蚕豆锈病综合抗性鉴定方法技术

本发明专利技术涉及及一种蚕豆锈病综合抗性鉴定方法，属于农业育种技术领域。该方法包括菌源收集及混合孢子悬浮液的制备、蚕豆材料的准备及播种、温室内蚕豆锈病苗期接种及温湿度设置、温室蚕豆锈病成株期抗性鉴定四大步骤。本发明专利技术在温室的可控环境中进行，具有良好的重复性，单次可鉴定的材料数量相对较多；采用多菌源接种则利于筛选具有综合抗性基因的材料，同使用单一菌株筛选到的小种专化抗性相比，本方法获得的抗性材料具有稳定性、适应性及实用性更好的优点；苗期接种、成株期调查的方法同蚕豆锈病在田间的发病特点较为相似，较好的模拟田间发病过程。本发明专利技术为蚕豆材料的锈病抗性鉴定及遗传育种研究提供了高效、稳定的方法。

Identification of comprehensive resistance to broad bean rust

【技术实现步骤摘要】
蚕豆锈病综合抗性鉴定方法
本专利技术属于农业育种
，具体涉及一种蚕豆锈病综合抗性鉴定方法。
技术介绍
蚕豆锈病是由担子菌蚕豆单胞锈菌[Uromycesviciae-fabae(pers.)Schroet]引起的一种重要的蚕豆病害，主要发生在中东和北非地区。在我国的春、秋蚕豆产区及夏播反季蚕豆产区经常发生，对秋蚕豆尤其是西南种植区的蚕豆生产危害严重。在一般年份蚕豆锈病可引起减产30％-40％，大流行年减产70％-80％，甚至毁产。目前，防治锈病的方法主要有栽培技术防治、化学药剂和生物防治，栽培中如控制播种密度，降低田间湿度和不同作物间的混作都能显著减少锈病对蚕豆的侵染。成本低且环保的化学防治以及生物防治至今还没有取得较好的进展。鉴于蚕豆锈病的危害性，世界各主要蚕豆生产国均把选育抗病品种和筛选抗锈基因作为防治蚕豆锈病的有效途径。建立稳定、高效的蚕豆锈病抗性鉴定体系是锈病抗性育种和基因挖掘的重要前提。目前，已报道的蚕豆锈病鉴定方法，主要集中在培养箱内单一菌株苗期鉴定方法、大田成株期自然病圃鉴定法和离体叶片鉴定法等。培养箱单一菌株本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蚕豆锈病综合抗性鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：/n步骤（1），菌源收集及混合孢子悬浮液的制备：/na）菌源收集：收集感病植株上的锈孢子；/nb）混合孢子悬浮液的制备：取等量不同地点收集到的锈孢子，混合均匀，将得到的混合孢子粉倒入灭菌蒸馏水中，并加入0.02~0.05%（v/v）的Tween-20，制成为4×10

【技术特征摘要】
1.一种蚕豆锈病综合抗性鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤（1），菌源收集及混合孢子悬浮液的制备：
a）菌源收集：收集感病植株上的锈孢子；
b）混合孢子悬浮液的制备：取等量不同地点收集到的锈孢子，混合均匀，将得到的混合孢子粉倒入灭菌蒸馏水中，并加入0.02~0.05%（v/v）的Tween-20，制成为4×105个孢子·ml-1的混合孢子悬浮液；
步骤（2），蚕豆材料的准备及播种：
a)对照材料的设计：设置抗病和感病材料作为对照组；
b)种子清理：播种前，对抗病、感病材料及待鉴定材料的种子进行清理，剔除瘪小、破碎、发芽、感病、虫蛀、霉变及种皮破损的种子；
c)种子消毒：清水冲洗种子多次，用质量浓度为0.5%次氯酸钠溶液浸泡种子10-20s，随后立即用清水冲洗多次，之后立即播种；
步骤（3），温室内蚕豆锈病苗期接种及温湿度设置：
a）接种：于植株4-5台叶期对抗病、感病材料及待鉴定材料进行接种，接种前，采用水对温室、抗病、感病材料及待鉴定材料植株通过喷雾进行加湿处理，保证叶片表面湿润、温室湿度保持在80%-100%间，并于上午10点前或下午2点后开始接种，对抗病、感病材料及待鉴定材料植株采用步骤（1）得到的混合孢子悬浮液进行喷雾接种处理；
b）接种后的温湿度设置：
锈病接种后1-21d，温室白天温度控制在20-25℃，夜间温度在10-15℃，接种21d后，将温室环境进行开放处理，以尽量确保内部环境与外部环境的一致性；
接种后的第1-14d，每天用水喷雾处理3-5次，确保植株表面湿润、温室湿度稳定处于95%以上，第15-21d，每天用水喷雾处1次，第22d天后，无须用水喷雾处理；
步骤（4），温室蚕豆锈病成株期抗性鉴定：
a)病情调查：接种80-85d后，于成株期进行病情分级；
b)病情分级：采用六级划分法：
0级：无可见侵染；
1级：叶片上仅有过敏性坏死反应，无孢子堆；
3级：叶片有零星孢子堆；无损害性破裂，孢子堆直径小于0.5mm；占叶面积5.0%以下；
5级：叶、茎上孢子堆普遍、较大；孢子堆直径0.51-1mm；部...

【专利技术属性】
技术研发人员：于海天，王丽萍，吕梅媛，何玉华，杨峰，胡朝芹，唐永生，牛文武，杨新，王玉宝，
申请(专利权)人：云南省农业科学院粮食作物研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53