一种银纳米簇荧光探针及其制备方法和其在检测活性氧种类中的应用技术

本发明专利技术公开了一种银纳米簇荧光探针及其制备方法和其在检测活性氧种类中的应用，其中，所述银纳米簇荧光探针包括：蛋白和银纳米团簇。本发明专利技术利用该探针能灵敏有效地检测组织或细胞中不同种类的活性氧。

【技术实现步骤摘要】
一种银纳米簇荧光探针及其制备方法和其在检测活性氧种类中的应用
本专利技术属于生物化学
，具体涉及一种银纳米簇荧光探针及其制备方法和其在检测活性氧种类中的应用。
技术介绍
活性氧包括过氧化氢、超氧自由基、羟基等，活性氧含量的增加，会导致严重的氧化应激反应，最终造成DNA、蛋白质及脂质的分子损伤。然而目前，人们对于不同种类活性氧对细胞的具体的作用和影响程度，尚未研究透彻。因此，设计一种可有效检测特定类型活性氧的工具有着重要的意义，为探讨肿瘤发生发展的机制提供参考依据。目前，利用荧光素检测活性氧的方法大多基于氧化还原反应，其可对活性氧进行有效检测，然而，该方法却无法对不同种类的活性氧加以区分。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种银纳米簇荧光探针及其制备方法和其在检测活性氧种类中的应用，本专利技术利用该探针能灵敏有效地检测组织或细胞中的不同种类的活性氧。为了实现上述目的或者其他目的，本专利技术是通过以下技术方案实现的：本专利技术提供一种银纳米簇荧光探针在检测活性氧种类中的用途，所述银纳米簇荧光探针用于识别所述活性氧的种类，其中，所述银纳米簇荧光探针包括蛋白和位于所述蛋白内的银纳米团簇。在一实施例中，所述银纳米团簇位于所述蛋白的分子链上以及所述蛋白内的间隙中。在一实施例中，所述银纳米簇荧光探针通过调控所述银纳米簇荧光探针的尺寸和/或价态，区分所述活性氧的种类。在一实施例中，在特定激发波长下，所述银纳米簇荧光探针识别所述活性氧的种类。在一实施例中，所述特定激发波长包括350-550nm。本专利技术的目的还在于提供一种银纳米簇荧光探针，包括：蛋白；银纳米团簇，位于所述蛋白内。在一实施例中，所述银纳米团簇位于所述的蛋白的分子链上以及所述蛋白内的间隙中。在一实施例中，所述蛋白为牛血清白蛋白。本专利技术的目的还在于提供一种银纳米簇荧光探针的制备方法，至少包括以下步骤：将银盐溶液与蛋白溶液进行混合，获得第一混合溶液；向所述第一混合溶液中滴加还原剂，使银离子还原成银纳米团簇位于蛋白内，获得第二混合溶液；对所述第二混合溶液进行过滤处理，获得所述银纳米簇荧光探针。在一实施例中，所述还原剂为硼氢化钠溶液，所述硼氢化钠在碱性条件下滴加到所述第一混合溶液中。在一实施例中，所述过滤处理包括超滤管超滤和滤网过滤。在本专利技术中，所述银纳米簇荧光探针是通过在与不同种类的活性氧作用时自身尺寸的变化以及所述银纳米颗粒中银的价态变化的共同作用使自身发射出不同颜色的荧光来检测所述活性氧的种类，可灵敏有效地区分组织或细胞中的不同种类的活性氧。本专利技术填补了
的空白，首次通过银纳米簇荧光探针将不同种类的活性氧加以区分，为不同种类活性氧对细胞的具体的作用和影响程度提供依据。附图说明图1为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的制备方法流程示意图；图2为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针检测活性氧的种类的方法流程示意图；图3为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的透射电子显微镜图；图4为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的水合粒径图；图5为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的荧光发射光谱图；图6为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的X射线光电子能谱图；图7为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪分析结果；图8为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与中活性氧作用后的透射电子显微镜图；图9为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与中活性氧作用后的水合粒径图；图10为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与中活性氧作用后的荧光发射光谱图；图11为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与中活性氧作用后的X射线光电子能谱图；图12为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与高活性氧作用后的透射电子显微镜图；图13为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与高活性氧作用后的水合粒径图；图14为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与高活性氧作用后的荧光发射光谱图；图15为本专利技术一实施例中银纳米簇荧光探针与高活性氧作用后的X射线光电子能谱图。