ENaC表达的调节剂制造技术

本发明专利技术实施方案提供用于抑制ENaC表达的方法、化合物和组合物，其可用于治疗、预防或改善与ENaC相关的疾病。

Regulator of ENaC expression

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】ENaC表达的调节剂序列表本申请连同电子格式的序列表一起提交。序列表提供为2018年10月10日创建、大小为484kb、标题为BIOL0315WOSEQ.txt的文件。所述电子格式的序列表中的信息以全文引用的方式并入本文。
本专利技术实施方案提供用于抑制ENaC表达的方法、化合物和组合物，其可用于治疗、预防或改善与ENaC相关的疾病。
技术介绍
上皮钠通道(ENaC)为由三个亚基(通常分别为α-ENaC、β-ENaC和γ-ENaC；或SCNN1A、SCNN1B和SCNN1G)组成的通道，其表达于若干组织(包括肺)中。其允许钠离子跨过上皮细胞膜并由氯离子进行负调节。在囊性纤维化患者中，ENaC的抑制由于氯化物运输蛋白CFTR的功能下降而降低。
技术实现思路
本文所提供的某些实施方案涉及用于抑制ENaC表达的有效且可耐受的化合物和组合物，所述化合物和组合物可用于治疗、预防、改善肺部病症或减缓肺部病症的进展，肺部病症例如囊性纤维化、慢性阻塞性肺脏疾病(COPD)、慢性支气管炎和哮喘。本文所提供的某些实施方案包含与α-ENaC核酸互补的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸有效减少动物中的α-ENaC表达。具体实施方式应理解上文一般性描述和下文详细描述仅具有示范性和说明性并且不限制实施方案，如所主张。在本文中，除非另外明确陈述，否则单数的使用包括复数。如本文所用，除非另外陈述，否则“或”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括(including)”以及其他形式(诸如“包括(includes)”和“包括(included)”)的使用不具有限制性。本文所用的章节标题仅用于组织目的而不视为限制所述主题。本申请中引用的所有文献或文献的部分(包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、论文、以及GenBank和NCBI参考序列记录)针对本文所讨论的文献部分明确地以引用方式并入本文以及以全文引用方式并入本文。应理解，本文含有的每个SEQIDNO中阐述的序列与糖部分、核苷间键联或核碱基的任何修饰无关。因此，由SEQIDNO定义的化合物可独立地包含糖部分、核苷间键联或核碱基的一处或多处修饰。如本文所用，“2'-脱氧核苷”意指包含2'-H(H)核糖基糖部分的核苷，如在天然存在的脱氧核糖核酸(DNA)中所见。在某些实施方案中，2'-脱氧核苷可包含经修饰的核碱基或可包含RNA核碱基(尿嘧啶)。如本文所用，“2'-取代核苷”或“2-修饰核苷”意指包含2'-取代糖部分或2'-修饰糖部分的核苷。如本文所用，关于呋喃糖基糖部分的“2'-取代”或“2-修饰”意指糖部分包含至少一个除H或OH之外的2'-取代基。如本文所用，“施用(administration或administering)”是指向个体引入本文所提供的化合物或组合物以执行其预期功能的途径。可使用的施用途径的实例包括但不限于通过吸入施用。如本文所用，“伴随施用”或“共同施用”意指两种或更多种化合物以其两者的药理学作用均在患者体内显现的任何方式施用。伴随施用不需要两种化合物于单一药物组合物中、以相同剂型、通过相同施用途径或同时施用。两种化合物的作用本身无需同时显现。所述作用仅需重叠一段时间而无需共同延长。伴随施用或共同施用涵盖并行或依序施用。如本文所用，“动物”是指人或非人动物，包括但不限于小鼠、大鼠、兔、狗、猫、猪和非人灵长类动物(包括但不限于猴和黑猩猩)。如本文所用，“反义活性”意指可归因于反义化合物与其靶核酸杂交的任何可检测和/或可测量变化。