治疗或预防认知障碍的人源化抗体、其生产方法及使用其用于治疗或预防认识障碍的剂技术

本发明专利技术涉及治疗或预防认知障碍的人源化抗体、其生产方法及使用其用于治疗或预防认识障碍的剂。本发明专利技术提供使用人源化抗体的方法和所述人源化抗体的组合物，所述人源化抗体结合在位置413的丝氨酸处被磷酸化的tau蛋白。

Humanized antibodies for the treatment or prevention of cognitive impairment, their production methods and agents for the treatment or prevention of cognitive impairment

【技术实现步骤摘要】
治疗或预防认知障碍的人源化抗体、其生产方法及使用其用于治疗或预防认识障碍的剂本申请是申请日为2018年02月27日、申请号为201880008302.X、名称为“治疗或预防认知障碍的人源化抗体、其生产方法及使用其用于治疗或预防认识障碍的剂”的专利技术申请的分案。I.相关申请的交叉引用本申请要求2017年2月27日提交的日本申请第2017-035594号的权益，其内容通过引用整体明确地并入本文。II.序列表本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且据此通过引用整体并入。2018年2月27日创建的所述ASCII拷贝命名为063785-06-5002-WO-SeqLstg-_ST25.txt，大小为323,584字节。III.
本公开涉及用于治疗性或预防性治疗认知障碍的人源化抗体、产生该人源化抗体的方法、使用该抗体的用于认知障碍的治疗剂或预防剂，以及使用本文公开的治疗剂治疗或预防认知障碍的方法。更具体地，本公开涉及具有改善认知功能的优良效果的新型人源化抗磷酸化tau抗体、产生该人源化抗体的方法、含有该人源化抗体的用于认知障碍的治疗剂或预防剂，以及使用人源化抗磷酸化tau抗体治疗或预防认知障碍的方法。IV.专利技术背景认知障碍或痴呆症是由于某些后天原因而发展的智力下降，从而导致社会适应障碍的疾患。认知障碍被分类为神经退行性疾病、血管性认知疾病、朊病毒疾病、传染病、代谢/内分泌疾病、创伤和脑外科疾病以及中毒性疾病(参见ToshifumiKishimoto和ShigekiTakahashi(编辑)，“STEPSeriesSeishinka”(日文文件)，第2版，Kaibashobo,2008，第103-104页)。截至2010年，日本约有210万痴呆患者，65岁以上老年人中的发病流行率(morbidityprevalencerate)约为8％至10％，甚至超过10％，并且这被认为是全球老龄化社会中的严重问题(TakashiAsada,“IgakunoAyumi”(日本文件),补充卷，"Cognitivedisorders",IshiyakuPublishing,2011，第5-10页)。有关认知障碍的基础疾病的数据表明，大多数是神经退行性疾病，诸如阿尔茨海默病(AD)和额颞叶变性(FTLD)，约35％为AD，约15％为AD和脑血管疾病的组合，5％是FTLD(同上)与神经退行性疾病相关的认知障碍的特征在于发展至少六个月或更长的时期的记忆损伤和/或人格改变的隐匿发作。神经退行过程与认知功能的损害程度高度相关，并且其中涉及的一致特征是存在神经原纤维缠结(NFT)(AlistairBurns等(编辑)，Dementia，2005年第3版，CRCPress，第408-464页)。tau蛋白是由位于人基因组的17号染色体(17q21)上的MAPT基因编码的蛋白质。tau蛋白是在中枢神经系统中大量表达的微管结合蛋白之一。已发现tau是在AD(最突出的神经退行性疾病之一)中形成NFT的成对的螺旋细丝和直的细丝中的主要成分蛋白，并且其细胞内积累已经在多种神经病理疾患中得到证实。tau首先牵涉在神经退行性疾病中，所述疾病基于MAPT基因中的突变与17号染色体相关的额颞叶痴呆及帕金森病(chromosome17-linkedfrontotemporaldementiawithParkinsonism,FTDP-17)中tau的累积之间的关系。据报道，MAPT基因中超过40个基因突变与FTDP-17相关(TetsuakiArai,“ShinkeiNaika”(日文文件)，第72卷，特别期，(增刊6)，2010，第46-51页)。这些基因突变被认为是改变tau同种型的比例或改变结构以及改变突变型tau与微管之间的相互作用，从而促成病状的发展。然而，与家族性神经退行性疾病不同，在散发性神经退行性疾病诸如AD中极少观察到MAPT中的突变。此外，在神经退行性疾病中累积的tau的特征在于通过磷酸化被高度修饰。此外，在表现出轻度认知损伤(MCI)的患者中，观察到脊髓液中磷酸化tau水平与垂体萎缩程度之间存在相关性，表明磷酸化tau作为tau蛋白病患者神经退行的高度可靠的生物标志物(WendyNoble等，ExpertOpiniononDrugDiscovery,2011，第6卷，第8期，第797-810页)。基于这些发现，已经尝试开发使用针对激酶的抑制剂的治疗，所述激酶是参与磷酸化的酶，特别是针对GSK-3β，用于抑制tau的过度磷酸化(同上)。然而，存在关于可能的副作用的担忧，因为诸如GSK-3β的激酶不仅牵涉于病理疾况，而且也牵涉于及正常生理过程中的功能控制。事实上，tau被GSK-3β磷酸化所在的一些位点与胎儿和正常人脑中所见的tau磷酸化位点一致(Burnes等人，同上)，表明该策略可影响正常tau功能的可能性。