刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，属于医药技术领域。本发明专利技术首次发现，刺甘草查尔酮在体外水平对食管癌细胞增殖、转移和侵袭有抑制作用，在体内可以有效抑制食管癌的生长。此外，本发明专利技术还发现刺甘草查尔酮与5‑氟尿嘧啶联合用药，刺甘草查尔酮可以增加食管癌细胞对5‑氟尿嘧啶的敏感性。同时，本发明专利技术通过受试动物的血液生化常规检测证明了刺甘草查尔酮在抑制食管癌生长的同时没有明显的副作用。本发明专利技术为治疗食管癌提供了一种新的用药选择。

【技术实现步骤摘要】
刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用。
技术介绍
食管癌是一种比较常见的消化道肿瘤，具有较高的发病率和致死率。目前，食管癌的首选治疗方法是手术完全切除病变和局部淋巴结。然而，由于该病早期无明显异常症状，因此在患者确诊时，多已发展至中晚期，此时为患者实施外科根治性手术治疗，不仅达不到理想的治疗效果，且会严重创伤患者机体。针对该类患者，临床上采用同步化疗法进行治疗，常用化疗药物为顺铂及多烯紫杉醇。但临床经验表明该治疗方法常无法达到预期效果，同时伴有严重的副作用。因此，开发出一种新颖有效的治疗食管癌的方法显得尤为重要。天然产物以其明确的抗癌有效性、候选资源的丰富性等优势，成为抗癌药物研发的重中之重。例如长春新碱，伊立替康，依托泊苷和紫杉醇都是植物来源的抗癌化合物。甘草提取物能够发挥多种生物学效应，包括抗氧化、抗炎症以及抗肿瘤等，部分是通过调节Nrf2，NO和NFκB通路来实现的。甘草查尔酮A(LicochalconeA，LCA)是一种从甘草中分离出来的黄酮类化合物。据报道它可以抑制非小细胞肺癌和乳腺癌的细胞活力；甘草查尔酮A通过抑制钙粘蛋白E和MAPK通路抑制乳腺癌进展；甘草查尔酮A通过诱导G2/M细胞周期阻滞和内质网应激抑制非小细胞肺癌的增殖。刺甘草查尔酮(Echinatin)是从甘草中分离得到的另一种天然化合物，其分子式为C16H14O4，化学结构式如下：
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的目的在于提供刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用。所述的抗食管癌是抑制食管癌细胞增殖、转移、侵袭或肿瘤生长。所述的刺甘草查尔酮的有效浓度优选为10～40μM；更优选为10～20μM。所述的食管癌细胞为人源性食管癌细胞系KYSE30或KYSE270。所述的抗食管癌药物优选还含有5-氟尿嘧啶。所述的刺甘草查尔酮和5-氟尿嘧啶的配比优选为摩尔比10～40：0.1～2；更优选为摩尔比10～20：0.3～1.25；最优选为，当食管癌细胞为人源性食管癌细胞系KYSE30时，为摩尔比20：1.25；当食管癌细胞为人源性食管癌细胞系KYSE270时，为摩尔比20：0.3。可根据细胞对药物的敏感性适当调整用药量。所述的刺甘草查尔酮增加食管癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性。所述的刺甘草查尔酮的化学结构式为：所述的抗食管癌药物含有刺甘草查尔酮或其药物盐中的至少一种或两种混合。所述的刺甘草查尔酮与服用刺甘草查尔酮的小鼠个体体重的比例是20～50mg/kg。所述的抗食管癌药物还含有药学上可接受的载体和赋形剂。所述的载体优选为羧甲基纤维素钠。所述的羧甲基纤维素钠选为0.5％羧甲基纤维素钠水溶液。所述的抗食管癌药物为片剂、胶囊、滴丸、冲剂或口服液。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：刺甘草查尔酮是从中草药甘草中分离得到的一种天然化合物，其抗癌的分子机制仍不清楚。本专利技术发现在在体外水平刺甘草查尔酮对食管癌细胞增殖、转移和侵袭有抑制作用，在体内可以有效抑制食管癌的生长。刺甘草查尔酮显著抑制食管癌细胞成瘤能力，且无明显毒副作用，可为食管癌临床治疗提供一种新的用药选择。本专利技术还发现刺甘草查尔酮可以增加食管癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性，可将刺甘草查尔酮与5-氟尿嘧啶联合用药，用于食管癌临床治疗。附图说明图1为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270CCK-8实验结果图。图2为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270单克隆形成实验结果图。图3为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270转移实验结果图。