一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶或有机磷农药的比色检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，包括：采用NaAc‑HAc缓冲溶液配制ACP溶液和AAP溶液，将多个不同浓度的ACP溶液与AAP溶液、MnO

A colorimetric detection method for acid phosphatase or organophosphorus pesticide based on manganese dioxide biomimetic oxidase activity

【技术实现步骤摘要】
一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶或有机磷农药的比色检测方法
本专利技术属于分析检测
，涉及一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶或有机磷农药的比色检测方法，更具体地，涉及一种基于二氧化锰的生物模拟氧化酶活性，用于酸性磷酸酶以及有机磷农药的检测。
技术介绍
酸性磷酸酶(ACP)是一种普遍存在的多功能酶，主要分布于哺乳动物的血液和组织中，在弱酸性条件下可以水解有机磷化合物的磷酸酯键。酸性磷酸酶作为一种磷酸单酯酶，它在调节细胞内各种生理变化中起着重要的作用。同时，大量研究指出，ACP的非正常表达与活化，与许多人类疾病存在关联性，包括甲状旁腺功能亢进、转移性前列腺癌、戈谢氏病、血栓性静脉炎以及与肾脏、静脉、骨骼等相关的疾病。因此，ACP被认为是一种重要的生物标志物和相关疾病的预后指标。此外，一些ACPs亚型如2C4型磷脂酸酸性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)被认为是潜在的药物靶点。因此，开发简便、灵敏、高选择性的ACP检测方法对临床诊断和药物筛选具有重要意义。近年来，人们探索了几种检测ACP的方法，包括本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于包括如下步骤：/n步骤(a)、采用NaAc-HAc缓冲溶液配制ACP溶液和AAP溶液，将多个不同浓度的ACP溶液与其底物AAP溶液混合并孵育；/n步骤(b)、将MnO

【技术特征摘要】
1.一种基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤(a)、采用NaAc-HAc缓冲溶液配制ACP溶液和AAP溶液，将多个不同浓度的ACP溶液与其底物AAP溶液混合并孵育；
步骤(b)、将MnO2纳米片溶液与步骤(a)得到的混合体系进行孵育反应；
步骤(c)、在步骤(b)得到的混合系统中加入显色底物ABTS，进行孵育反应，获得比色传感体系；
步骤(d)、在420nm波长处测定样品的紫外吸光度A；测定没有目标物ACP时，反应体系在420nm波长处的吸光度A0；利用测得的A0与A的吸光度差值ΔA，获得ACP浓度与吸光度差值ΔA的线性关系；
步骤(e)、根据步骤(d)所得到的线性关系与待测样品的吸光度差值ΔA，得到待测样品中ACP的浓度。


2.根据权利要求1所述的基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于步骤(a)中，所述的NaAc-HAc缓冲溶液为0.2mol·L-1、pH4.6的NaAc-HAc缓冲溶液。


3.根据权利要求1所述的基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于步骤(a)中，所述的孵育为在36～38℃下孵育15～25min，优选为在37℃下孵育20min；
步骤(b)中，所述的孵育为在36～38℃下孵育5～15min，优选为在37℃下孵育10min；
步骤(c)中，所述的孵育为在36～38℃下孵育5～60min，优选为在37℃下孵育50min。


4.根据权利要求1所述的基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于所述的比色传感体系中，AAP的浓度为1mM；ACP的浓度为0.075～3mU·mL-1；MnO2纳米片的浓度为0.015～0.15mg·mL-1，优选为0.075mg·mL-1；ABTS的浓度为2.5～10mM，优选为2.5mM。


5.根据权利要求1所述的基于二氧化锰仿生物模拟氧化酶活性对于酸性磷酸酶的比色检测方法，其特征在于步骤(d)中，测定吸光度的方法为：将样品放置紫外可见分光光度计后进行200～800nm全波长扫描，扫描速度...

【专利技术属性】
技术研发人员：周学敏，王晶，李昺之，卢巧云，翁晨园，李晓芸，严孝强，杨威，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32