一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法技术

本发明专利技术涉及新型抑菌剂制备技术，特别涉及一种利用芦苇提取物生物合成纳米银抑菌剂的制备方法。1、采集芦苇叶片，洗净后烘干至恒重；2、将干燥的芦苇叶片剪碎，连同提取剂一起置于回流装置内进行加热回流，将加热回流后的产物自然冷却、过滤，然后进行离心处理，取上清液即得到芦苇叶片提取液，溶液为浅黄色，保存备用；3、取上述芦苇叶片提取液与双蒸水混合制得混合液，再加入硝酸银溶液搅拌均匀后进行加热回流处理，待溶液变为金黄色时停止加热回流，即得纳米银抑菌剂。本发明专利技术原料资源丰富、成本低、绿色环保，利用芦苇叶中的丰富抗氧化物质为还原剂，合成的纳米银抑菌剂具有显著的抑菌活性和稳定性。

A method of preparing high effective bacteriostatic by reed leaf extract

【技术实现步骤摘要】
一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法
本专利技术涉及新型抑菌剂制备技术，特别涉及一种利用芦苇提取物生物合成纳米银抑菌剂的制备方法。
技术介绍
芦苇(PhragmitescommunisTrin.)为禾本科芦苇属多年生水生草本植物。芦苇多生于湿地、浅水中，繁殖能力强、生物量大，具有很强的环境适应能力，在水土保持、盐碱地治理、生态环境保护中发挥了重要的作用。芦苇纤维含量丰富，可以用于民用建筑材料、编制、纺织、造纸、饲料加工等多种用途。另外，芦苇的也有重要的药用价值和保健功能，其根、茎、叶中富含阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、淀粉、芦丁、野黄芩苷、橙皮苷、槲皮素、芹菜素、黄芩素、阿魏酸、咖啡酸、丁香醛、氨基酸、维生素C等生物活性成分。研究表明芦苇提取物对大肠杆菌(Escherichiacoli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)和解淀粉芽孢杆菌(Bacillusmyloliquefaciens)和黑曲霉(Aspergillusniger)等均具有一定的抑制作用。因此，芦苇中还原性物质含量较高，并且具有较强的抑菌作用，为成功制备抑菌剂提供了依据。纳米银(Silvernanoparticles，AgNPs)因其具有独特的小量子尺寸效应和大比表面效应表现出优异的抑菌性能，其抗菌谱广且不易产生耐药性，被看做是未来能替代抗生素的新一代的抑菌剂，成为抑菌领域研究的热点。传统制备纳米银的方法主要有化学合成法和物理合成法。其中，物理法对合成设备要求较高，不利于推广普及；而化学合成法在实验过程中往往需要加入硼氢化钠、水合肼等还原剂，对环境造成危害。近年来，以天然生物提取物为还原剂和稳定剂生物制备纳米银成为人们关注的热点，生物制备纳米银成本低廉、方法简单、反应条件温和、绿色环保，制备的产品分散性好、不易团聚、具有很好的抑菌活性。虽然人们已经利用生姜、橘皮、芒果皮、蓝莓叶、甘蓝等植物提取物成功制备出纳米银，但研究表明不同生物材料制备的纳米银在理化特性和生物学活性方面存在较大的差异。因此，需要人们不断筛选优化生物原材料以达到理想的制备效果。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决上述现有技术存在的不足之处，提供一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，该方法中用到的芦苇原材料资源丰富、成本低、制备过程简单、绿色环保，利用芦苇叶中的丰富抗氧化物质为还原剂，合成的纳米银抑菌剂具有较为显著的抑菌活性和稳定性，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为19.8和18.5mm，对两种病原菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为3.13μg/mL和6.25μg/mL，常温避光条件下能稳定放置三个月以上，适合做为抑菌剂加以推广和应用。一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，其特殊之处在于包括以下步骤：1、备料采集芦苇叶片，洗净后烘干至恒重，得到干燥的芦苇叶片；所述芦苇叶片先用水冲洗干净，再用双蒸水洗涤2-5次；所述芦苇叶片置于烘箱中烘干，烘箱内的温度控制在40-80℃；2、制备芦苇提取物将干燥的芦苇叶片剪碎，连同提取剂一起置于回流装置内进行加热回流，干燥的芦苇叶片与提取剂按照质量比1∶(2-500)的比例混合，将加热回流后的产物自然冷却、抽滤，然后进行离心处理，取上清液即得到芦苇叶片提取液，溶液为浅黄色，保存备用；所述提取剂为双蒸水、乙醇、氯仿中的任意一种；所述加热回流的温度控制在40-100℃，加热回流0.5-12h；所述离心处理在离心机内进行，离心机的转速控制在5000-12000rpm，离心10-30min；所述保存备用是在0-10℃的环境下进行保存；3、以芦苇叶片提取物为还原剂一步法生物合成纳米银取上述芦苇叶片提取液与双蒸水按照体积比为1∶(1-100)的比例混合制得混合液，再加入硝酸银溶液搅拌均匀后进行加热回流处理，其中，硝酸银溶液与混合液的体积比为1∶(1-1000)，待溶液变为金黄色时停止加热回流，即得到生物合成的纳米银抑菌剂，避光保存；所述AgNO3溶液的浓度为0.01-1M；所述加热回流的温度控制在40-100℃，加热回流0.5-12h；所述避光保存的温度控制在0-10℃。