本发明专利技术公开了一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用,属于中医药领域。该中国被毛孢发酵物通过以下方式培养发酵:将脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH
Application of trichosporium chinense fermentation in the preparation of drugs for the treatment of heart failure
【技术实现步骤摘要】
一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用
本专利技术涉及中医药领域,具体地涉及一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用。
技术介绍
心力衰竭是临床越发常见的疾病之一,且并不是独立存在的疾病,发病诱因多样,几乎所有的心血管疾病都最终导致发生心力衰竭。例如各种因素诱发的心脏的超负荷,可导致心脏收缩与舒张功能发生障碍,心脏供血能力异常,最终导致瘀血堆积,全身功血不足,最终导致死亡。与此同时,心力衰竭有着较高的发病率和死亡率,严重危害人类健康。随着社会老龄化的日益严重,心血管疾病在中老年群体中高发,心率衰竭发病率逐年增高。同时由于年轻人的不当作息,心力衰竭也在年轻一代高发,临床上对该疾病也展开了许多的研究,但心衰成因机制多样,防治工作形势依然严峻,至今未有对各类心衰均治疗有效地理想的治疗方案。中国被毛孢(HirsutellasinensisX.J.Liu,Y.L.Guo)具有免疫调节和改善亚健康状态的作用,而且中国被毛孢在免疫系统、呼吸系统及泌尿系统等多方面药理实验验证其具有优良的效果。因其具有有较高的研究价值,现临床不断拓展对其的研究,更深入的研究其药理作用以及临床应用价值。但是中国被毛孢在治疗心衰上具有治疗作用尚未被研究。
技术实现思路
因此,本专利技术公开了一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用,可以显著抑制心肌异常肥厚,保护心肌细胞,改善心功能。中国被毛孢发酵物制备,属于发酵过程,具有一定的周期与不可控因素,如发酵周期过长,可能导致易发生杂菌污染。因此优化发酵培养基、培养温度等一系列发酵条件,缩短发酵周期,可有效提高中国被毛孢发酵物制备的成功率,并且使其最大的发挥其在心衰方面的治疗作用。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的:一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用。进一步地,所述中国被毛孢发酵物通过以下方法获得:1)培养基制作:将脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂溶于煮沸的纯水中,调节pH至6.9-7.1,经121℃灭菌45分钟后,冷却过滤,取滤液,分瓶培养,并在121℃灭菌45分钟,3天后观察确定无污染,得到培养基;培养基中,脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂的质量浓度分别为1-3%、1-2%、1-3%、1-3%、0.02%、0.01%、1-1.8%。2)将中国被毛孢接种至步骤1制作的培养基中,得到接种后的培养基。3)培养发酵:将步骤2接种后的培养基进行摇床培养,培养温度为17-19℃,摇床转速为150-200rpm,培养8-12天,得到发酵物。4)提炼:取步骤3所得发酵物,在4000-5000rpm转速下离心,再将离心沉淀物进行抽滤,并用纯水清洗2~3次,将沉淀物冷冻干燥,得到中国被毛孢发酵物。本专利技术的有益效果是:本专利技术的中国被毛孢发酵物治疗心衰的作用较为明显,且与价格高昂的冬虫夏草相比,节约成本,可降低药物价格。同时制作过程材料易得,制备过程简单,且发酵周期较短,仅需8-12天,有效减少杂菌污染的可能性,便于批量生产,安全稳定,药效好,具有较为显著的治疗心力衰竭,保护心肌组织的作用,易于临床应用。