一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料制造技术

本发明专利技术提供了一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料，该荧光染料为以萘酰亚胺为母体，以三苯基膦为定位基团，设计合成的一种能够对活细胞进行线粒体标记的荧光染料。通过在萘酰亚胺供电子一端引入两个氮杂环丁烷，有效抑制了染料的TICT，使其亮度和稳定性有了大幅度提高。水中吸光度达到43000M

A high brightness, high stability and high permeability mitochondrial fluorescent dye

【技术实现步骤摘要】
一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料
本专利技术属于荧光染料和成像领域，具体涉及一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料。
技术介绍
线粒体是细胞内能量产生、离子储运、信号转导的重要枢纽，监测其形态及与多种细胞器的相互作用，对深刻理解复杂的细胞生命活动非常必要。光学显微镜作为该领域研究的重要工具，其成像质量受到荧光染料的直接制约。而超分辨技术的快速发展带来了高分辨率的同时，又对荧光染料的性质提出了更高要求。染料亮度低会导致成像背景信号强，稳定性差将无法满足长时间观测的需求，而透膜性差会不仅降低标记速度、标记效率，也会带来背景信号增强、样品准备繁琐等问题。目前广泛使用的绿色线粒体染料MitoTrackerGreen需要通过长时间孵育来达到染色的目的。此外，该染料以花菁染料为母体，其裸露的双键极易被生物体内的单线态氧进攻而淬灭，导致无法长时间对线粒体的示踪；而双键的扭动也会带来非辐射跃迁的增加，量子效率减低。因此，开发一种高亮度、高光稳定性、高细胞膜渗透性的荧光成像染料对于活细胞线粒体超分辨荧光成像显得尤为迫切。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料，其特征在于：其结构式如下所示，/n

【技术特征摘要】
1.一种高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料，其特征在于：其结构式如下所示，





2.一种如权利要求1所述高亮度、高稳定性、高渗透性线粒体荧光染料的合成方法，其特征在于：具体步骤如下：
(1)中间体N-(6-羟己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐的合成：
将4-溴-5-硝基-1,8-萘酰亚胺，6-胺基-1-己醇，溶于乙醇，60-80℃下1-10h，减压蒸馏除去溶剂，残余物经硅胶柱分离得米白色固体N-(6-羟己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐；
(2)中间体N-(6-溴己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐的合成：
将N-(6-羟己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐溶于乙酸乙酯，向其中滴加三溴化磷，缓慢升温至60-90℃搅拌5-10h，反应结束后减压除去溶剂，硅胶色谱柱分离得到N-(6-溴己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐；
(3)中间体N-(6-三苯基膦己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐的合成：
将N-(6-溴己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐和三苯基膦溶于乙腈中，升温至120-140℃搅拌18-30h，反应结束后减压除去溶剂，硅胶色谱柱分离得到N-(6-三苯基膦己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐；
(4)化合物Mito-DAze的合成：
将N-(6-三苯基膦己基)-4-溴-5-硝基-1,8-萘酐溶于乙二醇甲醚，向其中滴加氮杂环丁烷，升温至110-130℃搅拌10-14h，反应结束后减压除去溶剂，硅胶色谱柱分离得到化合物Mito-DAze。

【专利技术属性】
技术研发人员：徐兆超，乔庆龙，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21