在某些实施方案中，反义活性为靶核酸或由此类靶核酸编码的蛋白的量或表达与不存在所述反义化合物时靶核酸水平或靶蛋白水平相比减少。如本文所用，“反义化合物”意指包含反义寡核苷酸和任选地一种或多种额外特征(诸如共轭基团或末端基)的化合物。如本文所用，“反义寡核苷酸”意指具有与靶核酸至少部分互补的核碱基序列的寡核苷酸。如本文所用，关于治疗的“改善”意指至少一种症状相对于不存在治疗时相同症状的改善。在某些实施方案中，改善为症状的严重性或频率减小或延迟发作或减缓症状的严重性或频率的进展。如本文所用，“双环核苷”或“BNA”意指包含双环糖部分的核苷。如本文所用，“双环糖”或“双环糖部分”意指包含两个环的经修饰的糖部分，其中第二环经由桥连接第一环中的两个原子而形成，从而形成双环结构。在某些实施方案中，双环糖部分的第一环为呋喃糖基部分。在某些实施方案中，双环糖部分不包含呋喃糖基部分。如本文所用，“cEt”或“限制性乙基”意指一种双环糖部分，其中双环糖部分的第一环为核糖基糖部分，双环糖的第二环经由桥连接4'-碳和2'-碳而形成，桥具有式4'-CH(CH3)-O-2'，并且桥的甲基处于S构型。cEt双环糖部分处于β-D构型。如本文所用，“手性富集群体”意指多个具有相同分子式的分子，其中群体内在特定手性中心含有特定立体化学构型的分子的数目或百分比大于当所述特定手性中心为无规立构时预期群体内在相同特定手性中心含有相同特定立体化学构型的分子的数目或百分比。在每个分子内具有多个手性中心的手性富集分子群体可含有一个或多个无规立构手性中心。在某些实施方案中，分子为经修饰的寡核苷酸。在某些实施方案中，分子为包含经修饰的寡核苷酸的化合物。如本文所用，关于寡核苷酸的“互补”意指此类寡核苷酸的至少70％核碱基或其一个或多个区和另一核酸的核碱基或其一个或多个区当将所述寡核苷酸的核碱基序列和另一核酸在相反方向上对齐时能够彼此氢键结。互补核碱基为能够彼此形成氢键的核碱基对。互补核碱基对包括腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)、腺嘌呤(A)和尿嘧啶(U)、胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)、5-甲基胞嘧啶(mC)和鸟嘌呤(G)。互补寡核苷酸和/或核酸不必在每个核苷均具有核碱基互补性。相反，容许一些错配。如本文所用，关于寡核苷酸的“完全互补”或“100％互补”意指此类寡核苷酸在所述寡核苷酸的每个核碱基处与另一寡核苷酸或核酸互补。如本文所用，“共轭基团”意指直接或间接连接至寡核苷酸的原子团。共轭基团包括共轭部分和将共轭部分连接至寡核苷酸的共轭接头。如本文所用，“共轭接头”意指包含至少一个将共轭部分连接至寡核苷酸的键的原子团。如本文所用，“共轭部分”意指经由共轭接头连接至寡核苷酸的原子团。如本文所用，在寡核苷酸的情境中的“连续”是指核苷、核碱基、糖部分或核苷间键联彼此紧邻。例如，“连续核碱基”意指在序列中彼此紧邻的核碱基。如本文所用，“双链反义化合物”意指包含两种彼此互补并且形成双螺旋的低聚化合物的反义化合物，并且其中所述两种低聚化合物之一包含反义寡核苷酸。如本文所用，“有效量”意指足以在需要所述化合物的个体中达成所要的生理结果的化合物的量。在个体之中，有效量可视以下因素而变化：待治疗个体的健康和身体状况、待治疗个体的分类学群组、组合物的制剂、个体的医学病状的评估和其他相关因素。如本文所用，“功效”意指产生所要作用的能力。如本文本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQ ID NO:6-1954中任一者的至少8个连续核碱基的核碱基序列。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171031 US 62/579,640;20181010 US 62/743,6691.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQIDNO:6-1954中任一者的至少8个连续核碱基的核碱基序列。