图4为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270侵袭实验结果图。图5为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270中Vimentin、β-catenin和E-cadherin蛋白表达量检测实验结果图。图6为不同试剂处理下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270CCK-8实验结果图。图7为不同试剂处理下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270单克隆形成实验结果图。图8为不同试剂处理下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270中cleavedcaspase-3、caspase-3、和cleavedPARP蛋白表达量检测实验结果图。图9为不同刺甘草查尔酮浓度下，瘤体体积的变化结果图。图10为不同刺甘草查尔酮浓度下，裸鼠体重的变化结果图。图11为不同刺甘草查尔酮浓度下，重要组织(肾脏、肺、肝)形态的变化结果图。图12为不同刺甘草查尔酮浓度下，食管癌细胞KYSE30、KYSE270中P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR和LC3蛋白表达量检测实验结果图。图13为不同刺甘草查尔酮浓度下，裸鼠血液生化常规检测ALT和AST结果图。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。除非另有定义，本专利技术中所使用的所有科学和技术术语具有与本专利技术涉及
的技术人员通常理解的相同的含义。本专利技术实施例中涉及的实验材料：人源性食管癌细胞系KYSE30和KYSE270细胞购自于ATCC；刺甘草查尔酮购自于上海陶素生化科技有限公司；CCK-8购自于日本同仁化学研究所；雌性裸鼠(balb/c-nu/nu)购自于南京大学模式动物研究所；E-cadherin单抗购于美国ProteintechGroup，β-Catenin，vimentin，caspase-3，cleavedcaspase-3，PARP，cleavedPARP，phospho-AKT，AKT，phospho-mTOR，mTOR，LC3和β-actin都是购于CellSignalingTechnology；DMEM培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素购自于美国Gibco；二甲基亚砜(DMSO)购自于美国sigma；刺甘草查尔酮溶于DMSO，浓度50mM，储存于-80℃冰箱。实施例1单药实验CCK-8实验：取生长状态良好的KYSE30、KYSE270细胞，消化计数调整细胞密度，按照50μL/1000个细胞的数量接种于96孔板中。隔夜细胞贴壁后，将50mM的刺甘草查尔酮原液用DMEM培养基稀释成一定的浓度梯度，每孔加入50μL。设置四个细胞处理组，刺甘草查尔酮的浓度分别为0μM、10μM、20μM和40μM，每组3个复孔，并设置空白孔。于0、24、48、72、96和120h按照CCK-8试剂盒说明书每孔加10μLCCK-8(加的过程中避光，尽量避免复孔间本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，其特征在于：所述的抗食管癌是抑制食管癌细胞增殖、转移、侵袭或肿瘤生长。


3.根据权利要求1所述的刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，其特征在于：所述的刺甘草查尔酮的有效浓度为10～40μM；进一步为10～20μM。


4.根据权利要求1所述的刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，其特征在于：所述的抗食管癌药物还含有5-氟尿嘧啶。


5.根据权利要求4所述的刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，其特征在于：所述的刺甘草查尔酮增加食管癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性。


6.根据权利要求5所述的刺甘草查尔酮在制备抗食管癌药物中的应用，其特征在于：所述的刺...

【专利技术属性】
技术研发人员：许雯雯，李斌，刘琴文，洪盼，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44