尽管认为细胞外tau源于细胞死亡导致的变性神经细胞的渗漏，但最近的研究表明，在过度的细胞内磷酸化后，tau被加工，然后主动分泌出细胞。从细胞分泌的磷酸化tau被认为在某些磷酸化位点被去磷酸化，随后作用于周围细胞的毒蕈碱受体M1和M3，从而产生各种效应，诸如促进细胞内tau磷酸化并促成细胞死亡(MiguelDiaz-Hernandes等，JournalofBiologicalChemistry,2010，第285卷，第42期，第32539-32548页和VenessaPlouffe等，PLoSONE,2012，第7卷，第36873页)。已经报道关于使用tau蛋白作为靶标的tau蛋白病的免疫疗法的实验，作为旨在执行针对tau的特定行为的尝试(参见Noble，同上，Kishimoto，同上，Asada，同上和Burns，同上)。人认知障碍的主要症状是记忆损伤和认知功能损伤，鉴于认知功能在基于记忆的判断、交流和表现中的作用，这是尤其重要。在另一方面，运动功能虽然是在与17号染色体相关的额颞叶痴呆与帕金森病(FTDP-17)和终末期阿尔茨海默病中发现的症状，但不一定是认知障碍中表现出的主要症状。因此，治疗认知障碍所要考虑的主要问题是认知功能的改善。然而，目前存在用于测试与tau蛋白病相关的认知功能功能损害的合适的动物模型，其将允许鉴定用于治疗认知障碍的治疗剂或预防剂。另外，不存在针对认知障碍表现出特异性和优异效果的此类剂。鉴于针对人对象的认知障碍的治疗性和预防性应用，需要人源化抗磷酸化tau抗体，其不仅对磷酸化tau具有高结合亲和力，而且对人体表现出降低的抗原性。V.
技术实现思路
在此背景下，在阿尔茨海默病的情况下可经历异常磷酸化的tau蛋白中的大量磷酸化位点中，本专利技术人着重于位置413处的丝氨酸残基(Ser413)的磷酸化位点，并且成功地产生了对Ser413磷酸化的tau具有特异性的多克隆兔抗体和单克隆小鼠抗体。本专利技术人还向显示磷酸化tau蛋白异常表达的认知障碍的模型小鼠施用了单克隆小鼠抗体，并证实观察到认知功能的改善(WO2013/180238A)。在一些实施方案中，本公本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗-pSer413 tau抗体，其包含：/n(A)(i)可变重(VH)结构域，其具有SEQ ID NO:20的氨基酸序列，和/n(ii)可变轻(VL)结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ IDNO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ IDNO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；/n(B)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:22的氨基酸序列，和/n(ii)VL结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ IDNO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；/n(C)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:24的氨基酸序列，和/n(ii)VL结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ IDNO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；/n(D)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列，和/n(ii)VL结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ IDNO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；/n(E)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:28的氨基酸序列，和/n(ii)VL结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ IDNO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；/n(F)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:116的氨基酸序列，和/n(ii)VL结构域，其具有SEQ ID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ IDNO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列；或/n(G)(i)VH结构域，其具有SEQ ID NO:117的氨基酸序列，和(ii)VL结构域，其具有SEQID NO:32、SEQ ID NO:34、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQ ID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:109、SEQ IDNO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113或SEQ ID NO:114的氨基酸序列。/n...

