一种嗜碱芽孢杆菌及其产生的碱性木聚糖酶和应用制造技术

本发明专利技术公开一种嗜碱芽孢杆菌及其产生的碱性木聚糖酶和应用，属于生物技术领域。该嗜碱芽孢杆菌是从土壤中筛选得到的，名称为Bacillus sp.WMN1，于2020年1月3日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020007。本发明专利技术还公开了上述嗜碱芽孢杆菌产生的碱性木聚糖酶，该酶具有pH适应范围广，耐热、碱、金属离子和表面活性剂等适用于造纸、洗涤等工业的优良酶学特性。本发明专利技术的嗜碱芽孢杆菌属于耐碱的极端微生物，可在高碱性(pH9.0)条件下培养，更有效防止杂菌污染，更有利于大规模的发酵生产。

An alkalophilic Bacillus and its alkaline xylanase and its application

【技术实现步骤摘要】
一种嗜碱芽孢杆菌及其产生的碱性木聚糖酶和应用
本专利技术属于生物
，特别涉及一种嗜碱芽孢杆菌及其产生的碱性木聚糖酶和应用。
技术介绍
国外对木聚糖酶的研究始于20世纪50年代，从菌种构建到产品研发和生产都比较完善，可运用工业化大批量的生产木聚糖酶。目前研究的热点主要集中在微生物木聚糖酶基因的克隆与表达，木聚糖酶的调控机理与诱导、提纯与鉴定，利用纳米技术制备固定化酶等方面。我国对木聚糖酶的研究较晚，目前的研究主要是产木聚糖酶优良菌株的筛选及驯化，产酶条件的优化，酶的纯化和理化性质的研究，木聚糖酶基因克隆、表达和重组等方面。对于适用于造纸业的碱性木聚糖酶，国际上仅有少数可用于工业化生产的碱性木聚糖酶，而在国内还没有一种同时具备嗜热嗜碱这两种性质的木聚糖酶在造纸工业批量使用。因此，急需利用各种技术筛选适合造纸工业生产的碱性木聚糖酶。碱性木聚糖酶是指最适反应条件为碱性的木聚糖酶。1973年，Horikoshi等从嗜碱芽孢杆菌Bacillussp.C-59-2中第一次分离得到嗜碱木聚糖酶。嗜碱木聚糖酶由于其独特的高pH耐受性，在造纸工业中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嗜碱芽孢杆菌，其特征在于：名称为Bacillus sp.WMN1，于2020年1月3日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020007。/n

【技术特征摘要】
1.一种嗜碱芽孢杆菌，其特征在于：名称为Bacillussp.WMN1，于2020年1月3日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2020007。


2.一种碱性木聚糖酶的制备方法，其特征在于：所述的碱性木聚糖酶按照下述方法制得：
(1)粗酶液的制备
将权利要求1所述的嗜碱芽孢杆菌Bacillussp.WMN1在发酵培养基中进行液体发酵，高速冷冻离心，取上清液，过滤，即得粗酶液，用于离子交换层析；
(2)碱性木聚糖酶的分离纯化
(a)碱性木聚糖酶的阴离子交换层析
离子交换层析介质为DEAESepharoseFastFlow；缓冲液体系为pH8.0的Tris-HCl缓冲液，平衡液为pH8.0的Tris-HCl缓冲液，洗脱液为含NaClpH8.0的Tris-HCl缓冲液；取60mL介质小心灌入规格为Φ1.6cm×40cm的层析柱中，使得凝胶均匀且无气泡；用3～5倍柱体积的平衡液进行平衡，待A280稳定后取粗酶液上样，穿透峰出现之后进行盐浓度梯度洗脱，分别收集不同盐浓度梯度洗脱出来的峰...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘森林，钟雅芳，陈伟钊，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东;44