核酸、多肽偶联组合物、多肽组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种核酸、多肽偶联组合物、多肽组合物及其制备方法和应用。该多肽组合物含有氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的多肽。上述多肽组合物能够诱导产生特异性较高的CDK3抗体。

【技术实现步骤摘要】
核酸、多肽偶联组合物、多肽组合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物学领域，特别是涉及一种核酸、多肽偶联组合物、多肽组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependentkinase，CDK)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在细胞周期调控中发挥重要作用，推动、调控细胞周期各时相的有序进行，促进细胞分裂和增殖。CDK3是CDK家族的重要成员之一，在细胞周期调控中发挥重要作用。CDK3活性出现在G1期，与cyclinE结合，在G1/S转换中发挥重要作用。此外，CDK3与cyclinC结合，促使细胞从G0重返细胞周期。研究表明，CDK3在乳腺癌细胞和乳腺癌组织中高表达，miR-873和miR-125a-3p通过下调靶基因CDK3的表达，降低ER(雌激素受体)活性，抑制ER阳性乳腺癌细胞的增殖和荷瘤小鼠的肿瘤生长。研究发现，CDK3在脑胶质瘤中高表达。CDK3磷酸化ATF1(转录激活因子1)和c-Jun(一种转录调节因子，属亮氨酸拉链家族成员)，激活ATF1和AP-1(一种转录激活因子)的转录活性，促进JB6细胞(小鼠表皮细胞)转化和Ras基因诱导的NIH3T3细胞平板集落形成，而CDK3knockdown(CDK3敲低)抑制ATF1活性、抑制胶质瘤细胞增殖和软琼脂克隆形成。研究还发现，CDK3在皮肤癌中高表达，CDK3通过与转录因子NFAT3相互作用而磷酸化NFAT3，促进皮肤癌恶性转化和肿瘤发生。上述研究说明CDK3在细胞恶性转化和肿瘤发生发展中可能发挥癌基因的作用，与肿瘤的恶性生物学行为密切相关。因此，非常有必要研究CDK3的生物学及肿瘤细胞学中的生物功能。其中，识别CDK3的抗体是必不可少的工具。然而，现有的识别CDK3的抗体的特异性较差，严重限制对CDK3的深入研究。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种能够诱导产生特异性较高的CDK3抗体的多肽组合物。此外，还有必要提供一种多肽组合物的制备方法和应用、核酸、多肽偶联组合物。一种多肽组合物，所述多肽组合物含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。研究发现，包含有氨基酸序列如SEQIDNo.1的多肽和氨基酸序列SEQIDNo.2所示的多肽的多肽组合物能够诱导产生特异性较高的CDK3抗体，有利于对CDK3的深入研究。在其中一个实施例中，所述多肽的羧基端被酰胺化。一种多肽组合物的制备方法，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或基因工程技术制备氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。一种核酸，所述核酸含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽的编码序列或氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽的编码序列。一种多肽偶联组合物，所述多肽偶联组合物包括两个多肽偶联物，两个所述多肽偶联物均包括多肽部分，一个所述多肽偶联物的多肽部分含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽，另一个所述多肽偶联物的多肽部分含有氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。在其中一个实施例中，两个所述多肽偶联物均包括偶联部分，所述偶联部分与所述多肽部分连接，所述偶联部分选自血蓝蛋白、卵清蛋白及牛血清白蛋白中的至少一种。一种CDK3抗体的制备方法，包括如下步骤：采用抗原对动物进行免疫，收集免疫后的所述动物的血清，得到CDK3抗体，所述抗原为上述多肽组合物或者上述多肽偶联组合物。一种CDK3抗体，由上述CDK3抗体的制备方法制备得到。上述多肽组合物、上述多肽偶联组合物或者上述CDK3抗体在制备检测试剂、检测试剂盒或者检测装置中的应用。一种检测试剂盒，包括：上述多肽组合物、上述多肽偶联组合物或者上述CDK3抗体。附图说明图1为实施例5的WesternBlot的结果。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳的实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。一实施方式的多肽组合物能够诱导产生特异性较高的CDK3抗体，以有利于对CDK3的深入研究，以能够应用于制备检测试剂、检测试剂盒或者检测装置。检测试剂、检测试剂盒或者检测装置用于检测CDK3或者用于检测CDK3抗体的效价。在其中一个实施例中，多肽组合物包含氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。具体地，如SEQIDNo.1所示的氨基酸序列为：FPKWTRKGLEEIVPNLEPEGRD；如SEQIDNo.2所示的氨基酸序列为：YDPSQRITAKTALAHPYFSSPEPSPAAR。进一步地，氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽的羧基端被酰胺化。具体地，氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽的碳末端的D(即天冬氨酸)的羧基被酰胺化为酰胺基，即NH2-FPKWTRKGLEEIVPNLEPEGRD-CONH2。进一步地，氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽的羧基端被酰胺化。具体地，氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽的碳末端的R(即精氨酸)的羧基被酰胺化为酰胺基，即NH2-YDPSQRITAKTALAHPYFSSPEPSPAAR-CONH2。研究发现，包含有氨基酸序列如SEQIDNo.1的多肽和氨基酸序列SEQIDNo.2所示的多肽的多肽组合物，能够诱导产生特异性较高的CDK3抗体，有利于对CDK3的深入研究。上述实施方式的多肽组合物的制备方法，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或基因工程技术制备得到上述多肽。在其中一个实施例中，多肽固相合成法为Boc固相合成法或Fmoc固相合成法。其中，Boc为叔丁氧羰基。Boc固相合成法中以易酸解的Boc基团作为N-ɑ-保护基团。Fmoc为9-芴甲氧羰基。Fmoc固相合成法中以易酸解的Fmoc基团作为N-ɑ-保护基团。在其中一个实施中，基因工程技术具体为：构建重组载体，重组载体含有上述多肽的编码序列。通过构建重组载体能够较好地保存编码上述多肽的编码序列，有利于多肽的表达。进一步地，重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。重组载体能够表达或克隆多肽。更进一步地，重组载体含有纯化标签。通过设置纯化标签，有利于多肽的分离纯化。进一步地，纯化标签为His标签、GST标签或SUMO标签。需要说明的是，纯化标签不限于上述指出纯化标签，其他常见的纯化标签也可以作用重组载体的纯化标签。具体地，重组载体包括基因工程载体。上述多肽的编码序列插入基因工程载体中。进一步地，基因工程载体为pET-3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多肽组合物，其特征在于，所述多肽组合物含有氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的多肽。/n

【技术特征摘要】
1.一种多肽组合物，其特征在于，所述多肽组合物含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。


2.根据权利要求1所述的多肽组合物，其特征在于，所述多肽的羧基端被酰胺化。


3.一种多肽组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：通过多肽固相合成法或基因工程技术制备氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽和氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。


4.一种核酸，其特征在于，所述核酸含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽的编码序列或氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽的编码序列。


5.一种多肽偶联组合物，其特征在于，所述多肽偶联组合物包括两个多肽偶联物，两个所述多肽偶联物均包括多肽部分，一个所述多肽偶联物的多肽部分含有氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的多肽，另一个所述多肽偶联物的多肽部分含有氨基酸序列如SEQIDNo.2所示的多肽。

【专利技术属性】
技术研发人员：郑多，陈程，肖田，邹永东，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东;44