一种生物传感器的制备方法及外泌体检测方法技术

本发明专利技术提供了一种生物传感器的制备方法及外泌体检测方法。该生物传感器的制备方法包括如下步骤：提供一硅基底，并所述硅基底上形成金膜；在所述金膜上构建三维DNA纳米结构层，所述金膜和所述三维DNA纳米结构层一起作为第一接触层；提供一氟化乙烯丙烯共聚物薄膜，并在所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜上形成导电膜，所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜作为第二接触层；其中，所述第一接触层和所述第二接触层能够周期性地接触和分离，且在周期性地接触和分离过程在所述第一接触层和所述第二接触层之间形成电势差。该生物传感器无需任何信号放大即可实现直接定量出外泌体的浓度，且具有超高灵敏度，实现最低检测限为3个外泌体/μL。

Preparation of biosensor and detection of exosomes

【技术实现步骤摘要】
一种生物传感器的制备方法及外泌体检测方法
本专利技术涉及生物传感器领域，尤其涉及一种生物传感器的制备方法及外泌体检测方法。
技术介绍
外泌体是直径为30到150nm的膜封闭的细胞外囊泡，是细胞间通讯的重要调控因子。在生理和病理条件下，几乎所有的细胞都分泌外泌体。核酸、蛋白质和脂质等丰富的内含物取决于亲代细胞。外泌体是亲代细胞与受体细胞之间交流的重要信息和物质载体。它们参与许多基本的生理过程，例如神经元通讯、免疫反应、器官发育、肿瘤发生和转移。此外，由于外泌体在指示疾病相关的生理状态方面的重要作用，具有高稳定性和代表亲代细胞能力的外泌体被认为是诊断癌症等疾病的有希望的侵袭性生物标志物。因此，对外泌体的敏感识别和定量识别是生物学研究和临床诊断的迫切需要。然而，由于外泌体的尺寸很小，如何方便地定量外泌体仍是一个难题。在光学显微镜下难以计数外泌体，同样，由于弱光散射，流式细胞术的性能也不佳。外泌体的标准表征方法是阴性染色和电子显微镜可视化。然而，复杂的工艺和昂贵的仪器限制了这种方法的广泛应用。另一个常见的技术是纳米颗粒跟踪分析(NTA)，这需要本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物传感器的制备方法，其特征在于，用于对外泌体进行检测，所述制备方法包括如下步骤：/n提供一硅基底，并所述硅基底上形成金膜；/n在所述金膜上构建三维DNA纳米结构层，所述金膜和所述三维DNA纳米结构层一起作为第一接触层；/n提供一氟化乙烯丙烯共聚物薄膜，并在所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜上形成导电膜，所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜作为第二接触层；/n其中，所述第一接触层和所述第二接触层能够周期性地接触和分离，且在周期性地接触和分离过程在所述第一接触层和所述第二接触层之间形成电势差。/n

【技术特征摘要】
1.一种生物传感器的制备方法，其特征在于，用于对外泌体进行检测，所述制备方法包括如下步骤：
提供一硅基底，并所述硅基底上形成金膜；
在所述金膜上构建三维DNA纳米结构层，所述金膜和所述三维DNA纳米结构层一起作为第一接触层；
提供一氟化乙烯丙烯共聚物薄膜，并在所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜上形成导电膜，所述氟化乙烯丙烯共聚物薄膜作为第二接触层；
其中，所述第一接触层和所述第二接触层能够周期性地接触和分离，且在周期性地接触和分离过程在所述第一接触层和所述第二接触层之间形成电势差。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述在所述金膜上构建三维DNA纳米结构层，包括如下步骤：
提供多种单链DNA探针；
将所述多种单链DNA探针中的每条单链DNA分别溶解在含有氯化钠的磷酸盐缓冲液中，从而获得含单链DNA的混合液；
将多种所述含单链DNA的混合液混合在一起，并进行加热，从而获得三维DNA纳米结构层的前驱体溶液；
将所述前驱体溶液施加在所述金膜上，从而在所述金膜上构建形成三维DNA纳米结构层。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述氯化钠的浓度为范围在0.1-0.3mol/l中任一值；
所述磷酸盐缓冲液的浓度为范围在5-15mmol/l中任一值。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述将多种所述含单链DNA的混合液混合在一起，并进行加热的步骤中，加热温度为范围在80-110℃中任一值，加热时间为范围在1-10min中任一值。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括如下步骤：在所述金膜和所述导电膜上分别引出导线以与外电路电连接，从而实现向所述外电路上的灯源进行供电。


6.一种外泌体检测方法，其特征在于，所述外泌体检测方法利用如权利要求1-5中任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：文震，孙旭辉，谢凌婕，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32