【技术实现步骤摘要】
基于仿生纳米微结构芯片、内毒素毒SERS定量检测系统、方法及应用
本专利技术属于生化检测、光谱分析领域,具体涉及基于纳米微结构、SERS光谱分析的内毒素含量的技术。技术背景内毒素对药物治疗、药物生产和食品加工等过程的安全存在着巨大的威胁。对内毒素的高效检查和实时监测成为食品、药物生产及临床用药中必不可少的环节。目前细菌内毒素常见检测方法主要有家兔热源法(Therabbitpyrogentest,RPT)、鲎试验法(limulusamoebocytelysateassays,LAL)等传统方法,家兔热源法存在个体差异、灵敏度较低、检测时间较长等问题,而LAL检测方法,虽然具有检测快速、简便、灵敏度较高等优点,但其对测试条件要求苛刻,结果易受到酶和杂质的影响。近年来发展起来的光、电化学传感器也是内毒素检测的研究热点,其大多是以适配体、结合蛋白、多粘菌素B(PolymyxinB,PMB)等作为内毒素识受体与探针,以此实现内毒素的特异性识别和快速响应,再通过传感器将生物识别元件上的生物信号转换成荧光、化学发光、电信号等完 ...
【技术保护点】
1.一种仿生纳米微结构芯片,其特征在于,所述芯片是将蝉翅作为仿生SERS模板,在其表面溅射金膜作为SERS基底,将其集成在阵列式微米培养腔内而构成。/n
【技术特征摘要】
1.一种仿生纳米微结构芯片,其特征在于,所述芯片是将蝉翅作为仿生SERS模板,在其表面溅射金膜作为SERS基底,将其集成在阵列式微米培养腔内而构成。
2.根据权利要求1所述的仿生纳米微结构芯片,其特征在于,所述芯片包括以载玻片为衬底粘贴具有阵列小孔的亚历克板形成的阵列式三维SERS纳米仿生基底,对位并键合在基底上的PDMS打孔层,以及键合在PDMS打孔层之上的PDMS盖片层与培养基补充层,其中由阵列小孔和对应的PDMS打孔层上的孔共同形成的阵列孔就形成所述的阵列式微米培养腔,溅射有金膜的蝉翅粘贴在每个微米培养腔内。
3.根据权利要求1所述的仿生纳米微结构芯片,其特征在于,所述芯片上的每个微米培养腔体积约10~50μL。
4.一种内毒素检测系统,其特征在于,包括SERS标签和权利要求1-3任一项所述的芯片;
所述SERS标签是由核酸适配体修饰的SERS标签,所述核酸适配体是氨基或羧基修饰的核酸适配体,所述核酸适配体与拉曼报告分子上的活性基团连接构成SERS标签。
5.根据权利要求4所述的内毒素SERS定量检测系统,其特征在于,所述SERS标签是通过如下方式获得:
利用1,6-己二胺作(1,6-Hexamethylenediamine,HMD)为交联剂,将银纳米颗粒制成银纳米粒子二聚体,作为SERS增强材料与载体;
通过Ag-S键连接带巯基的拉曼报告分子;
加入氨基或是羧基修饰的核酸适配体与拉曼报告分子上的活性基团连接;
经巯基化的聚乙二醇表面封闭,制成内毒素检测用SERS标签。
6.根据权利要求4所述的内毒素检测系统,其特征在于,所述拉曼报告分子包括4-巯基苯甲酸(4-MBA)和对氨基苯硫酚(PTAP)等。
7.根据权利要求4所述的内毒素检测系统,其特征在于,所述核酸适配体选自广谱型内毒素核酸适配体,CTTCTGCCCGCCTCCTTCCACCGATCCATCGAGTTTCTGAGAAAGGCCCGGAGAAACCGCGAGA...
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