白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用制造技术

技术编号:24319772 阅读:46 留言:0更新日期:2020-05-29 16:26
本发明专利技术公开了白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用,根据白屈菜红碱对肺炎链球菌具有较好的体外杀菌作用,能够抑制肺炎链球菌的生长,且最低杀菌浓度为31.2μg/mL,最小抑菌浓度为15.6μg/mL,本发明专利技术提出了白屈菜红碱对肺炎链球菌的抑制作用,在医药等领域具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用
本专利技术涉及医药、食品安全领域,具体涉及白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用。
技术介绍
肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)是一种链球菌科链球菌属革兰氏阳性细菌,可引起多种感染。菌体衰老时,或由于自溶酶的产生将细菌裂解后,可呈现革兰氏染色阴性。肺炎链球菌也可侵入机体其它部位,引起中耳积液、慢性中耳炎、暂时性失聪或语言迟缓等,严重时甚至会出现脑膜炎、心内膜炎、休克等并发症。其致病物质有荚膜、肺炎链球菌溶素O、脂磷壁酸和神经氨酸酶等。75%的成年人肺炎链球菌肺炎及50%以上严重的肺炎链球菌菌血症是由1~8型肺炎链球菌引起。肺炎链球菌6、14、19及23型常引起儿童肺炎链球菌性疾病。据报道,每年肺炎链球菌感染导致10万~13.5万人因患肺炎而住院,全球每年仍有超过100万名儿童因感染肺炎链球菌而死亡。统计显示,1997~2000年分离的肺炎链球菌对青霉素的耐药率在8.8%~22.5%,对红霉素的耐药率为42.5%~76.8%。2003年国内学者赵铁梅等研究检测的192株临床分离肺炎链球菌,对青霉素的耐药率为42.7%,对红霉素的耐药率为77.6%。肺炎链球菌的耐药性日益升高,这给医院的治疗工作带来了极大的影响。白屈菜红碱(chelerythrine,CHE)又名白屈菜赤碱、白屈菜季铵碱,是从飞龙掌血、白屈菜、博落回、血水草等植物中分离的异喷琳类的苯并菲啶型生物碱,具有抗菌和抗炎等药理活性和显著的抗肿瘤活性。白屈菜红碱对某些真菌、细菌和病毒有抑制作用,可抑制卡他、I型奈氏菌、粘膜奈氏菌、流感嗜血杆菌。但目前没有关于白屈菜红碱抑制高致病性肺炎链球菌生长方面的文献报道。
技术实现思路
本专利技术针对目前临床医学和食品安全中面临的耐药难题,目的在于提供白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用。为了实现上述目的,本专利技术采用的技术方案为:利用微量二倍稀释法确定肺炎链球菌对抗生素的耐药性,然后确定了白屈菜红碱对肺炎链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果表明:白屈菜红碱对肺炎链球菌具有较好的抑菌作用,可以用于抑制肺炎链球菌的生长。优选的,所述肺炎链球菌为耐红霉素、四环素、复方新诺明中多种抗生素的人源肺炎链球菌。优选的,所述肺炎链球菌选自耐红霉素、四环素及复方新诺明的人源肺炎链球菌。优选的,所述白屈菜红碱的最低杀菌浓度为31.2μg/mL,最小抑菌浓度为15.6μg/mL。本专利技术的有益效果体现在:本专利技术从现存的药用植物资源库入手,挖掘潜在的耐药菌抑制剂,基于白屈菜红碱对肺炎链球菌的作用的研究,发现非抗生素类化合物白屈菜红碱可以有效抑制肺炎链球菌的生长,为肺炎链球菌抑制剂的研究开发和应用提供新的思路和来源,在医药等领域具有广泛的应用价值。进一步的,本专利技术明确了白屈菜红碱对肺炎链球菌的抑制作用,将其作为抗生素替代品,可有效缓解或解决肺炎链球菌的耐药及感染问题,降低病死率。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步详细说明。所述实施例仅用于解释本专利技术,并非对本专利技术保护范围的限制。1、肺炎链球菌的药敏实验本专利技术以多株人源肺炎链球菌(菌株样本取自北京市海淀医院)为出发菌株,选用左旋氧氟沙星、氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、氯霉素、泰利霉素、四环素、万古霉素、利奈唑胺、复方新诺明10种常用抗生素进行试验。挑取培养18~24h的纯菌落均匀溶解于2~5mL无菌生理盐水中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊。利用试管二倍稀释法将抗生素、菌液及TSB液体培养基加入96孔培养板中过夜培养,不同浓度的药液组别均为三个平行,确保实验数据的可信度。利用酶标仪测定血屈菜红碱对肺炎链球菌的最小抑菌浓度。抑菌结果根据美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定,判定标准见表1,实验结果见表2。由此可知,2#菌株耐药性较强(1#菌株分型为2型,2#菌株分型为6型)。表1.美国临床试验室国家标准化管理委员会(CLSl2017)标准判定结果表2.人源肺炎链球菌的药敏试验MIC结果2、白屈菜红碱对多重耐药菌株的抑制作用为了充分考虑用药安全,本专利技术以白屈菜红碱这一单一活性成分为研究对象,以标准菌株(ATCC-49619,对阿莫西林、美洛培南、厄他培南、左旋氧氟沙星、氧氟沙星、莫西沙星、红霉素等抗生素敏感)作为参考,进行耐药性抑制作用的研究。挑取培养18~24h的纯菌落均匀溶解于2~5mLTSB液体培养基中,调节其浊度与0.5麦氏比浊管等浊,并用酶标仪测定其OD600值。用二甲基亚砜配制浓度为1000μg/mL的白屈菜红碱作为药液,利用试管二倍稀释法将药液、菌液及TSB液体培养基加入96孔培养板中过夜培养,不同浓度的药液组别均为三个平行,确保实验数据的可信度。利用酶标仪测定白屈菜红碱对肺炎链球菌的最小抑菌浓度(MIC)。并以MIC浓度为参照,对进行培养的菌液增加药物稀释梯度,将相应培养液转接于无菌的TSA固体培养基中培养24h,若无单菌落生成,则对应浓度为白屈菜红碱对肺炎链球菌的最低杀菌浓度(MBC),实验结果见表3。表3.白屈菜红碱对肺炎链球菌的抑制结果由表3可知,白屈菜红碱对耐红霉素、四环素及复方新诺明的肺炎链球菌抑制作用较好,其MIC为15.6μg/mL,MBC为31.2μg/mL。结果表明白屈菜红碱不仅对肺炎链球菌参考菌株有抑菌作用,对本专利技术中的肺炎链球菌(例如,2#菌株)也有抑菌作用。根据以上实验结果,结合中草药来源广泛、不良反应少及不易产生耐药性等特点,可通过获得活性单品成分白屈菜红碱,直接针对临床主要的肺炎链球菌发挥抑制作用,能够有效缓解或解决肺炎链球菌的感染问题,降低病死率,为研究临床分离的肺炎链球菌的抑菌剂提供科学依据,为开发抑制肺炎链球菌的药物和抗生素替代品提供新思路和来源。本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.白屈菜红碱在抑制肺炎链球菌生长中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述肺炎链球菌为人源肺炎链球菌。


3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述肺炎链球菌的耐药性是通过微量二倍稀释法确定的。


4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述肺炎链球菌耐受的抗生素选自红霉素、四环素、复方新诺明中的多种。


5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述肺炎链球菌选自耐红霉素、四环素及复方新诺明的肺炎链球菌。


6.根据权利要求5所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员:钱卫东崔雅欣刘淼付玉婷张家宁杨敏孙照欢
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:陕西;61

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