一种RNA激活Cas14a酶附带切割效应的方法技术

本发明专利技术可用于分析检测及基因编辑领域，能够相应的提供一种RNA激活Cas14a“附带切割”活性即可被激活成为非特异性的ssDNase的方法，解决RNA不能激活Cas14a酶的附带切割活性的问题，拓展Cas14a酶由DNA到RNA的应用范围。

【技术实现步骤摘要】
一种RNA激活Cas14a酶附带切割效应的方法
本专利技术涉及一种RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，可用于分析和基因编辑领域。
技术介绍
CRISPR（Clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats）被称为规律成簇间隔短回文重复，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统[1]。目前发现的CRISPR相关联CRISPR-Cas系统效应蛋白分为两大类：第一类是CRISPR-Cas系统利用多蛋白复合物，第二类是CRISPR-Cas系统利用单蛋白效应物[2]。在第2类CRISPR系统中，一个具有多功能域的100-200KDaCrisprAssociatedprotein(Cas)蛋白在RNA引导下进行DNA或RNA底物的结合和切割。CRISPR和CRISPR关联基因(CRISPR-Cas)具有的可编程的外切酶活性使其成为有效的核酸诊断工具。基于不同的效应蛋白家族，第二类系统可以分为3大类和9个亚型，其中II型的蛋白效应器Cas9与tracrRNA、引导crRNA组成效应复合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：向含有单链引导RNA(sgRNA)-Cas14a复合体的溶液中加入靶链RNA，即可激活Cas14a的附带切割效应。/n

【技术特征摘要】
1.一种RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：向含有单链引导RNA(sgRNA)-Cas14a复合体的溶液中加入靶链RNA，即可激活Cas14a的附带切割效应。


2.按权利要求1所述的RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：所述sgRNA-Cas14a复合体的制备方法为混合sgRNA和Cas14a酶，在0-60oC混合孵育0-300分钟。


3.按权利要求1所述的RNA激活CRISPR-Cas14a酶附带切割效应的方法，其特征在于：所述浓度为0-100mM；所述Cas14a的浓度为0-100mM。


4.按照权利1所述的RNA激活CRISPR-C...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨治庆，韦阳道，万逸，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：海南;46