本专利技术利用芦苇叶提取液生物合成的纳米银抑菌剂，采用的原料芦苇叶在自然界生物量大，通过本专利技术可以将其充分利用。本专利技术涉及的合成方法生产成本低廉，反应温和环保，能够避免传统化学合成法危害环境的弊端，合成时间短，生产效率高。抑菌实验表明，芦苇叶生物合成纳米银抑菌剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为19.8和18.5mm，对两种病原菌的MIC分别为3.13μg/mL和6.25μg/mL。说明该抑菌剂对水产病原菌抑菌谱广，抑菌效果显著，稳定性实验表明该抑菌剂在常温避光条件下能稳定放置三个月以上，适合做为抑菌剂加以推广和应用。附图说明图1：本专利技术芦苇叶片提取液生物合成纳米银抑菌剂的紫外可见吸收光谱图；图2：本专利技术芦苇叶片提取液生物合成纳米银抑菌剂的透射电镜照片。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例的一种利用芦苇叶提取液生物合成的纳米银抑菌剂的制备工艺，具体步骤入如下：(1)材料准备：采集芦苇叶片，先用自来水冲洗干净后，再用双蒸水洗涤3次，60℃烘干至恒重，得到干燥的芦苇叶片。(2)芦苇提取物的制备：称取上述芦苇叶片1.0g，将叶片剪碎，加入100mL的双蒸水，90℃加热回流3h，将制得的溶液自然冷却，抽滤，8000rpm离心10min，取上清液即得到芦苇叶片提取液。(3)以芦苇叶片提取物为还原剂一步法生物合成纳米银：取上述芦苇叶片提取液5mL，加入到14mL双蒸水中，再加入0.1M的硝酸银溶液1mL(终浓度5mM)，搅拌均匀，90℃加热回流约1h，待溶液逐渐变为金黄色时停止加热，4℃避光保存。实施例2本实施例的一种利用芦苇叶提取液生物合成的纳米银抑菌剂的制备工艺，具体步骤如下：(1)材料准备：采集芦苇叶片，先用自来水冲洗干净后，再用双蒸水洗涤3次，60℃烘干至恒重，得到干燥的芦苇叶片。(2)芦苇提取物的制备：称取上述芦苇叶片5.0g，将叶片剪碎，加入100mL70％的乙醇，70℃加热回流1h，将制得的溶液自然冷却，抽滤，8000rpm离心10min，取上清液即得到芦苇叶片提取液。(3)以芦苇叶片提取物为还原剂一步法生物合成纳米银：取上述芦苇叶片提取液1mL，加入到18mL双蒸水中，再加入0.1M的硝酸银溶液200μL，定容至20mL(硝酸银终浓度1mM)，搅拌均匀，70℃加热回流约15m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，其特征于包括以下步骤：/n1)备料/n采集芦苇叶片，洗净后烘干至恒重，得到干燥的芦苇叶片；/n2)制备芦苇提取物/n将干燥的芦苇叶片剪碎，连同提取剂一起置于回流装置内进行加热回流，干燥的芦苇叶片与提取剂按照质量比1∶(2-100)的比例混合，将加热回流后的产物自然冷却、过滤，然后进行离心处理，取上清液即得到芦苇叶片提取液，溶液为浅黄色，保存备用；/n3)以芦苇叶片提取物为还原剂一步法生物合成纳米银/n取上述芦苇叶片提取液与双蒸水按照体积比为1∶(1-100)的比例混合制得混合液，再加入硝酸银溶液搅拌均匀后进行加热回流处理，其中，硝酸银溶液与混合液的体积比为1∶(1-1000)，待溶液变为金黄色时停止加热回流，即得到生物合成的纳米银抑菌剂，避光保存。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，其特征于包括以下步骤：
1)备料
采集芦苇叶片，洗净后烘干至恒重，得到干燥的芦苇叶片；
2)制备芦苇提取物
将干燥的芦苇叶片剪碎，连同提取剂一起置于回流装置内进行加热回流，干燥的芦苇叶片与提取剂按照质量比1∶(2-100)的比例混合，将加热回流后的产物自然冷却、过滤，然后进行离心处理，取上清液即得到芦苇叶片提取液，溶液为浅黄色，保存备用；
3)以芦苇叶片提取物为还原剂一步法生物合成纳米银
取上述芦苇叶片提取液与双蒸水按照体积比为1∶(1-100)的比例混合制得混合液，再加入硝酸银溶液搅拌均匀后进行加热回流处理，其中，硝酸银溶液与混合液的体积比为1∶(1-1000)，待溶液变为金黄色时停止加热回流，即得到生物合成的纳米银抑菌剂，避光保存。


2.按照权利要求1所述的一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，其特征于步骤1)中所述芦苇叶片先用水冲洗干净，再用双蒸水洗涤2-5次。


3.按照权利要求1所述的一种利用芦苇叶片提取物制备高效抑菌剂的方法，其特征于步骤1)中所述芦苇叶片置于烘箱中烘干，烘箱内的温度控制在50-80℃。


4.按照权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：王磊，宿红艳，吴凡林，肖雨晴，马欣冉，
申请(专利权)人：鲁东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37