用于预防呼吸道合胞病毒(RSV)感染的疫苗及其制备和使用方法技术

本文公开了用于治疗和预防呼吸道合胞病毒(RSV)的疫苗、免疫原性组合物及其使用方法。明确地说，公开了免疫原性组合物，其中RSV的蛋白质或免疫原性片段在重组病毒载体平台、诸如水泡性口炎病毒(rVSV)中递送给受试者。

Vaccine for the prevention of respiratory syncytial virus (RSV) infection and its preparation and use

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防呼吸道合胞病毒(RSV)感染的疫苗及其制备和使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月15日提交的美国临时申请号62/559,167的权益，该美国临时申请全文以引用方式并入本文。
技术介绍
全球研究已发现RSV是由于美国和全世界5岁以下儿童的急性下呼吸道感染(ALRI)而导致婴幼儿住院的最常见原因之一，导致高达200,000人死亡。在一岁以下的儿童中，RSV与住院的相关性比流行性感冒高16倍。除了住院之外，RSV还导致急救部门的就诊率更高，并且相比流行性感冒需要更多的护理时间和资源利用。目前，若干候选RSV疫苗正在针对不同年龄组进行开发或临床试验。已经尝试了活的减毒疫苗和灭活疫苗，但没有取得太多成功。重组病毒载体(诸如重组水泡性口炎病毒(rVSV)、腺病毒等)提供了用于递送异源抗原(来自不同病毒的抗原)的缺点最小的强大技术。本领域需要一种基于rVSV载体的有效抗RSV疫苗，该疫苗能够安全用于人以预防RSV感染。
技术实现思路
本文公开了包含重组病毒载体和一种或多种呼吸道合胞病毒(RSV)蛋白的组合物。本文还公开了使用本文所公开的免疫原性组合物和疫苗的方法。例如，公开了在受试者中诱发对RSV的免疫应答的方法，该方法包括向受试者施用如本文所公开的组合物或疫苗。附图说明图1示出了具有用于RSV基因克隆的位置的VSV载体(印第安纳(Indiana)菌株，序列如序列列表中最后一个序列所列出)的示意图。图2A、2B和2C示出了在rVSV-G±F免疫棉鼠中攻击病毒的清除(a和b)和VN抗体滴度(c)。用指定剂量和组合的候选rVSV使棉鼠(每组n＝4)免疫，并且在免疫后四周用RSV-A2攻击，并且在攻击后四天实施安乐死。使用在安乐死当天收集的肺和鼻匀浆进行病毒滴定，并且从在攻击当天收集的血清样品确定VN抗体水平。通过单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并且用星号(*)符号表示指定的组代表柱之间的统计意义上的显著性差异(P<0.05)。图3A、3B和3C示出了在rVSV-G±F免疫棉鼠中攻击病毒的清除(a和b)和VN抗体滴度(c)。用指定剂量、间隔和组合的候选rVSV使棉鼠(每组n＝4)免疫，并且在加强剂量后三周用RSV-A2攻击，并且在攻击后四天实施安乐死。使用肺和鼻匀浆进行病毒滴定，并且从在加强免疫(第21天)和RSV攻击(第42天)当天收集的血清样品确定VN抗体水平。通过单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并且用星号(*)符号表示指定的组代表柱之间的统计意义上的显著性差异(P<0.05)。图4A、4B和4C示出了在指定的rVSV-G+F+rVSV-Hsp70免疫棉鼠中攻击病毒的清除(a和b)和VN抗体滴度(c)。用指定剂量、间隔和组合的候选rVSV使棉鼠(每组n＝4)免疫，并且在加强剂量后三周用RSV-A2攻击，并且在攻击后四天实施安乐死。使用肺和鼻匀浆进行病毒滴定，并且从在加强免疫(第21天)和RSV攻击(第42天)当天收集的血清样品确定VN抗体水平。通过单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并且用星号(*)符号表示指定的组代表柱之间的统计意义上的显著性差异(P<0.05)。图5A、5B和5C示出了在指定的表达RSVG变体的rVSV免疫棉鼠中攻击病毒的清除(a和b)和VN抗体滴度(c)。用指定剂量、间隔和组合的候选rVSV使棉鼠(每组n＝4)免疫，并且在加强剂量后三周用RSV-A2攻击，并且在攻击后四天实施安乐死。使用肺和鼻匀浆进行病毒滴定，并且从在加强免疫(第21天)和RSV攻击(第42天)当天收集的血清样品确定VN抗体水平。通过单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并且用星号(*)符号表示指定的组代表柱之间的统计意义上的显著性差异(P<0.05)。图6A、6B和6C示出了在rVSV-G变体免疫棉鼠中攻击病毒的清除(a和b)和VN抗体滴度(c)。用指定剂量和组合的候选rVSV使棉鼠(每组n＝4)免疫，并且在四周后用RSV-A2攻击，并且在攻击后四天实施安乐死。使用肺和鼻匀浆进行病毒滴定，并且从在攻击当天收集的血清样品确定VN抗体水平。通过单因素方差分析(ANOVA)进行统计分析，并且用星号(*)符号表示指定的组代表柱之间的统计意义上的显著性差异(P<0.05)。