新的T细胞受体制造技术

本公开涉及一种新的T细胞受体(TCR)，特别是其至少一个互补决定区(CDR)；表达所述TCR的T细胞；表达所述TCR的克隆；编码所述TCR的载体；可溶形式的所述TCR；包含所述TCR、所述细胞、所述克隆或所述载体的药物组合物或免疫原性剂或双特异性剂或疫苗；所述TCR或所述细胞或所述克隆或所述载体或所述药物组合物或免疫原性剂或双特异性剂或疫苗治疗癌症的用途；和一种使用所述TCR、所述细胞、所述克隆、所述载体、包含所述TCR的所述药物组合物、免疫原性剂、双特异性剂或疫苗治疗癌症的方法。

New T cell receptor

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新的T细胞受体
本公开涉及一种新的T细胞受体(TCR)，特别是其至少一个互补决定区(CDR)；表达所述TCR的T细胞；表达所述TCR的克隆；编码所述TCR的载体；可溶形式的所述TCR；包含所述TCR、所述细胞、所述克隆或所述载体的药物组合物或免疫原性剂或双特异性剂或疫苗；所述TCR或所述细胞或所述克隆或所述载体或药物组合物或免疫原性剂或双特异性剂或疫苗治疗癌症的用途；和一种使用所述TCR、包含所述TCR的所述细胞、所述克隆、所述载体、所述药物组合物、免疫原性剂、双特异性剂或疫苗治疗癌症的方法。背景我们已经发现一个有效治疗癌症的新T细胞类别，其通过群体恒定的主要组织相容性复合体类相关蛋白(MR)1识别癌细胞。对这种新T细胞的鉴定源自研究不需要特定人白细胞抗原(HLA)的情况下T细胞识别癌细胞的实验。HLA基因座高度可变，迄今已经描述超过17,000个不同等位基因。从而，借助HLA发挥作用的任何治疗方案仅可能在小部分患者中有效。相反，整个人类群体表达MR1。已知的MR1限制型T细胞的主要类型称作粘膜相关不变T细胞(MAIT)。已知MAIT识别结核分枝杆菌核黄素生物合成过程的中间体。我们自身和其他实验室的最近研究已经显示，还存在其他类型的识别不同MR1结合型配体的MR1限制型T细胞。本文所述的工作显示，我们的新T细胞类别具有借助MR1的靶特异性，但是TCR不结合于MR1本身或不结合于加载有已知感染性配体的MR1，这种T细胞反而识别MR1结合沟内部的癌特异性配体；MR1向TCR呈递癌特异性或癌上调的配体。从HLA对腺癌肺泡基底上皮细胞系A549(信息参见参考号CCL-185)错配的健康供体筛选T细胞期间，发现了我们的新T细胞克隆MC.7.G5。实验方案涉及将T细胞与A549细胞温育，随后分离并克隆已经响应于A549细胞而增殖的T细胞。进一步研究显示，MC.7.G5T细胞克隆能够识别并杀伤癌细胞，另外能够识别并杀伤来自众多器官和组织类型的癌细胞，因此显示该克隆具有治疗大部分类型癌症的潜力。如已知并且如图12中所示，TCR是二硫键连接的膜锚定的异二聚体蛋白，所述异二聚体蛋白正常情况下由缔合于恒定CD3链分子以形成完整有功能TCR的高度可变性α链(α)和β链(β)组成。表达这种受体的T细胞称作α:β(或αβ)T细胞。α链和β链含有包含恒定区(C)和可变区(V)的胞外结构域。恒定区临近于细胞膜，后接跨膜区和短胞质尾，而可变区与配体结合。大部分αβT细胞的配体是与MHC分子结合的肽。TCRα-链和β-链两者的可变结构域各自具有三个可变区，称作互补决定区(CDR)。β-链(HV4)上还存在正常情况下不接触抗原并且因此不视为CDR的额外变异性区域。通常，抗原结合位点由TCRα-链和β-链的CDR环形成。CDR1α和CDR2α由各个Vα基因编码，而CDR1β和CDR2β由各个Vβ基因编码。TCRα-链的CDR3高变，原因在于潜在的核苷酸添加和V区和连接区接合部附近的移除。TCRβ-链CDR3具有甚至更多的变异能力，因为它还可以包括多样性(D)基因。CDR3是负责识别已加工抗原的主要CDR，不过还已经显示α链的CDR1与抗原性肽的N端部分相互作用，并且β-链的CDR1与肽的C端部分相互作用。2015年，约九千五百万人患有癌症。一年出现约一千四百万新病例(不包括除黑素瘤之外的皮肤癌)。它造成约八百八十万人死亡(15.7％)。男性中最常见类型的癌症是肺癌、前列腺癌、结直肠癌和胃癌。女性中，最常见类型的癌症是乳腺癌、结直肠癌、肺癌和宫颈癌。如果除黑素瘤之外，皮肤癌纳入每年总的新发癌症中，它将占约40％病例。在儿童中，急性淋巴母细胞白血病和脑肿瘤最常见，非洲例外，在那里非霍奇金淋巴瘤最常发生。2012年，约165,000名15岁以下儿童经诊断患有癌症。癌症风险随年龄显著增加并且许多癌症在发达国家更常见。发病率随着更多的人长寿并且随着发展中国家中生活方式改变渐增。截至2010年，涉及癌症的财务费用估计为每年1.16万亿美元。随之而来是需要提供治疗或根除这种疾病的更好和更安全方式。公认使用身体天然防御系统杀伤异常组织的免疫治疗比化学干预更安全，但是，为了有效，免疫疗法必须具有癌特异性。另外，发现有效对抗任何类型癌症的免疫治疗将极为有益，因为它不仅适用于患有许多不同类型癌症的诸多个体(即它将具有泛群体适用性)，还可能适用于患有多于一种类型癌症的单个个体。另外，鉴定非MHC限制性的免疫治疗也将极为有利，因为这意味着可将它施用于任何个体，无论MHC组织类型是什么。我们已经在本文鉴定的T细胞具有前述有利特征，因为它们有效对抗任何类型的癌症并且它们没有MHC限制性并且因此具有泛群体适用性，原因在于限制性MR1分子遍在表达。专利技术简述根据本专利技术的第一方面，提供一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其特征在于包含(CDR)CAYRSAVNARLMF(SEQIDNO:1)和/或CASSEARGLAEFTDTQYF(SEQIDNo:2)或由其组成的互补决定区。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述CDR包含(CDR)CAYRSAVNARLMF(SEQIDNO:1)和/或CASSEARGLAEFTDTQYF(SEQIDNo:2)或与之共有至少88％同一性如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR或由其组成。本文所述的CDR代表所述TCR的CDR3s并且从而是负责识别已加工抗原或配体的主要CDR。其他CDR(CDR1α、CDR2α、CDR1β和CDR2β)是由种系编码。因此，本专利技术进一步涉及一种还包括这些其他CDR即CDR1α、CDR2α、CDR1β或CDR2β中一者或者的TCR。因此，在一个优选的实施方案中，所述TCR包含一个或多个以下互补决定区或由它们组成，包括它们的任何组合：TSESDYY(CDR1α)SEQIDNO:3ATEN(CDR2α)SEQIDNO:4MGHDK(CDR1β)SEQIDNO:5SYGVNS(CDR2β)SEQIDNO:6对肿瘤特异性TCR的提及是在MR1背景下特异性识别肿瘤细胞或肿瘤细胞配体并且在MR1背景下由肿瘤细胞或肿瘤细胞配体激活但不由非肿瘤细胞或非肿瘤细胞配体激活的TCR。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述TCR是具有α链和β链的αβTCR并且所述α链的所述CDR包含CDR：CAYRSAVNARLMF(SEQIDNO:1)或与之共有至少88％同一性，如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR或由其组成；并且所述β链的所述CDR包含CDR：CASSEARGLAEFTDTQYF(SEQIDNo:2)或与之共有至少88％同一性，如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR或由其组成。因此，所述TCR可以包含前述CDR中一者或两者或并且在一个优选的实施方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，特征在于包含以下的或由以下组成的互补决定区：(CDR)CAYRSAVNARLMF(SEQ ID NO:1)或与之共有至少88％同一性的CDR；和/或(CDR)CASSEARGLAEFTDTQYF(SEQ ID No:2)或与之共有至少88％同一性的CDR。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171026 GB 1717578.7;20180416 GB 1806155.61.一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，特征在于包含以下的或由以下组成的互补决定区：(CDR)CAYRSAVNARLMF(SEQIDNO:1)或与之共有至少88％同一性的CDR；和/或(CDR)CASSEARGLAEFTDTQYF(SEQIDNo:2)或与之共有至少88％同一性的CDR。


