一种水晶青柚的组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种水晶青柚的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取水晶青柚的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽，所述水晶青柚的外植体为水晶青柚的带节茎段，所述的外植体诱导培养中使用的外植体诱导培养基包括以下组分：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/L D‑泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/L L‑半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、以及0.2～1.0mg/L 6‑BA、0.1～0.8mg/L NAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。本发明专利技术选择水晶青柚带节茎段为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养以及移栽等步骤实现了水晶青柚的组培快繁，其诱导率达到了85％以上，成活率达到了85％以上。

A method of tissue culture and rapid propagation of crystal grapefruit

【技术实现步骤摘要】
一种水晶青柚的组培快繁方法
本专利技术涉及植物组织培养方法，具体涉及水晶青柚的组培快繁方法。
技术介绍
水晶青柚原产马来西亚。海南引种成功，为我国热带、亚热带水果家族增添了一个新品种，并表现出优良的性状和很高的经济效益。水晶青柚的叶、花、果、皮都可以提取香精油。柚皮的含油量为1.2-2％。果肉(汁胞)可制成柚汁、柚啤等天然饮料。果胶在化妆品中用作乳化剂，在医药工业中用作有膏剂，在食品工业中用作糖浆的增调剂及胶凝剂，试制果冻、果丹皮、果酱、果泥、湿态蜜饯、混浊果汁的添加剂。柚皮可用作加工蜜饯凉果和制作罐头的配料和原料。柚皮中还含有较多的柚皮甙和新橙皮甙.这些成分味苦使人生畏，但却可以利用它们作为基料，制成比甘蔗还甜1500-2000倍的新型甜味剂——新橙皮甙二氢查尔酮。水晶青柚营养丰富。果汁可溶性固形物12-25％。每100毫升果汁中含糖7-15克，酸0.3-1.5克，维生素C40-250毫克；此外还含有丰富的维生素B1、维生素B2、维生素P、胡萝卜素、钙、磷、铁、镁、锌、钾、钠等。成熟果实果皮的油胞核果肉的汁胞中含有高级醇、醛、酮、挥发性有机酸与烯等，发出诱人的香气，直至幽香满室，食之清香盈口。目前，国内外尚未有水晶青柚组织培养技术的报道，也未有水晶青柚组培快繁专利的申请。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种水晶青柚的组培快繁方法，本专利技术选择水晶青柚带节茎段为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养以及移栽等步骤，其诱导率达到了85％以上，移栽成活率达到了85％以上，实现了水晶青柚的组培快繁。本专利技术提供的技术方案为：一种水晶青柚的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取水晶青柚的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽；所述水晶青柚的外植体为水晶青柚的带节茎段，所述的外植体诱导培养中使用的外植体诱导培养基包括以下组分：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/LD-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/LL-半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、0.2～1.0mg/L6-BA、0.1～0.8mg/LNAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的外植体诱导培养具体为：将采集得到的作为外植体的水晶青柚消毒后剪切成2.0～2.5cm的带节茎段并接种到诱导培养基中，置于25℃全黑暗培养15～25天即可诱导形成不定芽。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的增殖培养使用的增殖培养基包括：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/LD-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/LL-半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、0.8～1.5mg/L6-BA、1.0～1.5mg/LNAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的增殖培养具体为：将外植体诱导培养得到的不定芽切成长1.5～2.0cm的茎段并接种到增殖培养基中培养20～30天即可实现不定芽的增殖。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的生根培养使用的生根培养基包括：以White为基本培养基，附加0.3～0.5mg/LD-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、0.5～1.0mg/L6-BA、25～35g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的生根培养具体为：从增殖培养得到增殖后的不定芽的基部切取2.0～3.0cm不定芽并接种到生根培养基中培养20～30天即能实现试管苗的生根。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，所述的移栽具体为：将经生根培养操作得到的根系生长良好的试管苗在温室大棚的自然光下炼苗10天，洗净根部的培养基移栽于体积比为1:1:2的腐殖土、泥炭土、河沙混合基质中栽培成苗即得水晶青柚种苗。在上述的水晶青柚的组培快繁方法中，增殖培养、生根培养中培养条件均为：培养温度为25～28℃，光照强度为2500～3000lx，光照时间为12～14小时/天。有益效果：本专利技术采用植物组织培养技术建立了水晶青柚的组培快繁方法，选择水晶青柚带节茎段为外植体，经诱导培养、增殖培养、生根培养以及移栽等步骤实现水晶青柚的快速繁殖，其诱导率达到了85％以上，移栽成活率达到了85％以上，周期短、成本低廉、繁殖系数高、种苗生长一致，可直接用于水晶青柚种苗的工厂化生产，对于促进水晶青柚的推广种植具有重大意义。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制。实施例一外植体采集：选取生长健壮、无明显病害的水晶青柚植株中上部、光照充足的带节茎段为外植体，采集后保水保湿处理。外植体诱导：将采集的外植体用自来水下冲洗8小时，置于超净工作台中于75％的乙醇溶液中消毒30秒，无菌水冲洗7次后用无菌滤纸吸干水分后，置于0.5％的次氯酸钠溶液中消毒25分钟，无菌水冲洗10次后用无菌滤纸吸干水分后切成2.0～2.5cm左右的带节茎段并接种到诱导培养基中，置于25℃全黑暗培养15天即可诱导形成不定芽，诱导率达93％。其中，诱导培养基为：WPM培养基+4.0mg/L核黄素+0.5mg/LD-泛酸钙+6.0mg/L抗坏血酸+5.0mg/LL-半胱氨酸+0.05mg/L生物素+1.0mg/L6-BA+0.8mg/LNAA+25～30g/L蔗糖+3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。增殖培养：将诱导得到的不定芽切成长约1.5cm的茎段并接种到增殖培养基中培养20天即可实现不定芽的增殖，增殖系数达到5.0倍。其中，增殖培养基为：WPM培养基+4.0mg/L核黄素+0.5mg/LD-泛酸钙+6.0mg/L抗坏血酸+5.0mg/LL-半胱氨酸+0.05mg/L生物素+1.5mg/L6-BA+1.5mg/LNAA+25～30g/L蔗糖+3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。生根培养：从基部切取增殖得到的长约2.0～3.0cm的不定芽并接种到生根培养基中培养20天即能实现试管苗的生根，生根率达到95.8％。其中，生根培养基为：White培养基+0.5mg/LD-泛酸钙+6.0mg/L抗坏血酸+1.0mg/L6-BA+25～35g/L蔗糖+3.0～4.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。移栽：将根系生长良好的试管苗在温室大棚的自然光下炼苗10天，洗净根部的培养基移栽于体积比为1:1:2的腐殖土、泥炭土、河沙混合基质中栽培成苗即得水晶青柚种苗，移栽15天后成活率达到85％以上。增殖培养和生根培养的培养条件为：培养温度为25℃，光照强度为3000lx，光照时间为14小时/天。实施例二外植体采集：选取生长健壮、无明显病害的水晶青柚植株中上部、光照充足的带节茎段本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水晶青柚的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取水晶青柚的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽，其特征是，所述水晶青柚的外植体为水晶青柚的带节茎段，所述的外植体诱导培养中使用的外植体诱导培养基包括以下组分：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/L D-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/L L-半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、0.2～1.0mg/L 6-BA、0.1～0.8mg/LNAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。/n