2.一种化合物，其包含长度为9至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQIDNO:6-1954中任一者的至少9个连续核碱基的核碱基序列。


3.一种化合物，其包含长度为10至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQIDNO:6-1954中任一者的至少10个连续核碱基的核碱基序列。


4.一种化合物，其包含长度为11至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQIDNO:6-1954中任一者的至少11个连续核碱基的核碱基序列。


5.一种化合物，其包含长度为12至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含核碱基序列SEQIDNO:6-1954中任一者的至少12个、至少13个、至少14个或至少15个连续核碱基的核碱基序列。


6.一种化合物，其包含长度为16至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQIDNO:6-1954中任一者的核碱基序列的核碱基序列。


7.一种化合物，其包含经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有由SEQIDNO:6-1954中任一者组成的核碱基序列。


8.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸在SEQIDNO:2的核碱基17,951-24,120内互补，其中所述经修饰的寡核苷酸与SEQIDNO:2至少85％、90％、95％或100％互补。


9.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含至少8个连续核碱基的部分的核碱基序列，所述至少8个连续核碱基的部分与SEQIDNO:2的核碱基17,951-24,120的相等长度部分100％互补，其中所述经修饰的寡核苷酸的所述核碱基序列与SEQIDNO:2至少85％、90％、95％或100％互补。


10.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸在SEQIDNO:2的核碱基32,129-33,174内互补，其中所述经修饰的寡核苷酸与SEQIDNO:2至少85％、90％、95％或100％互补。


11.一种化合物，其包含经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸与α-ENaC前体mRNA的内含子4互补。


12.一种化合物，其包含经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸与α-ENaC核酸的3'-UTR互补。


13.如权利要求11所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸在具有核碱基序列SEQIDNO:2的α-ENaC核酸的核碱基17,951-24,120内互补。


14.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含至少8个连续核碱基的部分的核碱基序列，所述至少8个连续核碱基的部分与具有核碱基序列SEQIDNO:2的α-ENaC核酸的核碱基19,022-19,037、20,415-20,430、21,750-21,766、32,844-32,859或32,989-33,004的相等长度部分互补，其中所述经修饰的寡核苷酸的所述核碱基序列与SEQIDNO:2互补。


15.一种化合物，其包含长度为8至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸在SEQIDNO:2的核碱基19,022-19,037、20,415-20,430、21,750-21,766、32,844-32,859或32,989-33,004内互补。


16.一种化合物，其包含长度为16至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQIDNO:239、426、593、1113、1541或1812中任一者的核碱基序列。


17.一种化合物，其包含经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有由SEQIDNO:239、426、593、1113、1541或1812中任一者组成的核碱基序列。


18.一种化合物，其包含长度为16至50个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有包含SEQIDNO:239、426、593、1113、1541或1812中任一者的核碱基序列，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：
间隔段，其由连接的2'-脱氧核苷组成；
5'翼段，其由连接的核苷组成；和
3'翼段，其由连接的核苷组成；
其中所述间隔段位于所述5'翼段与所述3'翼段之间并且其中每个末端翼核苷包含经修饰的糖。


19.一种化合物，其包含长度为20个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸包含SEQIDNO:239、426、593、1113、1541或1812中任一者，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：
间隔段，其由10个连接的2'-脱氧核苷组成；
5'翼段，其由5个连接的核苷组成；和
3'翼段，其由5个连接的核苷组成；
其中所述间隔段位于所述5'翼段与所述3'翼段之间，其中每个翼段的每个核苷包含2'-O-甲氧基乙基糖部分；其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联并且其中每个胞嘧啶为5-甲基胞嘧啶。


