一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋制造技术

本实用新型专利技术公开了一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋，属于生物细胞培养领域。其主要由主细胞培养袋、辅细胞培养袋构成，主细胞培养袋与辅细胞培养袋之间用导管连接，导管上设有控制导管通、断的装置。辅细胞培养袋容积小于主细胞培养袋，用于储存从主细胞培养袋获取的少量细胞培养基及酸碱指示剂。解决了现有技术普遍存在的不足，即，细胞培养需要利用酚红在培养基中指示其PH值，但是，培养基中的酚红成分又对细胞培养产生了不期望的影响，然而使用不添加酚红的培养基又无法判断培养基的pH值的范围。其优势在于既能利用酚红指示细胞培养基的pH值又不影响细胞培养。

A new cell culture bag with acid-base indicator and medium separation

【技术实现步骤摘要】
一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋
本技术属于生物细胞培养领域，具体涉及一种细胞培养袋。
技术介绍
细胞培养中培养基除了应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压等方面的要求外，还应满足pH值的要求。动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，pH值约为7.2～7.4。但这个pH值会受到细胞生存所需的气体影响，气体是细胞生存的必需条件之一，所需气体主要是氧气和二氧化碳气体。氧气参与三羧酸循环，产生能力供给细胞生长、增殖和合成各种成分。二氧化碳既是细胞代谢产物，也是细胞所需成分，二氧化碳会对细胞培养基的pH值产生直接影响，因为在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强，二氧化碳不断被释放，培养基中二氧化碳的增多使得其逐渐变为酸性，即pH值减小，因此，实时观察细胞培养基pH值的变化，对于把握细胞培养过程中pH值对细胞培养的影响、或采取必要措施控制pH值极为重要。目前实验室中培养细胞多使用添加酚红的培养基，利用酚红在培养基中指示其PH值：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。可以通过肉眼观察判断培养基pH值的范围。但是，培养基中的酚红成分可以模拟人固醇类激素的作用，尤其是雌激素。因而为了避免固醇类反应，在培养哺乳类细胞时一般使用不添加酚红的培养基，然而在使用无酚红培养基时无法判断培养液的pH值的范围。因此，研发一种既能利用酚红指示细胞培养基的pH值又不影响细胞培养的技术是必要的。
技术实现思路
为了解决上述问题，本技术提供了一种既可指示培养基pH值又不影响细胞培养的新型细胞培养袋，实现了细胞培养基跟酚红指示剂的分离且能实时、连续观测培养基的pH值。本技术通过以下技术方案来实现：一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋，包括主细胞培养袋、辅细胞培养袋，主细胞培养袋与辅细胞培养袋之间用导管连接，导管上设有控制导管通、断的装置。辅细胞培养袋容积小于主细胞培养袋，用于储存从主细胞培养袋获取的少量细胞培养基及酸碱指示剂。使用时，通过主细胞培养袋边缘处与外界连通的导管往主细胞培养袋中注入培养基用来培养细胞，然后操控连接主细胞培养袋与辅细胞培养袋的导管上的控制导管通、断的装置使导管处于连通状态，使适量细胞培养基通过导管流入辅细胞培养袋，随后操控导管上的控制导管通、断的装置使得该导管处于非连通状态，接着通过辅细胞培养袋边缘处与外界连通的导管往辅细胞培养袋中注入适量浓度适当的酚红试剂，最后将主细胞培养袋跟辅细胞培养袋的各管口封闭，并将其置入细胞培养设备中进行细胞培养。培养过程中随时通过观测辅细胞培养袋中培养基体系的颜色对pH值进行判断。本技术具有如下优势：（1）指示剂与细胞培养基实现分离，避免了指示剂对细胞培养基的影响，特别是避免了固醇类反应。细胞培养基置于主细胞培养袋中，取少量该细胞培养基进入辅细胞培养袋，并在辅细胞培养袋中注入适量酚红指示剂，使得主细胞培养袋中的培养基跟辅细胞培养袋中的酚红指示剂分离，避免了酚红指示剂对主细胞培养袋中培养基的影响；（2）辅细胞培养袋中的酸碱情况能准确的反应主细胞培养袋中的酸碱情况。辅细胞培养袋中的细胞培养基是取自主细胞培养袋，与主细胞培养袋中的培养基成分、状态完全一样，相当于主细胞培养袋培养基的样本，在组成跟性质上能完全代表主细胞培养袋中的培养基，它们同时放在细胞培养设备中，所处的细胞培养环境完全一样，辅细胞培养袋中的细胞培养情况完全能代表主细胞培养袋中细胞的培养情况，辅细胞培养袋中酚红指示的酸碱性能完全代表主细胞培养袋中的酸碱性；（3）不需要频繁取样且酸碱性情况的观测是实时的、连续的。目前为了避免酚红试剂对细胞培养产生影响而不使用酚红试剂，想要获知细胞培养基的酸碱性时需要从细胞培养袋中取样在细胞培养袋外用酚红试剂指示其酸碱性，这种方法的弊端在于操作麻烦，且观测不是连续的，观测结果对真实情况的反应受取样观测的频次影响，本技术的技术方案，实现了主细胞培养袋中不使用酚红试剂，但通过辅细胞培养袋可以间接获知主细胞培养袋中的酸碱性情况，不需要频繁取样，且酸碱性情况的观察是实时的、连续的。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本技术做进一步详细的说明。图1为本技术结构示意图。图中：1-主细胞培养袋，2-辅细胞培养袋，3-夹子，4-导管。具体实施方式结合附图，一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋，包括主细胞培养袋、辅细胞培养袋，主细胞培养袋与辅细胞培养袋之间用导管连接，导管上设有控制导管通、断的夹子，导管为软质材料构成。辅细胞培养袋容积小于主细胞培养袋，用于储存从主细胞培养袋获取的少量细胞培养基及酸碱指示剂，主细胞培养袋边缘处设置有两个跟外界连通的导管，辅细胞培养袋边缘处也设置有两个跟外界连通的导管。使用时，通过主细胞培养袋边缘处与外界连通的导管往主细胞培养袋中注入培养基用来培养细胞，然后打开连接主细胞培养袋与辅细胞培养袋的导管上的夹子，使适量细胞培养基通过导管流入辅细胞培养袋，随后松开夹子使得该导管被夹子夹紧处于非连通状态，接着通过辅细胞培养袋边缘处与外界连通的导管往辅细胞培养袋中注入适量浓度适当的酚红试剂，最后将主细胞培养袋跟辅细胞培养袋的各管口封闭，并将其置入细胞培养设备中进行细胞培养。培养过程中随时通过观测辅细胞培养袋中培养基体系的颜色对pH值进行判断。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋，其特征在于，包括主细胞培养袋、辅细胞培养袋，主细胞培养袋与辅细胞培养袋之间用导管连接，导管上设有控制导管通、断的装置。/n

【技术特征摘要】
1.一种酸碱指示剂与培养基分离的新型细胞培养袋，其特征在于，包括主细胞培养袋、辅细胞培养袋，主细胞培养袋与辅细胞培养袋之间用导管连接，导管上设有控制导管通、断的装置。

...

【专利技术属性】
技术研发人员：王媛媛，刘进平，李建伟，魏永，董宁宁，王睿升，
申请(专利权)人：山西君诺康源生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：山西;14