治疗方法和新颖构建体技术

本发明专利技术提供了将化合物靶向递送到缺氧细胞的新颖方法，例如治疗与缺氧相关的疾病和病症，所述方法包括施用构建体，所述构建体包括用于递送到缺氧细胞的靶向载体肽和化合物。本发明专利技术还提供了用于通过施用新颖构建体、对新颖构建体进行编码的核酸和/或包括对新颖构建体进行编码的核酸的核酸载体来治疗眼部疾病或病症的新颖方法。本发明专利技术进一步提供了新颖构建体、对此些构建体进行编码的核酸和/或包括对此些构建体进行编码的核酸的核酸载体。

Therapeutic methods and novel constructs

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗方法和新颖构建体
本专利技术涉及用于将化合物靶向缺氧细胞的新颖方法以及用于此用途的构建体，所述新颖方法包含涉及所述化合物的治疗方法。本专利技术进一步涉及用于治疗眼部病症和/或疾病的新颖方法以及用于此用途的构建体。
技术介绍
许多疾病和病症与缺氧细胞和/或组织相关。例如，年龄相关性黄斑变性(AMD)和糖尿病性视网膜病变两者都与视网膜缺血相关，从而使得视网膜色素上皮细胞死亡。通过进一步举例，肿瘤(如癌症)的血管供应较差并且缺氧和/或具有缺氧的部分或区域，从而导致组织中的氧气水平降低。在肿瘤的情况下，持续缺血可以促进耐缺氧肿瘤细胞的存活率高于正常细胞。肿瘤血管中的结构异常可能影响对治疗的治疗应答。通过进一步举例，许多疾病和病症都与导致缺氧的灌注不足相关，包含中风和短暂性缺血发作、心脏缺血、缺血性结肠炎(大肠缺血)、败血症、急性肢体缺血、皮肤缺血、多发性硬化症、血管性痴呆和阿尔茨海默氏病。尽管存在可用于与缺氧相关的某些疾病的一些治疗方法，但这些方法并非没有问题。例如，急性缺血的当前治疗选择通常针对缺血原因(例如，血栓形成)，并且包含注射抗凝剂、溶栓、栓塞切除、外科手术血管重建或截肢。另一种选择是降低身体或器官的温度以试图降低受影响的细胞的有氧代谢率，从而减少缺氧的即时影响。然而，缺血组织在此些治疗之后继续退化。例如，败血症与灌注不足的发展相关。治疗方法然后转向尝试限制缺血性损伤的后续影响。然而，这些方法经常与脱靶效应和副作用相关。类似地，当前用于治疗与慢性缺血相关的疾病和病症的方法与脱靶效应和副作用相关。例如，目前主要通过玻璃体内注射抗VEGF药剂(包含例如VEGF-Trap)来治疗AMD和糖尿病性视网膜病变两者。最近已经认识到，在许多情况下(1-3)，长期治疗可能导致抗VEGF的抗性，其中经过五年治疗后最佳矫正视力低于基线。另外，过度使用抗VEGF药剂可能对良好血管造成损失，从而加剧组织缺血(24)。在肿瘤的情况下，化学疗法的副作用已得到充分证明。这些副作用通常由于治疗癌症使用的治疗剂以非特异性方式被细胞摄取的事实而造成，并且对正常细胞产生毒性作用。先前已示出，连接蛋白通道阻滞剂可以减少慢性炎症并促进血管完整性(18，29，30)。某些连接蛋白通道阻滞剂(例如，Gap19)需要进入细胞以与连接蛋白的细胞质结构域结合。例如，Gap19与连接蛋白Cx43的细胞质尾结合。真核细胞的质膜对许多化学化合物的渗透性差，从而显著降低其例如作为治疗剂或实验试剂的功效，尤其是当其需要到达细胞质才能有效。由于如Gap19等连接蛋白通道阻滞剂的渗透性差，先前已使用高浓度来达到功效(6、7)。然而，以高浓度施用Gap19可能产生不期望的副作用，如脱靶效应或未经请求的免疫应答。已经开发出改善化学化合物的细胞渗透性的技术，所述技术包含使用基于脂质、聚阳离子、纳米颗粒和肽的方法。然而，这些技术并非没有问题。例如，细胞可渗透的载体肽可能很大且制造昂贵，从而使其在商业上不可行。载体肽也可能干扰其所携带的分子的构象，从而降低那些化合物的功效。载体肽也可能缺乏对靶组织或细胞的特异性，从而导致可能不期望的脱靶效应。许多载体肽是高度阳离子的。例如，其可以含有高浓度的氨基酸精氨酸。由于诱导的膜渗漏，此些载体肽可能在较高浓度下呈毒性(31)。以上实例表明需要用于递送到缺氧细胞的替代性治疗选择以及用于递送细胞内作用的连接通道阻滞剂的替代性选择。在本说明书的结尾处收集了所引用出版物的书目详细信息。专利技术目的本专利技术的目的是提供将化合物靶向递送到缺氧细胞的方法、治疗与缺氧相关的疾病或病症的方法、治疗眼部疾病或病症的方法、构建体的用途、核酸的用途、包括对构建体进行编码的核酸的核酸载体的用途、增加化合物的摄取的方法、制备用于增加化合物的摄取的药物的方法、减少治疗剂脱靶效应的方法、构建体、对构建体进行编码的核酸和/或对克服或改善了现有技术的缺点的构建体进行编码的核酸载体。本专利技术的另外的替代性目的是为公众提供有用的选择。
技术实现思路