20.一种化合物，其包含长度为16个连接的核苷的经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸具有由SEQIDNO:239、426、593、1113、1541或1812中所述的任一序列组成的核碱基序列，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：
间隔段，其由10个连接的2'-脱氧核苷组成；
5'翼段，其由3个连接的核苷组成；和
3'翼段，其由3个连接的核苷组成；
其中所述间隔段位于所述5'翼段与所述3'翼段之间；其中每个翼段的每个核苷包含cEt糖部分；其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联；并且其中每个胞嘧啶为5-甲基胞嘧啶。


21.如权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中所述寡核苷酸与SEQIDNO:1、2或1957中任一者至少80％、85％、90％、95％或100％互补。


22.如权利要求1-21中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸包含至少一个经修饰的核苷间键联。


23.如权利要求22所述的化合物，其中所述至少一个经修饰的核苷间键联为硫代磷酸酯核苷间键联。


24.如权利要求1-18或21-23中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸包含至少一个双环糖。


25.如权利要求24所述的化合物，其中所述至少一个双环糖选自由LNA、ENA和cEt组成的组。


26.如权利要求1-18或21-25中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸包含至少一个2'-O-甲氧基乙基或2'-O-甲基修饰的糖部分。


27.如权利要求1-26中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸包含至少一个5-甲基胞嘧啶。


28.如权利要求1-18或21-27中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸包含：
间隔段，其由连接的2'-脱氧核苷组成；
5'翼段，其由连接的核苷组成；和
3'翼段，其由连接的核苷组成；
其中所述间隔段位于紧邻所述5'翼段和所述3'翼段且在所述5’翼段和所述3’翼段之间并且其中每个翼段的每个核苷包含经修饰的糖部分。


29.如权利要求1-28中任一项所述的化合物，其中所述化合物为单链的。


30.如权利要求1-28中任一项所述的化合物，其中所述化合物为双链的。


31.如权利要求1-30中任一项所述的化合物，其中所述化合物包含至少一个未修饰的核糖基糖部分。


32.如权利要求1-31中任一项所述的化合物，其中所述化合物包含至少一个未修饰的脱氧核糖基糖部分。


33.如权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸由10至30个连接的核苷组成。


34.如权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸由12至30个连接的核苷组成。


35.如权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸由15至30个连接的核苷组成。


36.如权利要求1-32中任一项所述的化合物，其中所述经修饰的寡核苷酸由16至20个连接的核苷组成。


37.一种化合物，其包含根据下式的经修饰的寡核苷酸：mCksmCksmCksGdsAdsTdsAdsGdsmCdsTdsGdsGdsTdsTksGksTk；其中，
A＝腺嘌呤，
mC＝5-甲基胞嘧啶
G＝鸟嘌呤，
T＝胸腺嘧啶，
k＝cEt糖部分，
d＝2'-脱氧核糖基糖部分，并且
s＝硫代磷酸酯核苷间键联。


38.如权利要求1-37中任一项所述的化合物，其包含共轭基团。


39.如权利要求38所述的化合物，其中所述化合物由所述经修饰的寡核苷酸和所述共轭基团组成。


40.一种根据下式的化合物：



[SEQIDNO:1113]或其盐。


41.如权利要求1-29或31-37中任一项所述的化合物，其中所述化合物由所述经修饰的寡核苷酸组成。


42.一种化合物，其由如权利要求1-41所述的化合物中任一者的药学上可接受的盐形式组成。


43.如权利要求42所述的化合物，其中所述药学上可接受的盐为钠盐。


44.如权利要求42所述的化合物，其中所述药学上可接受的盐为钾盐。


45.一种药物组合物，其包含如权利要求1-44中任一项所述的化合物和至少一种药学上可接受的载体或稀释剂。


46.一种如权利要求1-44中任一项所述的化合物的手性富集群体，其中所述群体富含经修饰的寡核苷酸，所述经修饰的寡核苷酸包含至少一个具有特定立体化学构型的特定硫代...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·R·克罗斯比，郭淑玲，HH·布维，A·T·瓦特，S·M·弗赖尔，
申请(专利权)人：IONIS制药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US