具体实施方式以下通过特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。需说明的是，在不冲突的情况下，以下实施例及实施例中的特征可以相互组合。还应当理解，本专利技术实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本专利技术的保护范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或者按照各制造商所建议的条件。当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本专利技术中使用的所有技术和科学术语与本
的技术人员对现有技术的掌握及本专利技术的记载，还可以使用与本专利技术实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本专利技术。在本专利技术中如出现术语“第一”、“第二”、仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。本专利技术通过在与不同种类的活性氧作用时银纳米簇荧光探针自身尺寸的变化以及所述银纳米颗粒中银的价态变化的共同作用使自身发射出不同颜色的荧光来检测所述活性氧的种类，可灵敏有效地检测组织或细胞中的不同种类的活性氧。请参阅图1，本专利技术一实施例中提供一种银纳米簇荧光探针的制备方法，至少包括以下步骤：S1、将银盐溶液与蛋白溶液进行混合，获得第一混合溶液；S2、向所述第一混合溶液中滴加还原剂，使银离子还原成银纳米团簇位于蛋白内，获得第二混合溶液；S3、对所述第二混合溶液进行过滤处理，获得所述银纳米簇荧光探针。具体的，在S1步骤中，所述银盐溶液例如为硝酸银溶液。所述蛋白为牛血清白蛋白。例如将AgNO3溶液(1-20mmol，1-10mL)加入牛血清白蛋白BSA溶液(0.01-0.1g/mL，1-10mL)中，搅拌混匀1-10分钟。具体的，在S2步骤中，所述还原剂例如为硼氢化钠。例如将氢氧化钠NaOH溶液(0.1-10M，0.1-1mL)逐滴加入第一混合溶液中，搅拌混匀1-10分钟，然后将硼氢化钠NaBH4溶液(1-50mmol，50-500μL)逐滴加入上述溶液中，搅拌混匀1-10分钟。所述蛋白为团簇状。所述银纳米团簇位于所述蛋白的分子链上以及所述蛋白内的间隙中。具体的，在S3步骤中，将第二混合溶液用例如3kDa超滤管超滤，再将上述溶液用例如0.08-0.1μm滤网过滤，在温度为-20℃至-40℃保存，获得所述银纳米簇荧光探针，所述银纳米簇荧光探针，包括：蛋白和银纳米团簇，所述银纳米团簇附着在所述蛋白的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种银纳米簇荧光探针在检测活性氧种类中的用途，其特征在于，所述银纳米簇荧光探针用于识别所述活性氧的种类，其中，所述银纳米簇荧光探针包括蛋白和位于所述蛋白内的银纳米团簇。/n

【技术特征摘要】
1.一种银纳米簇荧光探针在检测活性氧种类中的用途，其特征在于，所述银纳米簇荧光探针用于识别所述活性氧的种类，其中，所述银纳米簇荧光探针包括蛋白和位于所述蛋白内的银纳米团簇。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述银纳米团簇位于所述蛋白的分子链上以及所述蛋白内的间隙中。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述银纳米簇荧光探针通过调控所述银纳米簇荧光探针的尺寸和/或价态，区分所述活性氧的种类。


4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，在特定激发波长下，所述银纳米簇荧光探针识别所述活性氧的种类。


5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述特定激发波长包括350-550nm。


6.一种银纳米簇荧光探针，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈炳地，黄鑫，陈欣，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：上海;31