附图说明图1为中国被毛孢发酵物对小鼠心脏左心室切面直径的影响:(1a)为假手术组,(1b)为TAC造模组,(1c)为中国被毛孢组,(1d)为卡托普利组;图2为中国被毛孢发酵物对小鼠体重及左心指数的影响:(2a)为心脏质量(BW),(2b)为左心室质量指数(LW/BW);图3为中国被毛孢发酵物对小鼠心肌组织病理的影响(HE染色):(3a)为假手术组,(3b)为TAC造模组,(3c)为中国被毛孢组,(3d)为卡托普利组;图4为中国被毛孢发酵物对小鼠心肌组织胶原增生的影响(MASSON染色):(4a)为假手术组,(4b)为TAC造模组,(4c)为中国被毛孢组,(4d)为卡托普利组;图5为中国被毛孢发酵物对小鼠心功能(EF、FS)的影响:(5a-1)为射血分数(EF),(5a-2)为左心室短轴缩短率(FS),(5b-1)为假手术组心超图,(5b-2)为模型组心超图,(5b-3)为中国被毛孢组心超图,(5b-4)为卡托普利组心超图。具体实施方式为了充分理解本专利技术的目的,下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步解释说明。实施例1(1)将脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂溶于煮沸的纯水中,通过浓度为1mmol/L的HCl调节pH为6.9,经121℃灭菌45分钟后,冷却过滤取滤液,分装成250mL/瓶,再经121℃灭菌45分钟,观察3天,得到培养基,培养基中,脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂的质量浓度分别为1%、1%、1%、0.02%、0.01%、1%。发现培养基无污染,进行中国被毛孢的接种,得到接种后的培养基。(2)将步骤1接种后的培养基进行摇床培养,培养温度为17℃,摇床转速为150rpm,培养8天,得到发酵物,检查摇瓶,培养基中有大量的菌丝,并且摇瓶壁无杂菌生长为正常。(3)取步骤2获得的发酵物,在4000rpm转速下离心,将沉淀物进行抽虑,并用水清洗2次,冷冻干燥,得到最终产物。经RTCA系统“细胞指纹图谱”技术检测,证明上述方法得到的最终产物为中国被毛孢发酵物。实施例2(1)将脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂溶于煮沸的纯水中,经浓度为1mmol/L的NaOH调节pH至7.1,经121℃灭菌45分钟后,冷却过滤取滤液,分装成250mL/瓶,再经121℃灭菌45分钟,3天后观察培养基无污染,得到培养基,培养基中,脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂的质量浓度分别为3%、2%、3%、3%、0.02%、0.01%、1.8%;进行中国被毛孢的接种,得到接种后的培养基。(2)将步骤1经接种的培养基进行摇床培养,培养温度为19℃,摇床转速为200rpm,培养12天,得到发酵物,检查摇瓶,发现培养基中有大量的菌丝,并且摇瓶壁无杂菌生长为正常。(3)取步骤2中的发酵物,在5000rpm下离心后,将沉淀物抽虑,并用水清洗3次,冷冻干燥,得到最终产物。经RTCA系统“细胞指纹图谱”技术检测,证明上述方法制备得到的最终产物是中国被毛孢发酵物。实施例3用实施例1或2制备得到的中国被毛孢发酵物治疗小鼠心衰,采用口服灌胃给药的方式,中国被毛孢发酵物给药浓度为0.1g/ml,剂量为2g/kg,每日一次。本专利技术采用体重20-22g的小鼠构建非开胸式主动脉弓狭窄心衰模型。其方法为将小鼠预饲养1周后进行手术,采用0.3%戊巴比妥钠(75mg/kg)腹腔注射麻醉,捏住鼠尾,确保没有反射以后胸部和颈部剃毛。使用医用胶布将动物四肢和门齿固定于恒温手术台,温度设定37℃,碘伏消毒手术区域。眼科剪在小鼠颈部和本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用。/n
【技术特征摘要】
1.一种中国被毛孢发酵物在制备治疗心衰的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用,其特征在于,所述中国被毛孢发酵物通过以下方法获得:
1)培养基制作:将脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、琼脂溶于煮沸的纯水中,调节pH至6.9-7.1,经121℃灭菌45分钟后,冷却过滤,取滤液,分瓶培养,并在121℃灭菌45分钟,3天后观察确定无污染,得到培养基;培养基中,脱脂蚕蛹粉、玉米粉、麸皮、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4、...
【专利技术属性】
技术研发人员:寿旗扬,傅惠英,方明笋,金栌帅,金璐,曹贝贝,刘霞,
申请(专利权)人:浙江中医药大学,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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