一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法技术

本发明专利技术提供了一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，属于大白菜育种技术领域，所述方法将携带抗根肿病基因的两种亲本Y1031‑1(Crr3)、Y903‑1(CRb)杂交后、自交，将自交后材料与携带Crr1a纯合根肿病抗性基因和纯合耐抽薹BrFLC1

A method of aggregation breeding for bolting resistant Chinese Cabbage

【技术实现步骤摘要】
一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法
本专利技术属于大白菜育种
，尤其涉及一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法。
技术介绍
大白菜(Brassicarapasubsp.pekinensis)是十字花科芸薹属中的常见蔬菜，种植和分布面积广，是我国菜篮子中的重要蔬菜。大白菜为两性花，异花授粉作物，杂种优势十分明显。近年来，由于芸薹根肿菌的侵染，大白菜根肿病频发，且在世界范围内的危害面积日益扩大，导致大白菜的品质和产量受到了极大影响，根肿病严重时甚至导致绝收，该病现已成为大白菜育种过程中亟须解决的问题。由于根肿菌在土壤中的存活时间长，携带休眠孢子的土壤很容易导致病害的持续发生，而且利用农业、化学和生物等防治手段不能从根本上解决根肿病的防治问题，所以，培育抗根肿病的大白菜新品种是防治该病的最佳方法。根肿病生理小种的性质会发生变化情况，这是每个根肿病研究者都不容小觑的一个问题，也是目前根肿病防治中最难克服的问题之一。多年种植单一的抗病品种，最后会使得抗病品种抗性丧失，这主要是由于根肿菌大多混生，繁殖力超强，在繁殖过程会迅速积累一些变异，随着某一抗病品种的长期种植，土壤中优势生理小种种群数量降低，而混生的其他生理小种或变异的生理小种则逐渐成为新的优势种群，由于抗病基因与不同生理小种存在对应关系，从而造成抗病品种抗病性丧失，给抗病育种带来了极大挑战。这也提醒我们需要掌握其变化规律，根据其规律合理的开发和利用抗病品种，减少根肿病的危害。先期抽薹现象在我国春季大白菜及冷凉地区春夏白菜生产中普遍存在的现象，其后果主要是抑制白菜叶片中营养物质积累，导致产量和品质下降；大白菜抽薹开花是受复杂基因网络调控的数量性状，并且该网络中的很多基因都受表观遗传水平上的调控。目前尚没有一种快速高效的抗根肿病和耐抽薹大白菜的选育方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，所述方法将携带抗根肿病基因的两种亲本Y1031-1(Crr3)、Y903-1(CRb)杂交后、自交，将自交后材料与携带Crr1a纯合根肿病抗性基因和纯合耐抽薹BrFLC1GG基因的14CR514-16(Crr1a+BrFLC1GG)材料杂交，获得的纯合材料为抗根肿病耐抽薹大白菜；筛选的过程中利用分子标记技术选育纯合材料，所述方法能够显著提高目标性状选择的准确性和抗病育种工作的效率。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了一种一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，包括以下步骤：1)以Y1031-1(Crr3)为母本，以Y903-1(CRb)为父本进行杂交获得基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种；将所述基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种自交，利用分子标记筛选获得基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子；2)以步骤1)中获得的基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子为母本，以携带纯合抗根肿病基因Crr1a和耐抽薹纯合位点BrFLC1GG的14CR514-16为父本，杂交获得基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-的杂合F1代种子；3)采用游离小孢子培养方法对所述基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-的杂合F1代种子进行培养，利用分子标记筛选纯合单株获得基因型为RCrr1aRCrr1aRCrr3RCrr3RCRbRCRbFLC1GFLC1G的纯合抗根肿病耐抽薹大白菜。优选的，步骤1)中所述分子筛选标记包括RCrr3基因的分子标记；扩增所述RCrr3基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示。优选的，步骤1)中所述分子筛选标记包括RCRb基因的分子标记；扩增所述RCRb基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.3和SEQIDNo.4所示。优选的，步骤2)中所述分子筛选标记包括RCrr1a基因的分子标记；扩增所述RCrrla基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.5和SEQIDNo.6所示。优选的，步骤2)中所述分子筛选标记包括BrFLC1GG基因的SNP-KASP检测；进行所述BrFLC1GG基因的SNP-KASP检测的引物包括核苷酸序列如SEQIDNo.7、SEQIDNo.8和SEQIDNo.9所示。优选的，步骤1)和步骤2)中的杂交为人工授粉杂交。优选的，步骤4)中所述游离小孢子培养方法包括以下步骤：S1)将所述基因型为RCrr1aRCrr1aRCrr3RCrr3RCRbRCRbFLC1GFLC1G的杂合F1代种子进行低温春化处理后进行播种，培养获得大白菜植株；S2)从所述大白菜植株的花蕾中分离获得小孢子；S3)将所述小孢子在32～35℃暗培养2～3d后，25℃继续暗培养8～12d获得胚状体；S4)将所述胚状体光照培养、分化、生根获得大白菜植株。优选的，所述低温春化处理为将催芽后的种子置于4～8℃，处理25～30d。优选的，步骤S4)中所述光照培养的光照强度为8000～12000lx；所述光照培养的光照时间为10～14h/d。优选的，所述光照培养的时间为2～3d。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，通过将携带不同抗根肿病基因的亲本杂交后、进行自交，将自交后获得的纯合材料将自交后材料与携带Crr1a纯合根肿病抗性基因和纯合耐抽薹BrFLC1GG基因的14CR514-16(Crr1a+BrFLC1GG)材料杂交，获得的纯合材料为抗根肿病耐抽薹大白菜；，筛选的过程中利用分子标记技术选育纯合材料，所述方法能够显著提高目标性状选择的准确性和抗病育种工作的效率。利用本专利技术所述的方法能够获得聚合四种抗根肿病耐抽薹基因的纯合材料。附图说明图1为聚合含有Crr3、CRb、Crr1a和BrFLC1GG四个基因纯合材料技术路线；图2为聚合Crr1a,Crr3和CRb三个抗性基因的纯合材料电泳图；图3为聚合含有耐抽薹位点BrFLC1纯合材料的KASP-SNP位点选择。具体实施方式本专利技术提供了一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，包括以下步骤：1)以Y1031-1(Crr3)为母本，以Y903-1(CRb)为父本进行杂交获得基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种；将所述基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种自交，利用分子标记筛选获得基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子；2)以步骤1)中获得的基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子为母本，以携带纯合抗根肿病基因Crr1a和耐抽薹纯合位点BrFLC1GG的14CR514-16为父本，杂交获得基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-的杂合F1代种子；3)采用游离小孢子培养方法对所述基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，包括以下步骤：/n1)以Y1031-1(Crr3)为母本，以Y903-1(CRb)为父本进行杂交获得基因型为R

【技术特征摘要】
1.一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，包括以下步骤：
1)以Y1031-1(Crr3)为母本，以Y903-1(CRb)为父本进行杂交获得基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种；将所述基因型为RCrr3-RCRb-的F1真杂种自交，利用分子标记筛选获得基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子；
2)以步骤1)中获得的基因型为RCrr3RCrr3RCRbRCRb的F2种子为母本，以携带纯合抗根肿病基因Crr1a和耐抽薹纯合位点BrFLC1GG的14CR514-16为父本，杂交获得基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-的杂合F1代种子；
3)采用游离小孢子培养方法对所述基因型为RCrr1a-RCrr3-RCRb-FLC1G-的杂合F1代种子进行培养，利用分子标记筛选纯合单株获得基因型为RCrr1aRCrr1aRCrr3RCrr3RCRbRCRbFLC1GFLC1G的纯合抗根肿病耐抽薹大白菜。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述分子筛选标记包括RCrr3基因的分子标记；扩增所述RCrr3基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述分子筛选标记包括RCRb基因的分子标记；扩增所述RCRb基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.3和SEQIDNo.4所示。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述分子筛选标记包括RCrr...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏小春，原玉香，张晓伟，杨双娟，赵艳艳，王志勇，
申请(专利权)人：河南省农业科学院园艺研究所，
类型：发明
国别省市：河南;41