG3和SZG5的表征SZG3:ESI-MS,calc.for[M]1450.67,found1450.62。SZG5:ESI-MS,calc.for[M]1687.01,found1687.23。实施例二：SZG3和SZG5的细胞毒性实验和抗肿瘤细胞实验1.实验材料和方法采用对数生长期的Hela细胞和293T细胞，用含10％胎牛血清的培养液调节细胞浓度为5×104Cells/mL，接种到96孔板。培养12小时后，加入不同浓度的多肽，每种多肽浓度设4个复孔，并设空白对照。采用MTT法测定490nm波长下的吸光度。2.实验结果IC50(μM)-HelaIC50(μM)-293TSZG368.54＞100SZG568.73＞100结果表明：SZG3和SZG5对Hela细胞的IC50值分别为68.54μM和68.73μM,而对293T细胞毒性较低。这表明SZG3和SZG5对肿瘤细胞具有很好的靶向性和抑制效果。实施例三：SZG3和SZG5的溶血性实验1.实验材料和方法利用酶标仪来测定SZG3和SZG5的溶血率。用0.9％生理盐水配置1000μg/mL的目标抗菌肽溶液，依次二倍稀释到96孔板中，每个样品平行3次。将新鲜的健康兔子血液加到1g/L的肝素钠离心管中，1000rpm离心5分钟，弃上清。用0.9％生理盐水洗涤2次，弃上清，得到压积红细胞。取3滴压积红细胞加入到6mL生理盐水中得2％红细胞悬液。取50μL的2％红细胞悬液加入到上述96孔板中。用含2％红细胞的生理盐水和蒸馏水分别做阴性对照和阳性对照。37℃摇床孵化4h，红细胞沉淀后吸取40μL上清液加到新的96孔板中，利用酶标仪测试546nm处的吸光度。溶血率(％)＝(样品吸收-阴性对照吸收)/(阳性对照吸收-阴性对照吸收)×100％。2.实验结果结果表明：当加入29μMSZG3的时候，溶血率为4.6％，即未发生溶血。当加入42μMSZG5的时候，溶血率为2.0％，未发生溶血。证明SZG3和SZG5在较低浓度时不发生溶血，并且具有一定的抗肿瘤效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.两种具有抗肿瘤活性的抗癌肽，其特征是其具有以下氨基酸序列：/nSZG3:MAMVGTRHHHHH/nSZG5:MWAIVLLRHHHHH。/n

【技术特征摘要】
1.两种具有抗肿瘤活性的抗癌肽，其特征是其具有以下氨基酸序列：
SZG3:MAMVGTRHHHHH
SZG5:MWAIVLLRHHHHH。

【专利技术属性】
技术研发人员：孙治刚，
申请(专利权)人：孙治刚，
类型：发明
国别省市：山东;37