一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒，生化反应试管包括管部和盖部，所述管部包括：管体，所述管体包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部具有一定距离；限位单元，所述限位单元设置于所述管体的外侧；其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述第一腔室的顶部与所述第二腔室的顶部连通。其优点在于，通过设置第一腔室和第二腔室来放置不同的反应组分及溶液，而且第一腔室和第二腔室的高低位置不同；在实际使用时，仅第一腔室和第二腔室中的一个被独立加热完成生化反应另一个不被加热；将试管垂直翻转180°并进行振荡操作时，第一腔室和第二腔室内的溶液混合并进行进一步反应，以消除有害结果。

A biochemical reaction tube and its application and gene amplification kit

【技术实现步骤摘要】
一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒
本专利技术涉及生物工程
，尤其涉及一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒。
技术介绍
在常规的小型生化反应中，一般是单个的试管内设置一个腔体并放置一种溶液，当需要多个溶液参与反应时，将不同试管的溶液吸取后加入其它反应试管。当存在一些特殊原因如试剂污染时，可在试管内设置一个挡板将试管分隔为两部分，分别将A/B两个溶液放置在同一个试管的不同腔体内，在不开盖的情况下将A/B溶液进行混合反应，避免了试剂外泄污染。核酸扩增如PCR反应的最大特点是具有较大的扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，当实验室样本和扩增目标经常出现大量相同的情况时，核酸气溶胶污染在实验区域内不断累积，污染风险不断增加，假阳性的发生频率也会越来越高。PCR技术的高扩增效率产生的核酸气溶胶污染，会导致检测结果的假阳性。假阳性意味着实验不可信，并且直接造成实验室经济损失。更严重的是，如果形成气溶胶污染，则可引起整个PCR实验室的污染，甚至要关闭实验室。PCR扩增产物污染是最主要最常见的污染。极微量的PCR产物污染就可造成假阳性。最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。气溶胶是悬浮于气体介质中粒径一般为0.001μm～1000μm的固体、液体微小粒子形成的胶溶状态散体系。核酸气溶胶即DNA/RNA气溶胶，是分散并悬浮在气体介质中的核酸聚合物，广泛存在于实验室桌面、仪器、耗材以及空气中，据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝。核酸气溶胶与PCR过程相伴相生，操作时空气与液体面摩擦，离心机离心，剧烈地摇动反应管，反应管开盖，吸样时及移液器的反复吸样，污染物的外泄等途径，都会产生核酸气溶胶。除了PCR扩增方法外，目前核酸恒温扩增方法也逐步进入实验室。目前主要包括以下几种：环介导恒温扩增(loop－mediatedisothermalamplification，LAMP)、切口酶核酸恒温扩增(nickingenzymemediatedamplification，NEMA)、链替代扩增(stranddisplacementamplification，SDA)、滚环扩增(rollingcircleamplification，RCA)、依赖解旋酶的恒温基因扩增(helicase－dependentisothermalDNAamplification，HAD)、转录依赖的扩增系统(transcription－basedamplificationsystem，TAS)、依赖核酸序列的扩增(NASBA)又称自主序列复制系统(self－sustainedsequencereplication，3SR)、QB复制酶扩增(Q－betareplicase－amplifiedassay)等。恒温扩增摆脱了热循环的限制，使其应用范围大大增加，而且目前应用的恒温扩增方法都有较高的敏感性和特异性，在核酸检测中应用范围非常广。但敏感性高会带来扩增物污染和假阳性的问题，从而导致反应结果判读不准确。将核酸反应产物与样品来源的核酸进行差异化，从核酸反应试剂组分中来解决污染问题是很多试剂厂家在努力的方向，其中UNG酶的预防作用日益受到重视和肯定。在PCR产物或引物中用dU代替dT。这种dU化的PCR产物与UNG一起孵育，因UDG可裂解尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架间的N-糖基键，可除去dU而阻止Taq-DNA聚合酶的延伸，从而失去被再扩增的能力。UNG对不含dU的模板无任何影响。UNG可从单或双链DNA中消除尿嘧啶，而对RNA中的尿嘧啶和单一尿嘧啶分子则无任何作用。在扩增反应中用dUTP代替dTTP，使产物中掺入大量dU。在再次进行PCR扩增前，用UNG处理PCR混合液即可消除PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活，因此不会影响含dU的新的PCR产物。但是由于酶的反应效率有限而消化反应时间往往只有5分钟，这种方式一般只能用UNG处理PCR混合液中的轻度PCR产物污染，不能彻底解决问题。合成引物时以dU代dT，这样PCR产物中仅5ˊ端带dU。UNG处理后，引物失去了结合位点而不能扩增。对长片段(1-2kb以上)的扩增用dUTP法效率较用dTTP低，而用dU法就可克服这一缺点。dU引物最好将dU设计在3ˊ端或近ˊ端。该法仅能用于引物以外试剂处理。目前的UNG酶污染方法只是关注了在核酸扩增反应前对扩增产物的酶解处理，没有考虑过在核酸扩增反应后直接将扩增产物进行酶解处理。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种生化反应试管及其使用方法和基因扩增试剂盒。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供一种生化反应试管，包括管部和盖部，所述管部包括：管体，所述管体包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部具有一定距离；限位单元，所述限位单元设置于所述管体的外侧；其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述第一腔室的顶部与所述第二腔室的顶部连通。优选地，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部之间的距离至少为3mm。优选地，所述第二腔室位于所述第一腔室的外侧；和/或，所述第二腔室位于所述第一腔室的内侧。优选地，所述第二腔室的轴线与所述第一腔室的轴线共线或平行。优选地，所述第二腔室的底部与所述限位单元的顶部处于同一水平面；或，所述第二腔室的底部位于所述限位单元的顶部的上侧。优选地，所述限位单元至少部分地环绕所述管体的外侧设置。优选地，当所述限位单元被生化反应仪器进行接触式传导加热时，所述第一腔室或所述第二腔室接触所述生化反应仪器的热源。优选地，所述管部还包括：第一嵌合部件，所述第一嵌合部件设置在所述管体的内壁的圆周面；所述盖部包括：第二嵌合部件，所述第二嵌合部件设置在所述盖部的外壁的圆周面，所述第二嵌合部件与所述第一嵌合部件连接，以使所述盖部封闭所述管部。优选地，所述第一嵌合部件为若干个，若干所述第一嵌合部件沿所述管部的轴向设置；所述第二嵌合部件为若干个，若干所述第二嵌合部件沿所述盖部的轴向设置；其中，位于所述盖部的最下侧的所述第二嵌合部件至少与位于所述管部的最上侧的所述第一嵌合部件连接。优选地，还包括：连接部件，所述连接部件的两端分别与所述管部和所述盖部连接。优选地，所述盖部包括：辅助部件，所述辅助部件设置在所述盖部的外壁；其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述辅助部件凸出于所述管部设置。优选地，所述辅助部件的厚度小于所述的盖部的顶部的厚度；或所述辅助部件的厚度小于等于0.4mm。优选地，所述盖部包括：中空部件，所述中空部件贯穿地设置在所述盖部的内部，所述中空部件包括：第一开口元件，所述第一开口元件设置于所述中空部件的上端；第二开口元件，所述第二开口元件设置于所述中空部件的下端；密封部件，所述密封部本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生化反应试管，包括管部和盖部，其特征在于，所述管部包括：/n管体，所述管体包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部具有一定距离；/n限位单元，所述限位单元设置于所述管体的外侧；/n其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述第一腔室的顶部与所述第二腔室的顶部连通。/n

