一种杜氏盐藻的连续培育方法技术

本发明专利技术公开了一种杜氏盐藻的连续培育方法，所述培育方法包含以下步骤，A：在密闭光生物反应器中配制培养基，B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23‑28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。该杜氏盐藻的连续培育方法，提高杜氏盐藻的培养效率，通过连续发酵大大减少前期种子培养时间，同时使用紫外消毒系统，可以保证培育过程中添加新鲜无菌培养基，保证连续培育过程的正常进行。

A continuous cultivation method of Dunaliella salina

【技术实现步骤摘要】
一种杜氏盐藻的连续培育方法
本专利技术涉及微藻类的连续培养培育
，具体为一种杜氏盐藻的连续培育方法。
技术介绍
杜氏盐藻是微藻类的一种，盐藻对于稳定血糖血压，提升睡眠质量有着很好的效果，而杜氏盐藻是一种嗜盐的绿色微藻，常见于海盐田中，由于其具备较高的食用价值，所以人们会通过人工培育的方式增加其产量，以便于满足大量的市场需求，但是现有的培育方式存在以下问题：发酵时间设定不合理，导致前期种子的培养时间过长，消毒方式不合理，导致杜氏盐藻的存活率不高，同时，不能通过连续培育的方式，在培育过程中添加新鲜无菌培养基，导致杜氏盐藻的培养效率大大降低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种杜氏盐藻的连续培育方法，以解决上述
技术介绍
中提出发酵时间设定不合理，导致前期种子的培养时间过长，消毒方式不合理，导致杜氏盐藻的存活率不高，同时，不能通过连续培育的方式，在培育过程中添加新鲜无菌培养基，导致杜氏盐藻的培养效率大大降低的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种杜氏盐藻的连续培育方法，所述培育方法包含以下步骤：A：在密闭光生物反应器中配制培养基，所述每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液；B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气体，得到杜氏盐生藻培养液；D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。优选的，所述步骤A中的培养基中的pH在6.5-8之间，且硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA的含量分别在0.2-1g、0.01-0.025g、0.01-0.1g、0.01-0.1g、0.01-0.1和0.01-0.04g之间。优选的，所述步骤A中微量元素母液和维生素母液的体积均为1mL，并且1mL的微量元素母液中包括：生物素0.5-1.5mg/L，维生素B61-5mg/L，微生物0.1-2.0mg/L。优选的，所述步骤B中紫外消毒方法为：紫外线消毒灯管所发出的紫外线波长为180-254nm，且培养液的消毒时间为10-30min，并且1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯。优选的，所述接种量为5-20%，且光照时间为12小时，并且交替培养的时间为5-10天，同时培养5-10天后通入的气体为二氧化碳。优选的，所述通入二氧化碳与空气的比例为1：100。优选的，所述步骤D中释放培育好的杜氏盐生藻体积为50%，重新接入等额的培养基体积。优选的，所述新接入的新鲜培养液需经过紫外线消毒灯灭菌处理，紫外消毒方法为，紫外线波长为180-254nm，消毒时间为10-30min，1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：该杜氏盐藻的连续培育方法，提高杜氏盐藻的培养效率，通过连续发酵大大减少前期种子培养时间，同时使用紫外消毒系统，可以保证培育过程中添加新鲜无菌培养基，保证连续培育过程的正常进行；1.通过添加微量元素母液与和维生素母液的方式，能够方便配合消毒灯的紫外线消毒，提升盐藻的生存环境质量，提升存活率；2.通过在培育过程中，释放一定量培养液和添加新鲜培养液的方式，实现盐藻的连续培育，提升盐藻的整体培育效率，并且发酵时间以及发酵环境设计更加合理。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供如下技术方案：实施例1：一种杜氏盐藻的连续培育方法，培育方法包含以下步骤：A：在密闭光生物反应器中配制培养基，每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液，步骤A中的培养基中的pH在6.5-8之间，且硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA的含量分别为0.3g、0.02g、0.06g、0.05g、0.07和0.03g，步骤A中微量元素母液和维生素母液的体积均为1mL，并且1mL的微量元素母液中包括：生物素0.5-1.5mg/L，维生素B61-5mg/L，微生物0.1-2.0mg/L；B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min，步骤B中紫外消毒方法为：紫外线消毒灯管所发出的紫外线波长为180-254nm，且培养液的消毒时间为10-30min，并且1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气体，得到杜氏盐生藻培养液，接种量为5-20%，且光照时间为12小时，并且交替培养的时间为5-10天，同时培养5-10天后通入的气体为二氧化碳，通入二氧化碳与空气的比例为1：100；D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中，步骤D中释放培育好的杜氏盐生藻体积为50%，重新接入等额的培养基体积，新接入的新鲜培养液需经过紫外线消毒灯灭菌处理，紫外消毒方法为，紫外线波长为180-254nm，消毒时间为10-30min，1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯。实施例2：一种杜氏盐藻的连续培育方法，培育方法包含以下步骤：A：在密闭光生物反应器中配制培养基，每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液，步骤A中的培养基中的pH在6.5-8之间，且硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA的含量分别为0.9g、0.019g、0.09g、0.08g、0.08和0.05g，步骤A中微量元素母液和维生素母液的体积均为1mL，并且1mL的微量元素母液中包括：生物素0.5-1.5mg/L，维生素B61-5mg/L，微生物0.1-2.0mg/L；B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min，步骤B中紫外消毒方法为：紫外线消毒灯管所发出的紫外线波长为180-254nm，且培养液的消毒时间为10-30min，并且1m³水体体积配备30-100W功率的紫外线消毒灯；C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述培育方法包含以下步骤：/nA：在密闭光生物反应器中配制培养基，所述每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液；/nB：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；/nC：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气体，得到杜氏盐生藻培养液；/nD：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。/n

【技术特征摘要】
1.一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述培育方法包含以下步骤：
A：在密闭光生物反应器中配制培养基，所述每1L培养基中含有：硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA，1ml的微量元素母液和1ml的维生素母液；
B：使用紫外线消毒灯管没入培养液中，进行紫外线照射消毒，消毒时间为10min；
C：选择一批培养至指数生长期的杜氏盐藻接种到所述培养基中，在控制温度为23-28℃的情况下进行接种，按照一定的光照时间交替培养指定天数后，并通入气体，得到杜氏盐生藻培养液；
D：在步骤C之后，释放一定体积的杜氏盐生藻培养液，接入经过紫外消毒后的新鲜培养液到密闭反应器中。


2.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤A中的培养基中的pH在6.5-8之间，且硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化镁、氯化钙、硫酸亚铁和Na-EDTA的含量分别在0.2-1g、0.01-0.025g、0.01-0.1g、0.01-0.1g、0.01-0.1和0.01-0.04g之间。


3.根据权利要求1所述的一种杜氏盐藻的连续培育方法，其特征在于：所述步骤A中微量元素母液和维生素母液的体积均为1mL，并且1mL的微量元素母液中包括：...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭立，赵阳娟，何加发，梁薏琳，邵华，
申请(专利权)人：湛江国联水产开发股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44