一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法技术

本发明专利技术涉及一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法，步骤如下：⑴成虾养殖水的制备；⑵亲虾饲料的配制；⑶锯齿新米虾的养殖；⑷胚胎的离体方法；⑸孵化的方式。本发明专利技术方法摆脱了母虾抱卵孵化的限制，从而提高了锯齿新米虾胚胎离体的孵化率，为利用米虾胚胎作为十足目甲壳动物基因编辑的实验材料以及大规模定向育种提供了有效手段。

A method to improve the hatchability of embryo in vitro culture of new shrimps

【技术实现步骤摘要】
一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法
本专利技术属于水产养殖
，尤其是一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法。
技术介绍
锯齿新米虾(Neocaridinadenticulata)的个体很小，体长仅2.5厘米左右，是一种淡水虾，它的卵为大型卵，具有抱卵习性。在我国分布较为广泛，具有重要的食用和经济价值。锯齿新米虾作为一种观赏类的小型虾，在观赏市场有着非常重要的地位，锯齿新米虾属于十足目甲壳动物，世界重要经济甲壳动物都属于十足目，锯齿新米虾作为十足目的代表具有个体小、繁殖快、胚胎好操作等特性，可以用于大规模开展十足目基于胚胎操作的分子育种研究。但是在现有的大部分锯齿新米虾养殖过程中，虾的抱卵和孵化技术不够成熟。现有的锯齿新米虾虾卵孵化以后，孵化水中细菌和寄生虫过多，容易导致虾卵死亡，给人们的养殖造成了一定的不便。通过检索，发现如下三篇与本专利技术专利申请相关的公开文献：1.中华新米虾胚胎发育的初步研究(分类号：S966.12)，包括：在水温22-26℃的室内条件下，其胚胎发育历时376小时。整个发育阶段分为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法，其特征在于：步骤如下：/n⑴成虾养殖水的制备：锯齿新米虾为淡水虾，所以普通的锯齿新米虾成虾用消过毒的水曝气三天以上即可放入成虾饲养；/n⑵亲虾饲料的配制：其组成成分及重量份数如下：/n海藻粉10-15份，小球藻10-15份，虾粉10-15份，秘鲁鱼粉10-15份，益生菌(Lactococcus lactis)5-10份，甲壳素1-2份，复合矿物质1-2份，复合维生素1-2份，发酵玉米蛋白10-15份，小麦粉10-15份，菠菜10-20份；/n⑶锯齿新米虾的养殖：将成虾按每m

【技术特征摘要】
1.一种提高锯齿新米虾胚胎离体培养孵化率的方法，其特征在于：步骤如下：
⑴成虾养殖水的制备：锯齿新米虾为淡水虾，所以普通的锯齿新米虾成虾用消过毒的水曝气三天以上即可放入成虾饲养；
⑵亲虾饲料的配制：其组成成分及重量份数如下：
海藻粉10-15份，小球藻10-15份，虾粉10-15份，秘鲁鱼粉10-15份，益生菌(Lactococcuslactis)5-10份，甲壳素1-2份，复合矿物质1-2份，复合维生素1-2份，发酵玉米蛋白10-15份，小麦粉10-15份，菠菜10-20份；
⑶锯齿新米虾的养殖：将成虾按每m3/20尾的数量放置在养殖缸中，用配制的养殖水养殖，用配制的亲虾饲料喂养成虾，待母虾抱卵；
⑷胚胎的离体方法：将养殖成熟的健康抱卵锯齿新米虾亲虾放在消过毒的玻璃皿上，用沾湿的纱布将亲虾的头部和尾部盖住，将亲虾腹部的卵一颗颗取出，立即收集已经离体的散卵，在低浓度高锰酸钾溶液中消毒5-10秒后，立即放入容器中倒入孵化水，孵化水的量按5-10ml/卵的比例加入，密封后放入4oC冰箱中，待用；
⑸孵化的方式：将在4℃冰箱下保存的受精卵拿出，在体视镜下观察细胞所处的时期，并做好拍照记录步骤；将配好的低浓度高锰酸钾溶液倒入已灭菌的玻璃皿中，将准备孵化的受精卵放入玻璃皿的低浓度高锰酸钾溶液中静置10-15秒，然后用已消毒的塑料吸管将卵全部吸出，放入已经消过毒的烧杯中，倒入配制好的孵化水，孵化水的量按5-10ml/卵的比例缓缓加入，在25±1℃室温下孵化24h后重新依照上述步骤消毒换水即可。

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【专利技术属性】
技术研发人员：王墨染，李欣，夏苏东，魏东，孙金辉，陈丽梅，毕相东，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津;12