2.根据权利要求1所述的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR包含两个所述CDR。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR包含一个或多个以下互补决定区或由一个或多个以下互补决定区组成，包括它们的任何组合：
TSESDYY(CDR1α)SEQIDNO:3
ATEN(CDR2α)SEQIDNO:4
MGHDK(CDR1β)SEQIDNO:5
SYGVNS(CDR2β)SEQIDNO:6。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR不是粘膜相关的不变T细胞(MAIT细胞)表达的TCR或不与粘膜相关的不变T细胞(MAIT细胞)有关。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR是还包含以下或由以下组成的α链：
AQTVTQSQPEMSVQEAETVTLSCTYDTSESDYYLFWYKQPPSRQMILVIRQEAYKQQNATENRFSVNFQKAAKSFSLKISDSQLGDAAMYFCAYRSAVNARLMFGDGTQLVVKPNIQNPDPAVYQLRDSKSSDKSVCLFTDFDSQTNVSQSKDSDVYITDKCVLDMRSMDFKSNSAVAWSNKSDFACANAFNNSIIPEDTFFPSPESS(SEQIDNO:7)，或与之共有至少88％同一性的α链。


6.根据权利要求1-4中任一项所述的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR是还包含以下或由以下组成的β链：EADIYQTPRYLVIGTGKKITLECSQTMGHDKMYWYQQDPGMELHLIHYSYGVNSTEKGDLSSESTVSRIRTEHFPLTLESARPSHTSQYLCASSEARGLAEFTDTQYFGPGTRLTVLEDLKNVFPPEVAVFEPSEAEISHTQKATLVCLATGFYPDHVELSWWVNGKEVHSGVCTDPQPLKEQPALNDSRYALSSRLRVSATFWQDPRNHFRCQVQFYGLSENDEWTQDRAKPVTQIVSAEAWGRAD(SEQIDNO:8)，或与之共有至少88％同一性的β...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·苏厄尔，G·多尔顿，
申请(专利权)人：卡迪夫大学学院顾问有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB