【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测水解酶的BRET传感器分子
本专利技术涉及用于检测样品中水解酶如磷酸酶、糖苷酶、酯酶、外肽酶和脂肪酶的传感器和方法。具体地，本专利技术涉及用于检测食品、饮料和临床样品中水解酶的传感器和方法。传感器和方法可用于确定样品中存在的水解酶的量。
技术介绍
水解酶是在生命的所有领域中发现的一类酶。它们的作用不同，例如水解酶参与生物质的降解、防御、发病机理和正常细胞功能。确定水解酶活性的测定通常用于食品、临床和诊断环境。这些测定通常依赖于分光光度、安培、比色或荧光检测。然而，越来越需要提供简单、灵敏和/或成本有效的替代更传统测定形式的测定。还需要适于高通量筛选的可重复测定。特别感兴趣的是可用于检测和测量多种水解酶(例如磷酸酶、糖苷酶、酯酶、外肽酶和脂肪酶)水平的传感器和测定。
技术实现思路
本专利技术人已经鉴定了可用于检测样品中水解酶的传感器分子。本专利技术人还鉴定了检测样品中水解酶的方法。在一个方面，提供了用于检测水解酶的传感器分子，所述传感器分子具有选自以下的通式：R1-L-R2-B(I)...
【技术保护点】
1.一种用于检测水解酶的传感器分子，所述传感器分子具有选自以下的通式：/nR
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170824 AU 20179034201.一种用于检测水解酶的传感器分子，所述传感器分子具有选自以下的通式：
R1-L-R2-B(I)，或
B-R2-L-R1(II)
其中
R1是生物发光蛋白；
L是连接元素；
R2是非蛋白受体结构域；并且
B是封闭基团，
其中与B结合的R2包括可水解键，并且可水解键被水解酶水解产生生物发光共振能量转移(BRET)的改变。
2.根据权利要求1所述的传感器分子，其中所述封闭基团将所述受体结构域稳定在低荧光或非荧光状态。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的传感器分子，其中所述封闭基团包括含磷酸酯部分、含糖部分、含氨基酸部分、核苷酸、核苷、酯或醚。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的传感器分子，其中所述连接元素包括烷基链、二醇、醚、聚醚、聚酰胺、聚酯、肽、多肽、氨基酸或多核苷酸。
5.根据权利要求4所述的传感器分子，其中所述连接元素包括多肽。
6.根据权利要求5所述的传感器分子，其中R1-L或L-R1是单个多肽。
7.根据权利要求5或6所述的传感器分子，其中所述连接元素包括半胱氨酸残基和/或赖氨酸残基。
8.根据权利要求7所述的传感器分子，其中R2通过所述半胱氨酸残基与连接元素连接。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的传感器分子，其中R2选自AlexaFluor染料、Bodipy染料、Cy染料、荧光素、丹磺酰基、伞形酮、荧光微球、发光微球、荧光纳米晶体、Marina蓝、Cascade蓝、Cascade黄、Pacific蓝、Oregon绿、四甲基罗丹明、罗丹明、香豆素、BODIPY、试卤灵、德克萨斯红、稀土元素螯合物，或其任何组合或衍生物。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的传感器分子，其中R1选自荧光素酶、β-半乳糖苷酶、内酰胺酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-葡糖醛酸糖苷酶或β-葡糖苷酶。
11.根据权利要求10所述的传感器分子，其中所述荧光素酶是海肾荧光素酶、萤火虫荧光素酶、腔肠荧光素酶、北美萤火虫荧光素酶、叩头虫荧光素酶、铁路蠕虫荧光素酶、细菌荧光素酶、高斯荧光素酶、水母发光蛋白、Arachnocompa荧光素酶，或其任何一种的生物活性变体或片段，或其两种或更多种的嵌合体。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的传感器分子，其中所述水解酶是酯酶、脂肪酶、蛋白酶、磷酸酶、核酸酶、糖苷酶、DNA糖基化酶或酸酐水解酶。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的传感器分子，其中在水解酶存在和/或不存在下，R1和R2的间距和相对取向在距离的±50％内。
14.根据权利要求13所述的传感器分子，其中R1和R2的距离为至少4.0nm。
15.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：K·卡龙，S·C·特罗威尔，
申请(专利权)人：联邦科学技术研究组织，
类型：发明
国别省市：澳大利亚;AU
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