【技术特征摘要】
1.一种水晶青柚的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取水晶青柚的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽，其特征是，所述水晶青柚的外植体为水晶青柚的带节茎段，所述的外植体诱导培养中使用的外植体诱导培养基包括以下组分：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/LD-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/LL-半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、0.2～1.0mg/L6-BA、0.1～0.8mg/LNAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～5.8。


2.根据权利要求1所述的水晶青柚的组培快繁方法，其特征是，所述的外植体诱导培养具体为：将采集得到的作为外植体的水晶青柚消毒后剪切成2.0～2.5cm的带节茎段并接种到诱导培养基中，置于25℃全黑暗培养15～25天即可诱导形成不定芽。


3.根据权利要求1所述的水晶青柚的组培快繁方法，其特征是，所述的增殖培养使用的增殖培养基包括：以WPM为基本培养基，附加2.0～4.0mg/L核黄素、0.3～0.5mg/LD-泛酸钙、1.0～6.0mg/L抗坏血酸、2.0～5.0mg/LL-半胱氨酸、0.03～0.05mg/L生物素、0.8～1.5mg/L6-BA、1.0～1.5mg/LNAA、25～30g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂，pH值为5.4～...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫昭展，
申请(专利权)人：玉林师范学院，
类型：发明
国别省市：广西;45