人参皂苷CK在作为降脂减肥药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了人参皂苷CK在作为降脂减肥药物中的应用。本发明专利技术发现利用CcBgl1A、BglPC28、CB‑3B酶解人参皂苷Rb1得到的人参皂苷CK可以作为降脂减肥药物：施用本发明专利技术的人参皂苷CK可以减轻肥胖动物体重，降低血脂含量，减少脂肪沉积，降低血糖，改善胰岛素抵抗，更重要的是本发明专利技术的人参皂苷CK可以显著降低体重，具有减肥的效果。说明，本发明专利技术的人参皂苷CK可研制成具有降脂减肥作用的药物，并具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
人参皂苷CK在作为降脂减肥药物中的应用
本专利技术涉及生物医学领域中，人参皂苷CK在作为降脂减肥药物中的应用。
技术介绍
高血脂是一种常见和多发的代谢性疾病，主要是由于机体脂肪组织的代谢或者转运发生异常，使得血清中一种或多种脂质高于正常的范围，主要特征为总胆固醇(Totalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)的升高。高血脂是动脉粥硬化的首要危险因素，它可引起严重的心脑血管疾病。高血脂也与糖尿病之间有着密切的联系，当人体血液中脂质类物质增加，脂肪又可以转化为糖分，如果这些糖分在一定时间内没有得到相应的消耗，便会引起糖尿病。目前治疗药物主要针对病理变化中的某一个环节，靶点相对单一，不能兼顾发病过程中系统相互影响和调节的复杂变化，而且还具有不同程度的副作用，所以研发一种无副作用的天然降脂药物迫在眉睫。人参是我国传统的名贵中草药，具有悠久的历史，其主要功能是强身健体，延年益寿。研究表明，人参皂苷是人参中的主要活性成分，人参皂苷为三萜糖苷类化合物，根据含量不同，可分为主要人参皂苷(如Rb1、Rb2、Rc、Rd等)和稀有人参皂苷(Rg3、Rh1、F1、CK等)，其中人参皂苷CK是二醇型人参皂苷。目前，多种具有药理活性的人参皂苷已经被应用，例如：抗肿瘤药物人参皂苷Rg3，抗心律失常药物人参皂苷Re等。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何降脂减肥。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了人参皂苷CK的下述任一应用：A1、制备改善动物胰岛素抵抗产品；A2、改善动物胰岛素抵抗；A3、制备降低动物体重产品；A4、降低动物体重；A5、制备降低动物血糖含量产品；A6、降低动物血糖含量；A7、制备降低动物脂肪含量产品；A8、降低动物脂肪含量；A9、减肥。上述应用中，所述脂肪可为血脂、性腺白色脂肪和/或腹股沟白色脂肪。上述应用中，所述人参皂苷CK可按照人参皂苷CK的制备方法制备，所述方法包括M1)和M2)：M1)利用β-葡萄糖苷酶CcBgl1A和BglPC28酶解人参皂苷Rb1，得到反应产物1；所述CcBgl1A为下述B1)-B4)中的任一种：B1)氨基酸序列是SEQIDNo.4的第21-410位的蛋白质；B2)氨基酸序列是SEQIDNo.4的蛋白质；B3)将序列表中SEQIDNo.4的第21-410位或SEQIDNo.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；B4)在B1)或B2)或B3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；所述BglPC28为下述C1)-C3)中的任一种：C1)氨基酸序列是SEQIDNo.6的蛋白质；C2)将序列表中SEQIDNo.6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质；C3)在C1)或C2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；M2)利用β-葡萄糖苷酶CB-3B酶解所述反应产物1，得到反应产物(记为反应产物2)，该反应产物即为所述人参皂苷CK；所述CB-3B为下述D1)-D4)中的任一种：D1)氨基酸序列是SEQIDNo.2的第21-785位的蛋白质；D2)氨基酸序列是SEQIDNo.2的蛋白质；D3)将序列表中SEQIDNo.2的第21-785位或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质；D4)在D1)或D2)或D3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。为了使B1)、B2)、C1)、D1)或D2)中的蛋白质便于纯化，可在由其氨基末端或羧基末端连接上如下表所示的标签。表：标签的序列标签残基序列Poly-Arg5-6(通常为5个)RRRRRPoly-His2-10(通常为6个)HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tagII8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL上述B3)中的蛋白质，为与SEQIDNo.4的第21-410位或SEQIDNo.4所示蛋白质的氨基酸序列具有75％或75％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。C2)中的蛋白质，为与SEQIDNo.6所示蛋白质的氨基酸序列具有75％或75％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。D3)中的蛋白质，为与SEQIDNo.2的第21-785位或SEQIDNo.2所示蛋白质的氨基酸序列具有75％或75％以上同一性且具有相同功能的蛋白质。所述具有75％或75％以上同一性为具有75％、具有80％、具有85％、具有90％、具有95％、具有96％、具有97％、具有98％或具有99％的同一性。上述B3)或C2)或D3)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述B3)中的蛋白质的编码基因可通过将SEQIDNo.3或SEQIDNo.3的第61-1233位所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上上表所示的标签的编码序列得到。其中，SEQIDNo.3所示的DNA分子编码SEQIDNo.4所示的蛋白质。上述C2)中的蛋白质的编码基因可通过将SEQIDNo.5的第4-2232位或SEQIDNo.5所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上上表所示的标签的编码序列得到。其中，SEQIDNo.5的第4-2232位所示的DNA分子编码SEQIDNo.6所示的蛋白质。上述D3)中的蛋白质的编码基因可通过将SEQIDNo.1或SEQIDNo.1的第61-2361位所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上上表所示的标签的编码序列得到。其中，SEQIDNo.1所示的DNA分子编码SEQIDNo.2所示的蛋白质。上述应用中，M1)和M2)中所述酶解均可在30℃下进行。M1)中所述酶解时间可为3h。M2)中所述酶解时间可为9h。M1)和M2)中所述酶解均可pH为6.0的100mMNa2HPO4-NaH2PO4缓冲液中进行。M1)中所述酶解的体系中，所述CcBgl1A、所述BglPC28和人参皂苷Rb1的配比为0.4U：0.6U：1mg。M2)中所述酶解的体系中，所述CB-3B的添加量满足所述CB-3B与人参皂苷Rb1的配比为0.1U：1mg。上述应用中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人参皂苷CK的下述任一应用：/nA1、制备改善动物胰岛素抵抗产品；/nA2、改善动物胰岛素抵抗；/nA3、制备降低动物体重产品；/nA4、降低动物体重；/nA5、制备降低动物血糖含量产品；/nA6、降低动物血糖含量；/nA7、制备降低动物脂肪含量产品；/nA8、降低动物脂肪含量；/nA9、减肥。/n