本专利技术提供了一种将化合物靶向递送到缺氧细胞的新颖方法，例如治疗与缺氧相关的疾病和病症，所述方法包括施用构建体，所述构建体包括用于递送到缺氧细胞的靶向载体肽和化合物。本专利技术还提供了一种用于通过施用新颖构建体、对新颖构建体进行编码的核酸和/或包括对新颖构建体进行编码的核酸的核酸载体来治疗眼部疾病或病症的新颖方法。本专利技术进一步提供了新颖构建体、对此些构建体进行编码的核酸和/或包括对此些构建体进行编码的核酸的核酸载体。因此，在第一广泛方面，本专利技术提供了一种将化合物靶向递送到受试者中的缺氧细胞的方法，所述方法包括：向所述受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述化合物。在第二广泛方面，本专利技术提供了一种将肽化合物靶向递送到受试者中的缺氧细胞的方法，所述方法包括：向所述受试者施用对构建体进行编码的核酸，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述肽化合物。在第三广泛方面，本专利技术提供了一种将肽化合物靶向递送到受试者中的缺氧细胞的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包括对构建体进行编码的核酸的核酸载体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述肽化合物。在第四广泛方面，本专利技术提供了一种治疗与缺氧相关的疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)用于治疗所述疾病或病症的治疗剂。在第五广泛方面，本专利技术提供了一种治疗眼部疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽。在第六广泛方面，本专利技术提供了一种治疗与缺氧相关的疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用对构建体进行编码的核酸，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)用于治疗所述疾病或病症的肽治疗剂。在第七广泛方面，本专利技术提供了一种治疗眼部疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用对构建体进行编码的核酸，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽。在第八广泛方面，本专利技术提供了一种治疗与缺氧相关的疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用包括对构建体进行编码的核酸的核酸载体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)用于治疗所述疾病或病症的肽治疗剂。在第九广泛方面，本专利技术提供了一种治疗眼部疾病或病症的方法，所述方法包括：向受试者施用包括对构建体进行编码的核酸的核酸载体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽。在第十广泛方面，本专利技术提供了一种治疗与缺氧相关的疾病或病症的方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种将化合物靶向递送到受试者中的缺氧细胞的方法，所述方法包括向所述受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述化合物。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170428 NZ 731353;20170428 NZ 7313641.一种将化合物靶向递送到受试者中的缺氧细胞的方法，所述方法包括向所述受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述化合物。


2.一种将化合物靶向递送到缺氧细胞的方法，所述方法包括使构建体与缺氧细胞群接触，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述化合物。


3.一种将化合物靶向递送到缺氧和非缺氧细胞混合群中的缺氧细胞的方法，所述方法包括使构建体与细胞混合群或包括细胞混合群的组合物接触，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)所述化合物。


4.一种治疗与缺氧相关的疾病或病症的方法，所述方法包括向受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)用于治疗所述疾病或病症的治疗剂。


5.一种治疗眼部疾病或病症的方法，所述方法包括向受试者施用构建体，所述构建体包括(a)源自乙型肝炎病毒的X蛋白的靶向载体肽和(b)能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽。


