人抗-TAU抗体制造技术

技术编号:24324196 阅读:55 留言:0更新日期:2020-05-29 17:36
提供新颖的人tau特异性抗体及其片段、衍生物和变体,以及与其相关的方法。还公开与对tau具有特异性的抗体相关的测定、试剂盒和固体支持体。所述抗体、免疫球蛋白链以及其结合片段、衍生物和变体可分别用于tau靶向免疫治疗和诊断的药物和诊断组合物。

Human anti tau antibody

【技术实现步骤摘要】
人抗-TAU抗体本申请是申请日为2013年12月20日、中国专利申请号为201380073531.7(国际申请号为PCT/US2013/076952)、专利技术名称为“人抗-TAU抗体”的专利技术专利申请的分案申请。专利
本专利技术总体上涉及新颖的tau-特异性结合分子,特别是识别tau蛋白(包括病理性磷酸化tau和聚集形式的tau)的人抗体以及其片段、衍生物和变体。此外,本专利技术涉及作为用于鉴别血浆和CSF中的tau和毒性tau种类的诊断工具以及还在用于治疗神经退行性tau蛋白病(tauopathy)的被动疫苗接种策略两者中有价值的包含这些结合分子、抗体及其模拟物的药物和诊断组合物,所述tau蛋白病如阿尔茨海默氏病(AD)、肌萎缩性侧索硬化/帕金森氏病–痴呆复合征(ALS-PDC)、嗜银颗粒性痴呆(AGD)、英国类型淀粉样血管病、大脑淀粉样血管病、皮质基底节变性(CBD)、克罗伊茨费尔特-雅各布病(CJD)、拳击员痴呆、伴有钙化的弥漫性神经原纤维缠结、唐氏综合征(Down’ssyndrome)、额颞叶痴呆、与染色体17相关的伴有帕金森氏病的额颞叶痴呆(FTDP-17)、额颞叶变性、格-施-莎三氏病(Gerstmann--Scheinkerdisease)、哈-斯二氏病(Hallervorden-Spatzdisease)、包涵体肌炎、多系统萎缩、肌强直性营养不良、C型尼曼-皮克二氏病(Niemann-PickdiseasetypeC)(NP-C)、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元病(non-Guamanianmotorneurondiseasewithneurofibrillarytangle)、皮克氏病(PiD)、大脑炎后帕金森氏病、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、进行性皮质下神经胶质增生、进行性核上性麻痹(PSP)、亚急性硬化性全大脑炎、仅缠结型痴呆、多发性梗塞性痴呆以及缺血性中风。
技术介绍
蛋白质积聚、修饰和聚集是多种神经退行性疾病的病理方面。病理性修饰和聚集的tau包括过度磷酸化的tau构象异构体是tau蛋白病的不变标志并且与疾病严重程度相关。tau是在中枢神经系统中表达的微管相关蛋白,其主要功能是使微管稳定。存在主要在成人大脑中表达的tau的六种主要同种型,其通过选择性剪接来源于单个基因。在病理条件下,tau蛋白变得过度磷酸化,从而导致微管蛋白结合的损失和微管的不稳定,接着tau在病原性神经原纤维缠结中的聚集和沉积。被统称为神经退行性tau蛋白病的与tau相关的病症是蛋白质错误折叠病症的组的一部分,包括阿尔茨海默氏病(AD)、进行性核上性麻痹、皮克氏病、皮质基底节变性、FTDP-17等。据报道tau基因中的超过40种突变与遗传性额颞叶痴呆相关,从而证明tau基因突变足以触发神经退行性变(Cairns等,Am.J.Pathol.171(2007),227-40)。转基因小鼠和细胞培养中的研究指示在AD中,tau病理学可能由病理学级联引起,其中Aβ位于tau的上游(等人,Science293(2001),1491–1495)。然而,其它发现指向双重途径模型,其中两种级联功能彼此独立(vandeNes等,ActaNeuropathol.111(2006),126-138)。靶向AD中的β-淀粉样肽的免疫疗法已经在动物模型中产生了令人鼓舞的结果并且在临床试验中显示出希望。来自少数受试者的最近尸体剖检数据表明,患有进行性AD的患者中β-淀粉样蛋白斑块的清除可能不足以停止认知退化,从而强调对于AD的另外治疗策略的需要(Holmes等,Lancet372(2008),216-223;Boche等,ActaNeuropathol.120(2010),13-20)。随着基于Aβ的免疫疗法在转基因动物模型中的成功,主动免疫疗法的概念被扩展至tau蛋白。然而,使用tau蛋白对野生型小鼠进行主动疫苗接种被发现诱导中枢神经系统中的神经原纤维缠结、轴突损伤和单核细胞浸润的形成,伴有神经缺陷(Rosenmann等,ArchNeurol.63(2006),1459-1467)。使用磷酸化tau肽进行主动疫苗接种的转基因小鼠品系中的随后研究揭示大脑中tau聚集体的大脑水平降低并且行为障碍的进展减缓(Sigurdsson,J.Alzheimers.Dis.15(2008),157-168;Boimel等,Exp.Neurol.224(2010),472-485)。这些发现突出了潜在益处,而且突出了与靶向tau的主动免疫疗法方法相关的巨大风险。迫切需要用有效且安全的疗法解决病理性tau蛋白的新颖的治疗策略。用源自健康人受试者的人抗体(所述抗体通过人免疫系统进化上优化和亲和力成熟)被动免疫将提供具有优异功效和安全性的较高概率的有希望的新的治疗途径。专利技术概述本专利技术利用健康人受试者的tau-特异性免疫应答用于分离天然抗-tau特异性人单克隆抗体。具体地说,根据本专利技术进行的实验从一组健康人受试者成功分离单克隆tau特异性抗体,而无神经退行性tau蛋白病的病征。本专利技术因此涉及能够特异性地识别tau的人抗体、抗原结合片段和类似的抗原结合分子。“特异性地识别tau”、“对tau具有特异性的抗体”和“抗-tau抗体”具体地、通常地且共同地意指针对天然形式的tau或聚集的或病理性修饰的tau同种型的抗体。本文提供对于全长、病理性磷酸化和聚集形式选择性的人抗体。在本专利技术的一个具体实施方案中,人抗体或其抗原结合片段展示出以如图7中提出的可变区VH和/或VL为特征的抗体的免疫结合特征。抗体的抗原结合片段可以是单链Fv片段、F(ab')片段、F(ab)片段和F(ab')2片段或任何其它抗原结合片段。在下文一个具体实施方案中,抗体或其片段是人IgG同工型抗体。或者,抗体是嵌合人-鼠或鼠源化抗体,后者特别适用于诊断方法和动物研究。此外,本专利技术涉及包含本专利技术的抗体或其活性片段、或它们的激动剂和同源分子或者可替代地拮抗剂的组合物,并且涉及使用在预防、诊断或治疗tau蛋白病中这类组合物的免疫治疗和免疫诊断方法,其中将有效量的所述组合物施用至有需要的患者。当然,本专利技术分别延伸至产生具有如以下所定义的不同和独特特征的抗体的永生化人B记忆淋巴细胞和B细胞。本专利技术还涉及编码本专利技术的抗体的免疫球蛋白链的至少一个可变区的多核苷酸。在一个实施方案中,所述可变区包含如图7中所提出的可变区的VH和/或VL的至少一个互补决定区(CDR)。因此,本专利技术还涵盖包含所述多核苷酸的载体和用其转化的宿主细胞以及其用于产生对tau具有特异性的抗体和等效结合分子的用途。用于重组产生抗体及其模拟物的手段和方法以及筛选竞争结合分子(例如抗体)的方法是本领域中已知的。然而,如本文所述,特别是关于在人中的治疗性应用,本专利技术的抗体在所述抗体的应用大致上不含针对对于嵌合和甚至人源化抗体另外观察到的这类抗体的免疫应答的意义上是人抗体。此外,本文公开可用于鉴别样品中的tau的组合物和方法。所公开的抗-tau抗体可用于针对样品中tau的存在筛选人血液、CSF和尿本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种人单克隆抗tau抗体或其tau结合片段,其中所述抗体与选自由以下组成的组的抗体结合相同tau表位:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。/n