【技术特征摘要】
20190225 CN 201920239379X1.一种生化反应试管，包括管部和盖部，其特征在于，所述管部包括：
管体，所述管体包括有第一腔室和第二腔室，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部具有一定距离；
限位单元，所述限位单元设置于所述管体的外侧；
其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述第一腔室的顶部与所述第二腔室的顶部连通。


2.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述第二腔室的底部与所述第一腔室的底部之间的距离至少为3mm。


3.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述第二腔室位于所述第一腔室的外侧；和/或，
所述第二腔室位于所述第一腔室的内侧。


4.根据权利要求3所述的生化反应试管，其特征在于，所述第二腔室的轴线与所述第一腔室的轴线共线或平行。


5.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述第二腔室的底部与所述限位单元的顶部处于同一水平面；或，
所述第二腔室的底部位于所述限位单元的顶部的上侧。


6.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述限位单元至少部分地环绕所述管体的外侧设置。


7.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，当所述限位单元被生化反应仪器进行接触式传导加热时，所述第一腔室或所述第二腔室接触所述生化反应仪器的热源。


8.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述管部还包括：
第一嵌合部件，所述第一嵌合部件设置在所述管体的内壁的圆周面；
所述盖部包括：
第二嵌合部件，所述第二嵌合部件设置在所述盖部的外壁的圆周面，所述第二嵌合部件与所述第一嵌合部件连接，以使所述盖部封闭所述管部。


9.根据权利要求8所述的生化反应试管，其特征在于，所述第一嵌合部件为若干个，若干所述第一嵌合部件沿所述管部的轴向设置；
所述第二嵌合部件为若干个，若干所述第二嵌合部件沿所述盖部的轴向设置；
其中，位于所述盖部的最下侧的所述第二嵌合部件至少与位于所述管部的最上侧的所述第一嵌合部件连接。


10.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，还包括：
连接部件，所述连接部件的两端分别与所述管部和所述盖部连接。


11.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述盖部包括：
辅助部件，所述辅助部件设置在所述盖部的外壁；
其中，当所述盖部封闭所述管部时，所述辅助部件凸出于所述管部设置。


12.根据权利要求11所述的生化反应试管，其特征在于，所述辅助部件的厚度小于所述的盖部的顶部的厚度；或
所述辅助部件的厚度小于等于0.4mm。


13.根据权利要求1所述的生化反应试管，其特征在于，所述盖部包括：
中空部件，所述中空部件贯穿地设置在所述盖部的内部，所述中空部件包括：
第一开口元件，所述第一开口元件设置于所述中空部件的上端；
第二开口元件，所述第二开口元件设置于所述中空部件的下端；
密封部件，所述密封部件封闭所述中空部件，所述密封部件包括：
第一密封元件，所述第一密封元件封闭所述第一开口元件；
第二密封元件，所述第二密封元件封闭所述第二开口元件。

<...

【专利技术属性】
技术研发人员：许向华，何小明，周中人，张磊，
申请(专利权)人：上海快灵生物科技有限公司，上海快灵生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31