【技术特征摘要】
1.人参皂苷CK的下述任一应用：
A1、制备改善动物胰岛素抵抗产品；
A2、改善动物胰岛素抵抗；
A3、制备降低动物体重产品；
A4、降低动物体重；
A5、制备降低动物血糖含量产品；
A6、降低动物血糖含量；
A7、制备降低动物脂肪含量产品；
A8、降低动物脂肪含量；
A9、减肥。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述脂肪为血脂、性腺白色脂肪和/或腹股沟白色脂肪。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述人参皂苷CK按照人参皂苷CK的制备方法制备，所述方法包括：
M1)利用β-葡萄糖苷酶CcBgl1A和BglPC28酶解人参皂苷Rb1，得到反应产物1；所述CcBgl1A为下述B1)-B4)中的任一种：
B1)氨基酸序列是SEQIDNo.4的第21-410位的蛋白质；
B2)氨基酸序列是SEQIDNo.4的蛋白质；
B3)将序列表中SEQIDNo.4的第21-410位或SEQIDNo.4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；
B4)在B1)或B2)或B3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；
所述BglPC28为下述C1)-C3)中的任一种：
C1)氨基酸序列是SEQIDNo.6的蛋白质；
C2)将序列表中SEQIDNo.6所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质；
C3)在C1)或C2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；
M2)利用β-葡萄糖苷酶CB-3B酶解所述反应产物1，得到反应产物，该反应产物即为所述人参皂苷CK；所述CB-3B为下述D1)-D4)中的任一种：
D1)氨基酸序列是SEQIDNo.2的蛋白质；
D2)氨基酸序列是SEQIDNo.2的第21-785位的蛋白质；
D3)将序列表中SEQIDNo.2的第21-785位或SEQIDNo.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质；
D4)在D1)或D2)或D3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。


4.权利要求3中所述的人参皂苷CK的制备方法。


5.利用权利要求3中所述的人参皂苷CK的制备方法制备得到的人参皂苷CK。


6.权利要求5中所述的人参皂苷CK在作为具有如下任一功能药物中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：范玉莹，周义发，杨斯雯，张航，原野，胡晨星，
申请(专利权)人：东北师范大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22