【技术特征摘要】
20121221 US 61/745,4101.一种人单克隆抗tau抗体或其tau结合片段,其中所述抗体与选自由以下组成的组的抗体结合相同tau表位:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


2.一种单克隆抗tau抗体或其tau结合片段,其特征在于以下中的一种或多种:
(i)能够结合重组人tau;
(ii)能够结合病理性修饰的tau;
(iii)在预缠结阶段结合大脑中的神经原纤维缠结(NFT)、神经原纤维网线和/或营养不良性神经突中的病理性聚集的tau;
(iv)基本上不结合所述大脑中的生理形式的tau;
(v)特异性地结合由SEQIDNO:1至6表示的tau同种型B至F或胎儿tau中的任何一者;
(vi)特异性地结合tauC末端;
(vii)特异性地结合tauN末端
(viii)特异性地结合位于微管结合结构域中的tau表位,所述微管结合结构域掩蔽于生理微管相关的tau中;
(ix)在预缠结阶段特异性地结合大脑中的神经原纤维缠结(NFT)、神经原纤维网线和/或营养不良性神经突中的病理性聚集的tau;以及
(x)特异性地结合tau表位,所述tau表位包含选自由以下组成的组的氨基酸序列:SEQIDNO:6的残基125-131、397-441、226-244、217-227、37-55、387-406、421-427、427-439、1-158、197-207、57-67、355-441、313-319、309-319和221-231,
其中所述抗体与选自由以下组成的组的抗体结合相同tau表位:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


3.如权利要求1或2所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含重链可变区VH,其中所述重链可变区包含选自由以下组成的组的抗体的一个、两个或三个VHCDR:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


4.如权利要求3所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含选自由以下组成的组的抗体的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


5.如权利要求3所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含以下中的一个或多个:
(a)选自由以下组成的组的VHCDR1:SEQIDNO:79、85、91、97、103、109、115、121、127、133、139、145、151、157以及163;
(b)选自由以下组成的组的VHCDR2:SEQIDNO:80、86、92、98、104、110、116、122、128、134、140、146、152、158以及164;以及
(c)选自由以下组成的组的VHCDR3:SEQIDNO:81、87、93、99、105、111、117、123、129、135、141、147、153、159以及165。


6.如权利要求4所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含:
(a)选自由以下组成的组的VHCDR1:SEQIDNO:79、85、91、97、103、109、115、121、127、133、139、145、151、157以及163;
(b)选自由以下组成的组的VHCDR2:SEQIDNO:80、86、92、98、104、110、116、122、128、134、140、146、152、158以及164;以及
(c)选自由以下组成的组的VHCDR3:SEQIDNO:81、87、93、99、105、111、117、123、129、135、141、147、153、159以及165。


7.如权利要求6所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含选自由以下组成的组的抗体的所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4,其中所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3是如表2中列出的所定义。


8.如权利要求1至7中任一项所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含轻链可变区VL,其中所述轻链可变区包含选自由以下组成的组的抗体的一个、两个或三个VLCDR:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


9.如权利要求8所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含选自由以下组成的组的抗体的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4。


10.如权利要求8所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含以下中的一个或多个:
(a)选自由以下组成的组的VLCDR1:SEQIDNO:82、88、94、100、106、112、118、124、130、136、142、148、154、160、166以及224;
(b)选自由以下组成的组的VLCDR2:SEQIDNO:83、89、95、101、107、113、119、125、131、137、143、149、155、161以及167;以及
(c)选自由以下组成的组的VLCDR3:SEQIDNO:84、90、96、102、108、114、120、126、132、138、144、150、156、162以及168。


11.如权利要求9所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含:
(a)选自由以下组成的组的VLCDR1:SEQIDNO:82、88、94、100、106、112、118、124、130、136、142、148、154、160、166以及224;
(b)选自由以下组成的组的VLCDR2:SEQIDNO:83、89、95、101、107、113、119、125、131、137、143、149、155、161以及167;以及
(c)选自由以下组成的组的VLCDR3:SEQIDNO:84、90、96、102、108、114、120、126、132、138、144、150、156、162以及168。


12.如权利要求11所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含选自由以下组成的组的抗体的所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3:NI-105.17C1、NI-105.6C5、NI-105.29G10、NI-105.6L9、NI-105.40E8、NI-105.48E5、NI-105.6E3、NI-105.22E1、NI-105.26B12、NI-105.12E12、NI-105.60E7、NI-105.14E2、NI-105.39E2、NI-105.19C6以及NI-105.9C4,其中所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3是如表2中列出的所定义。


13.如权利要求1至12中任一项所述的单克隆抗tau抗体,所述抗体包含重链可变区VH,所述重链可变区与选自由以下组成的组的氨基酸序列至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%相同:SEQIDNO:44、45、47、48、50、52、54、56、58、60、62、65、67、69、71、73、75、7...

【专利技术属性】
技术研发人员:保罗·H·魏因雷布陈峰埃伦·A·加伯简·格林姆法比奥·蒙特罗西奥
申请(专利权)人:比奥根MA公司比奥根国际神经科学公司
类型:发明
国别省市:美国;US

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