一种大果木姜子果实提取物、提取方法及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种大果木姜子果实提取物、提取方法及制备方法和应用，本发明专利技术对大果木姜子果实进行了系统深入的化学成分研究，从中分离得3个倍半萜类成分,均为倍半萜类新骨架化合物，并明确了提取物的提取方法、制备方法及在抗炎及抗菌活性方面的应用。本发明专利技术首次公开了大果木姜子果实提取物，大果木姜子倍半萜A，B，C；并提供了它们的提取分离方法和新骨架结构确证的过程，完善了樟科木姜子属大果木姜子植物化学成分研究，提供的倍半萜类化合物具有新颖骨架结构，丰富了倍半萜类化合物的多样性。

A kind of extract, extraction method, preparation method and application of ginger fruit

【技术实现步骤摘要】
一种大果木姜子果实提取物、提取方法及制备方法和应用
本专利技术涉及天然药物专利
，具体涉及一种大果木姜子果实提取物、提取方法及制备方法和应用。
技术介绍
樟科(Lauraceae)木姜子属(Litsea)植物约有200种，分布于亚洲热带和亚热带及美洲。为落叶或常绿乔木或灌木。我国约有72种18变种和3变型，是我国樟科中种类较多、分布较广的属之一，自广东海南岛北纬18°，至长江以北的河南省北纬34°均有分布，但主产南方和西南温暖地区，为该地区森林中习见的树木。(中国科学院中国植物志编辑委员会，中国植物志[M]，北京：科学出版社，1979,75:248-281)。国内外学者先后从该属植物中分离得到黄酮、生物碱、萜类、木质素类等结构类型的化合物(AgrawalN,ChoudharyA.S,SharmaM.C,DobhalM.P.Chemicalconstituentsofplantsfromthegenuslitsea.Chemistry&Biodiversity2011；8:223-243)。本属植物的主要用途是提取芳香油(工业上的重要原料)和作为中草药。萜类是本属植物的特征性成分，也是活性成分之一。具有抗菌消炎、治疗心血管疾病、抗病毒、驱虫杀虫、免疫抑制、抗HIV等多种作用。其中倍半萜还因为其结构简单，并且具有多种母核结构类型，可作为研发药物的先导化合物。植物大果木姜子(LitsealancilimbaMerr.)是樟科，木姜子属常绿乔木，分布于云南、贵州和广西等省。《中药大辞典》记载:“性温、味辛、无毒，功能散寒祛湿、行气止痛，治吐泻、胃寒腹痛、脚气、肿毒”。民间常用于治疗胸腹痛、胸闷腹胀、哮喘等。目前，国内外尚无大果木姜子果实化学成分及其药理活性的文献报道，也未见与本专利技术中的大果木姜子果实提取物制备方法、用途有关的报道。为了克服上述技术问题，本专利技术人对大果木姜子果实进行了系统深入的化学成分研究，从中分离得3个倍半萜类成分,均为倍半萜类新骨架化合物，并明确了提取物的提取方法、制备方法及在抗炎及抗菌活性方面的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种大果木姜子果实提取物。本专利技术另一个目的是提供一种大果木姜子果实提取方法。本专利技术另一个目的是提供一种大果木姜子果实制备方法。本专利技术另一个目的是提供一种大果木姜子果实在抗炎及抗菌活性方面的应用。本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物为大果木姜子倍半萜A、B、C，它们的结构式和绝对构型分别如下：1)大果木姜子倍半萜A：2)大果木姜子倍半萜B：3)大果木姜子倍半萜C：本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的提取方法包括以下步骤：1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以5～15倍量95％乙醇在20～30℃下浸泡提取2～5次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加2～6倍水稀释，依次用2～6倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2～4次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次用石油醚：乙酸乙酯进行梯度洗脱，具体比例以体积比为：100％石油醚,100:1,50:1,20:1,10:1,5:1及100％乙酸乙酯，洗脱液经薄层色谱检测，分别收集含有大果木姜子倍半萜A，B，C的流分；4)再经200-300目硅胶柱色谱，以体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯洗脱细分之后，得大果木姜子倍半萜A，B，C洗脱流分。优选的，本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的提取方法包括以下步骤：1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以8～12倍量95％乙醇23～27℃浸泡提取3～4次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加2～6倍水稀释，依次用2～6倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2～4次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次用石油醚：乙酸乙酯进行梯度洗脱，具体比例以体积比为：100％石油醚,100:1,50:1,20:1,10:1,5:1及100％乙酸乙酯，洗脱液经薄层色谱检测，分别收集含有大果木姜子倍半萜A，B，C的流分；4)再经200-300目硅胶柱色谱，以体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯洗脱细分之后，得大果木姜子倍半萜A，B，C洗脱流分。进一步优选的，本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的提取方法包括以下步骤：1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以10倍量95％乙醇25℃浸泡提取3～4次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加3～5倍水稀释，依次用3～5倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取3次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次用石油醚：乙酸乙酯进行梯度洗脱，具体比例以体积比为：100％石油醚,100:1,50:1,20:1,10:1,5:1及100％乙酸乙酯，洗脱液经薄层色谱检测，分别收集含有大果木姜子倍半萜A，B，C的流分；4)再经200-300目硅胶柱色谱，以体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯洗脱细分之后，得大果木姜子倍半萜A，B，C洗脱流分。本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的制备方法为：将权利要求2-4任一项所述提取方法中的步骤4)所得的大果木姜子倍半萜B，C洗脱流分经高效液相色谱制备，分别以55～70％甲醇5～15L洗脱大果木姜子倍半萜B，C流分，得到化合物大果木姜子倍半萜B、C；将大果木姜子倍半萜A洗脱流分经硅胶薄层色谱制备，在温度为20～30℃，以比例为10:1的石油醚：乙酸乙酯为展开剂，展开，用5％香草醛浓硫酸为显色剂，在温度200～300℃下加热20～40s，刮板制备得到单体化合物大果木姜子倍半萜A。优选的，本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的制备方法为：将权利要求2-4任一项所述提取方法中的步骤4)所得的大果木姜子倍半萜B，C洗脱流分经高效液相色谱制备，分别以60～65％甲醇8～12L洗脱大果木姜子倍半萜B，C流分，得到化合物大果木姜子倍半萜B、C；将大果木姜子倍半萜A洗脱流分经硅胶薄层色谱制备，在温度为23～27℃，以比例为10:1的石油醚：乙酸乙酯为展开剂，展开，用5％香草醛浓硫酸为显色剂，在温度200～300℃下加热20～40s，刮板制备得到单体化合物大果木姜子倍半萜A。进一步优选的，本专利技术所述的一种大果木姜子果实提取物的制备方法为：将权利要求2-4任一项所述提取方法中的步骤4)所得的大果木姜子倍半萜B，C洗脱流分经高效液相色谱制备，分别以60～65％甲醇10L洗脱大果木姜子倍半萜B，C流分，得到化合物大果木姜子倍半萜B、C；将大果木姜子倍半萜A洗脱流分经硅胶薄层色谱制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大果木姜子果实提取物，其特征在于，所述提取物为大果木姜子倍半萜A、B、C，它们的结构式和绝对构型分别如下：/n1)大果木姜子倍半萜A：/n

【技术特征摘要】
1.一种大果木姜子果实提取物，其特征在于，所述提取物为大果木姜子倍半萜A、B、C，它们的结构式和绝对构型分别如下：
1)大果木姜子倍半萜A：



2)大果木姜子倍半萜B：



3)大果木姜子倍半萜C：





2.一种提取权利要求1所述的大果木姜子果实提取物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以5～15倍量95％乙醇在20～30℃下浸泡提取2～5次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；
2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加2～6倍水稀释，依次用2～6倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2～4次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；
3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次用石油醚：乙酸乙酯进行梯度洗脱，具体比例以体积比为：100％石油醚,100:1,50:1,20:1,10:1,5:1及100％乙酸乙酯，洗脱液经薄层色谱检测，分别收集含有大果木姜子倍半萜A，B，C的流分；
4)再经200-300目硅胶柱色谱，以体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯洗脱细分之后，得大果木姜子倍半萜A，B，C洗脱流分。


3.根据权利要求2所述的大果木姜子果实提取物的提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以8～12倍量95％乙醇23～27℃浸泡提取3～4次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；
2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加2～6倍水稀释，依次用2～6倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取2～4次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；
3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次用石油醚：乙酸乙酯进行梯度洗脱，具体比例以体积比为：100％石油醚,100:1,50:1,20:1,10:1,5:1及100％乙酸乙酯，洗脱液经薄层色谱检测，分别收集含有大果木姜子倍半萜A，B，C的流分；
4)再经200-300目硅胶柱色谱，以体积比为10:1的石油醚:乙酸乙酯洗脱细分之后，得大果木姜子倍半萜A，B，C洗脱流分。


4.根据权利要求2所述的大果木姜子果实提取物的提取方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将大果木姜子果实干燥，粉碎，以10倍量95％乙醇25℃浸泡提取3～4次，每次12～24小时，合并得提取液，减压浓缩；
2)减压浓缩提取液至无醇味，得水混悬流浸膏，加3～5倍水稀释，依次用3～5倍的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取3次，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位；
3)将上述乙酸乙酯部位上100-200目正相硅胶柱色谱，依次...

【专利技术属性】
技术研发人员：马贤鹏，肖雪，屠国丽，郁华军，金慧子，肖永振，
申请(专利权)人：贵州景诚制药有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州;52