图7示出了RSVF基因的胞外域的示意图，其中含有所包括的用于稳定F蛋白的融合前构象(Pre-F)的突变和取代的细节。图8示出了RSVN基因和如表3中所详述的被选来在rVSV载体中表达的基因区段的示意图。具体实施方式通过参考本专利技术的以下详细描述和其中包括的实施例可以更容易地理解本专利技术。本文所引用的所有专利、专利申请和出版物(无论上文或下文)据此全文以引用方式并入本申请中，以便更全面地描述到本文所述和受权利要求书保护的本专利技术的日期为止本领域技术人员已知的现有技术水平。除非另有明确说明，否则绝无意于将本文所陈述的任何方法或方面理解为要求其步骤以特定顺序执行。因此，在方法要求在权利要求书或说明书中不具体地说明该步骤被限制为特定顺序的情况下，绝无意于在任何方面推断出一种顺序。这适用于任何可能的非明确的解读基础，包括：关于步骤或操作流程的安排的逻辑问题，从语法组织或标点符号推导的普通意义，或者在说明书中描述的各方面的数量或类型。定义除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语的含义与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。在本文的实施方案的描述中所使用的术语仅用于描述特定实施方案，且无意限制所公开的实施方案。如说明书中所用，单数形式“一个”、“一种”和“所述”旨在也包括复数形式，除非上下文另有明确指示。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献全文以引用方式并入。除非另外指明，否则本公开中所用的表达成分的量、反应条件等的所有数值应该被理解为在所有情况下均被术语“约”修饰。因此，除非有相反的说明，否则本公开中列出的数值参数均为近似值，其可以根据寻求通过本公开得到的所需性质而变化。最低程度上说并且不是要试图限制等同原则应用于任何权利要求的范围，每个数值参数应该根据有效数字的数目和普通的四舍五入方法来理解。在本文中，范围可被表达为从“约”一个特定值，和/或到“约”另一个特定值。当表达此类范围时，另一个实施方案包括从一个特定值和/或到其他特定值。相似地，当前面用“约”将值表达为近似值时，应当理解，特定值构成了另一个实施方案。还应当理解，每个范围的端值相对于另一个端值以及独立于另一个端值都是有意义的。还应当理解，本文描述了许多值，并且除了值本身之外，每个值在本文中也被公开为“约”该特定值。例如，如果公开了值“10”，则还公开了“约10”。还应当理解，当公开一个值时，“小于或等于”该值、“大于或等于该值”和在值之间的可能范围也被公开，如本领域技术人员适当理解的。例如，如果公开了值“10”，则还公开了“小于或等于10”以及“大于或等于10”。还应当理解，在整个申请本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，所述组合物包含一种或多种重组病毒载体和一种或多种呼吸道合胞病毒(RSV)蛋白。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170915 US 62/559,1671.一种组合物，所述组合物包含一种或多种重组病毒载体和一种或多种呼吸道合胞病毒(RSV)蛋白。


2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物包含在相同重组病毒载体中表达的至少两种RSV蛋白。


3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述一种或多种重组病毒载体是重组水泡性口炎病毒(rVSV)。


4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述组合物包含两种或更多种rVSV载体。


5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述RSV蛋白是G蛋白。


6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述RSV蛋白是mG蛋白(密码子优化的膜结合型G蛋白)。


7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述RSVG蛋白是密码子优化的。


8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述密码子优化的RSVG蛋白由包含SEQIDNO:1的核酸编码。


9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述RSV蛋白是F蛋白。


10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述F-蛋白为密码子优化的...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬·涅维斯克，巴萨瓦拉杰·宾杰瓦达吉，李建荣，马克·皮普尔斯，
申请(专利权)人：俄亥俄州创新基金会，全国儿童医院研究所，
类型：发明
国别省市：美国;US