【技术特征摘要】
20170227 JP JP2017-0355941.一种抗-pSer413tau抗体，其包含：
(A)(i)可变重(VH)结构域，其具有SEQIDNO:20的氨基酸序列，和
(ii)可变轻(VL)结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；
(B)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:22的氨基酸序列，和
(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；
(C)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:24的氨基酸序列，和
(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；
(D)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:26的氨基酸序列，和
(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；
(E)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:28的氨基酸序列，和
(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；
(F)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:116的氨基酸序列，和
(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列；或
(G)(i)VH结构域，其具有SEQIDNO:117的氨基酸序列，和(ii)VL结构域，其具有SEQIDNO:32、SEQIDNO:34、SEQIDNO:40、SEQIDNO:42、SEQIDNO:103、SEQIDNO:104、SEQIDNO:105、SEQIDNO:106、SEQIDNO:107、SEQIDNO:108、SEQIDNO:109、SEQIDNO:110、SEQIDNO:111、SEQIDNO:112、SEQIDNO:113或SEQIDNO:114的氨基酸序列。


2.如权利要求1所述的抗-pSer413tau抗体，其中所述抗体对SEQIDNO:8的磷酸化肽的结合亲和力与所述抗体对SEQIDNO:69的非磷酸化肽的结合亲和力的比率为至少约40：1。


3.如权利要求1所述的抗-pSer413tau抗体，其中所述抗体包含重链恒定结构域，其具有SEQIDNO:135、SEQIDNO:136、SEQIDNO:137、SEQIDNO:138、SEQIDNO:139、SEQIDNO:140、SEQIDNO:141、SEQIDNO:142或SEQIDNO:143的氨基酸序列。


4.如权利要求1所述的抗-pSer413tau抗体，其中所述抗体包含轻链恒定结构域，其具有SEQIDNO:79或SEQIDNO:80的氨基酸序列。


5.如权利要求1所述的抗-pSer413tau抗体，其中所述抗体包含：
(A)(i)重链，其具有SEQIDNO:144、SEQIDNO:145、SEQIDNO:146、SEQIDNO:147、SEQIDNO:148、SEQIDNO:149、SEQIDNO:150、SEQIDNO:151、SEQIDNO:152、SEQIDNO:153、SEQIDNO:154、SEQIDNO:155、SEQIDNO:156、SEQIDNO:157、SEQIDNO:158、SEQIDNO:159、SEQIDNO:160或SEQIDNO:161的氨基酸序列，和
(ii)轻链，其具有SEQIDNO:184的氨基酸序列；或
(B)(i)重链，其具有SEQIDNO:144、SEQIDNO:145、SEQIDNO:146、SEQIDNO:147、SEQIDNO:148、SEQIDNO:149、SEQIDNO:150、SEQIDNO:151、SEQIDNO:152、SEQIDNO:153、SEQIDNO:154、SEQIDNO:155、SEQIDNO:156、SEQIDNO:157、SEQIDNO:158、SEQIDNO:159、SEQIDNO:160或SEQIDNO:161的氨基酸序列，和
(ii)轻链，其具有SEQIDNO:185的氨基酸序列。


6.一种治疗对象的tau蛋白病的方法，包括向所述对象施用如权利要求1所述的抗pSer413tau抗体。


7.如权利要求6所述的方法，其中所述tau蛋白病选自阿尔茨海默病、皮质基底节变性、进行性核上性麻痹、皮克病、嗜银颗粒性痴呆(嗜银颗粒病)、伴有早老性痴呆的多系统性tau蛋白病(MSTD)、与17号染色体相关的额颞叶痴呆及帕金森病(FTDP-17)、伴有神经原纤维缠结的痴呆、伴有钙化的弥漫性神经原纤维缠结(DNTC)、伴有球状神经胶质包涵体的白质tau蛋白病(WMT-GGI)、具有tau病理学的额颞叶变性(FTLD-tau)、Economo的脑炎后遗症、亚急性硬化性全脑炎和拳击手的脑病。


8.一种引起与至少在对应于SEQIDNO:1的Ser413的氨基酸残基上磷酸化的tau蛋白或tau肽的抗原-抗体反应人源化抗体或其片段或衍生物，其包含：
(A)VH结构域，其具有：
(i)SEQIDNO:30(VH65)的氨基酸序列，
(ii)SEQIDNO:30的氨基酸序列，其包含位置28处Thr对Ala的取代，
(iii)SEQIDNO:30的氨基酸序列，其包含位置30处Ser对Asn的取代，
(iv)SEQIDNO:30的氨基酸序列，其包含位置49处Gly对Val的取代，
(v)SEQIDNO:30的氨基酸序列，其包含位置64处Asp对Ala的取代，或
(vi)SEQIDNO:30的氨基酸序列，其包含位置78处Lys对Gln的取代；...

【专利技术属性】
技术研发人员：江口藤原浩，村上隆，井木直子，田野仓阿基拉，珍妮·E·贝克，索菲·帕尔芒捷贝特，安杰拉·玛丽·雅布隆斯基，丹尼尔·斯蒂芬·马拉绍柯，卡尔·美斯高夫斯基，格帕兰拉古·洛格纳汗，
申请(专利权)人：帝人制药株式会社，默沙东公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP