一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法技术

本发明专利技术公开了一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法，包括以下步骤：取莲草直胸跳甲当天在喜旱莲子草上产下的卵，连叶子采下，放置在培养皿中，底部用蒸馏水湿滤纸或1％(m/v)琼脂培养基进行保湿，顶部用保鲜膜封口，并扎上小孔进行通风，在保藏温度为15℃下，保藏莲草直胸跳甲卵至不影响各阶段的存活率、成虫繁殖力及种群增长的保藏时间5～7天。本发明专利技术解决了现有莲草直胸跳甲卵低温保藏后，无法确定对莲草直胸跳甲后续发育阶段、种群甚至下一代影响的问题。本发明专利技术能够在不影响其后续发育阶段、种群甚至下一代的情况下，使莲草直胸跳甲卵达到最长保藏时间。

A low temperature preservation method for the eggs of Springer beetle

【技术实现步骤摘要】
一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法
本专利技术涉及一种昆虫卵的低温保藏方法，具体涉及一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法。
技术介绍
伴随着全球一体化进程的飞速发展，入侵生物明显增多，威胁全球生态安全与生物安全。中国是遭受外来生物入侵危害最严重的国家之一，在已确定的600多种外来入侵物种中，入侵植物占近一半。这已经成为制约我国经济发展的重要因素之一。喜旱莲子草Alternantheraphiloxeroides是全球性的恶性杂草，上世纪30年代传入我国，现已扩散到全国20多个省、市、自治区，对农田种植、淡水养殖、水利事业、航运事业及景观生态等造成严重威胁，每年造成的经济损失高达6亿元人民币。我国国家环保总局与中国科学院联合公布的16种重要外来入侵种中喜旱莲子草名列三甲。莲草直胸跳甲Agasicleshygrophila为喜旱莲子草的专食性天敌昆虫，由于其良好的防治效果，先后被美国、澳大利亚、新西兰、泰国等国家引进。我国于1986年从美国佛罗里达引进该天敌对喜旱莲子草进行生物防治，已经在重庆、长沙、广西、福建等地建立种群，并取得良好的防治效果。虽然莲草直胸跳甲是喜旱莲子草的最有效天敌，但是喜旱莲子草的分布普遍大于其天敌分布的面积，高纬度地区喜旱莲子草的控制是世界性的难题。在高纬地区冬季到来时，喜旱莲子草生长衰弱，而且此虫无滞育现象，造成了莲草直胸跳甲大量死亡，且种群建立也受早春低温的影响。因此，低温限制了莲草直胸跳甲的分布北界和在高纬度地区的控草效果。在低纬度地区，莲草直胸跳甲种群随季节变化，消长明显。特别在夏季，正值喜旱莲子草的生长高峰期，但高温却对莲草直胸跳甲的种群有明显的抑制作用。因此，在这些地区和季节，对莲草直胸跳甲进行低温保藏，优化大量生产条件，待条件合适时大量释放是维持生物防治效果的关键，具有重要的研究价值和实践意义。目前国内外关于莲草直胸跳甲的低温保藏研究有6篇文献进行报道。第一篇文献(Stewartetal.Temperatureeffectsonthealligatorweedflea-beetle,Agasicleshygrophila(Coleoptera:Chrysomelidae):implicationsforbiologicalcontrolinNewZealand.UniversityofCapeTown,Stellenbosch,SouthAfrica,1996)研究表明，莲草直胸跳甲成虫在10℃下冷藏4周后仅有8％的个体存活，7周后无存活；第二篇文献(Stewartetal.Influenceoftemperatureonadultlongevity,ovipositionandfertilityofAgasicleshygrophilaSelman&Vogt(Coleoptera:Chrysomelidae).NewZealandJournalofZoology,1999,26(3):191-197)研究表明，成虫在15℃冷藏1周后卵的孵化率为31％，冷藏4周后降至2％；第三篇文献(傅建炜等.温度对莲草直胸跳甲成虫繁殖特性和卵孵化的影响.生物安全学报,2011,20(2),119-123)研究表明莲草直胸跳甲卵在15℃冷藏10天卵的孵化率不受影响；第四篇文献(Guoetal.PerformanceofAgasicleshygrophila(Coleoptera:Chrysomelidae),abiologicalcontrolagentofinvasivealligatorweed,atlownon-freezingtemperatures.BiologicalInvasions,14:1597-1608)研究表明，莲草直胸跳甲成虫在4℃恒温条件下可存活10天，12℃可存活1个月以上，在4-10℃的温度下冷藏10天，成虫不产卵，在12℃恒温冷藏后，成虫的平均产卵量是对照条件25℃下的1/10；第五篇文献(曹雪等.天敌莲草直胸跳甲保藏方法初探.山西农业科学,2013,41(7):738-741,744)研究表明，莲草直胸跳甲卵和成虫这两个虫态更适宜低温保藏，且在5–10℃下保藏较好，卵在10℃下冷藏4天对其孵化没有影响；第六篇文献(Liuetal.Responsetoshort-termcoldstorageforeggsofAgasicleshygrophila(Coleoptera:Chrysomelidae),abiologicalcontrolagentofalligatorweedAlternantheraphiloxeroides(Caryophyllales:Amaranthaceae))研究表明，15℃是莲草直胸跳甲卵的适宜保藏温度，该温度下处理5天跳甲的年龄阶段特异性存活率不受影响，种群增长率增加、寿命延长、繁殖能力增强。关于莲草直胸跳甲卵低温保藏不同时间后，对跳甲后续发育阶段、种群甚至下一代的影响未见报道。
技术实现思路
为了克服现有莲草直胸跳甲卵低温保藏后，无法确定对莲草直胸跳甲后续发育阶段、种群甚至下一代影响的缺陷，本专利技术提供了一种能够在不影响其后续发育阶段、种群甚至下一代的情况下，使莲草直胸跳甲卵达到最长保藏时间的低温保藏方法。本专利技术为了达到上述目的所采用的技术方案是：一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法，包括以下步骤：取莲草直胸跳甲当天在喜旱莲子草上产下的卵，连叶子采下，放置在培养皿中，底部用蒸馏水湿滤纸或1％(m/v)琼脂培养基进行保湿，顶部用保鲜膜封口，并扎上小孔进行通风，在保藏温度15℃下，保藏莲草直胸跳甲卵至不影响各阶段存活率、发育时间、寿命、繁殖力、种群参数以及F1代卵的孵化率和卵历期的保藏时间为5～7天。优选的，所述蒸馏水湿滤纸保藏低于5天，1％(m/v)琼脂培养基保藏超过5天。优选的，所述保藏时间为7天。本专利技术提供了莲草直胸跳甲卵的低温保藏的关键影响因子(温度和保湿介质)，确定了莲草直胸跳甲卵期低温保藏的时间。本专利技术通过莲草直胸跳甲卵经过不同保藏条件后各阶段(卵、幼虫、蛹、成虫)的存活率、发育时间、繁殖力和寿命等生命参数，内禀增长率、周限增长率、净繁殖率、平均世代时间等种群参数，以及F1代卵的孵化率和卵历期，与25℃未经冷藏下的参数进行对比，发育时间延长，其它参数没有显著差异的，可以用于实际生产。附图说明现在参考附图对本专利技术作进一步描述，其中：图1不同保湿介质保湿下15℃保藏不同时间后莲草直胸跳甲卵的历期；图2莲草直胸跳甲卵在15℃保藏不同时间后年龄-阶段特异性存活率sxj；(A)卵在25℃饲养的对照组(B)卵在15℃保藏5天(C)卵在15℃保藏7天(D)卵在15℃保藏10天(E)卵在15℃保藏15天(F)卵在15℃保藏18天。每天记录幼虫、蛹和成虫的存活数直至所有个体都死亡；图3莲草直胸跳甲卵在15℃保藏不同时间后年龄特异性存活率lx、雌性年龄-阶段特异性繁殖力fx4、年龄特异性繁殖力mx和年龄特异性净繁殖力lxmx；(A)卵在25℃饲养的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法，其特征在于，取莲草直胸跳甲当天在喜旱莲子草上产下的卵，连叶子采下，放置在培养皿中，底部用蒸馏水湿滤纸或1％(m/v)琼脂培养基进行保湿，顶部用保鲜膜封口，并扎上小孔进行通风，在保藏温度15℃下，保藏莲草直胸跳甲卵至不影响各阶段存活率、发育时间、寿命、繁殖力、种群参数以及F

【技术特征摘要】
1.一种莲草直胸跳甲卵的低温保藏方法，其特征在于，取莲草直胸跳甲当天在喜旱莲子草上产下的卵，连叶子采下，放置在培养皿中，底部用蒸馏水湿滤纸或1％(m/v)琼脂培养基进行保湿，顶部用保鲜膜封口，并扎上小孔进行通风，在保藏温度15℃下，保藏莲草直胸跳甲卵至不影响各阶段存活率、发育时间、寿命、繁殖力、种群参数以及F...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳红，王苑馨，王锦华，马瑞燕，贾栋，胡军，王欣晨，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：山西;14