6.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽包括氨基酸序列LCL(SEQIDNO:4)。


7.根据权利要求1到6中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：
LCLRP(SEQIDNO:5)；
LCLRPV(SEQIDNO:2)；
LCLRPVG(SEQIDNO:6)；
LCLRPVGAE(SEQIDNO:7)；
LCLRPVGAESR(SEQIDNO:8)；
LCLRPVGAESRGRPV(SEQIDNO:9)；
LCLRPVGAESRGRPVSGPFG(SEQIDNO:10)；
以及其功能等效变体。


8.根据权利要求1到6中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由以下组成的组：
LCL(SEQIDNO:4)；
LCLRP(SEQIDNO:5)；
LCLRPV(SEQIDNO:2)；
LCLRPVG(SEQIDNO:6)；
LCLRPVGAE(SEQIDNO:7)；
LCLRPVGAESR(SEQIDNO:8)；
LCLRPVGAESRGRPV(SEQIDNO:9)；
LCLRPVGAESRGRPVSGPFG(SEQIDNO:10)；
以及其功能等效变体。


9.根据权利要求1到6中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由以下组成的组：
LCLX(SEQIDNO:11)；
XLCL(SEQIDNO:12)；
XLCLX(SEQIDNO:13)；
LCLK(SEQIDNO:14)；
LCLH(SEQIDNO:15)；
LCLR(SEQIDNO:16)；
LCLE(SEQIDNO:17)；
LCLN(SEQIDNO:18)；
LCLQ(SEQIDNO:19)；
VLCLR(SEQIDNO:20)；或
LCLD(SEQIDNO:21)；
其中X为任何氨基酸。


10.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽包括选自由以下组成的组的氨基酸：
XCXR(SEQIDNO:22)；
ICIR(SEQIDNO:23)；或
VCVR(SEQIDNO:24)，
其中X为任何疏水性氨基酸。


11.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的方法，其中所述靶向载体肽由氨基酸组成，所述氨基酸选自由以下组成的组：
XCXR(SEQIDNO:22)；
ICIR(SEQIDNO:23)；或
VCVR(SEQIDNO:24)，
其中X为任何疏水性氨基酸。


12.根据权利要求1到4或6到11中任一权利要求所述的方法，其中所述化合物或治疗剂是能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽。


13.根据权利要求5或权利要求12所述的方法，其中所述能够与连接蛋白43(Cx43)的细胞内结构域相互作用的肽能够抑制Cx43的细胞内C端尾与Cx43的细胞内环相互作用。


14.根据权利要求5、12或13中任一权利要求所述的方法，其中所述能够与Cx43的细胞内结构域相互作用的肽能够优选地在不阻断间隙连接的情况下抑制Cx43半通道开放。


15.根据权利要求5或12到14中任一权利要求所述的方法，其中所述能够与Cx43的细胞内结构域相互作用的肽包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：
KQIEIKKFK(SEQIDNO:3)；
DGVNVEMHLKQIEIKKFKYGIEEHGK(SEQIDNO:67)；
DGANVDMHLKQIEIKKFKYGIEEHGK(SEQIDNO:68)；
RPSSRASSRASSRPRPDDLEI(SEQIDNO:69)；
RQPKIWFPNRRKPWKKRPRPDDLEI(SEQIDNO:70)；
RPRPDDLEI(SEQIDNO:71)；
SRPRPDDLEI(SEQIDNO:72)；
以及其功能等效变体。


16.根据权利要求5或12到14中任一权利要求所述的方法，其中所述能够与Cx43的细胞内结构域相互作用的肽由氨基酸序列组成，所述氨基酸序列选自由以下组成的组：
KQIEIKKFK(SEQIDNO:3)；
DGVNVEMHLKQIEIKKFKYGIEEHGK(SEQIDNO:67)；
DGANVDMHLKQIEIKKFKYGIEEHGK(SEQIDNO:68)；
RPSSRASSRASSRPRPDDLEI(SEQIDNO:69)；
RQPKIWFPNRRKPWKKRPRPDDLEI(SEQIDNO:70)；
RPRPDDLEI(SEQIDNO:71)；

【专利技术属性】
技术研发人员：科林·理查德·格林，弗雷泽·保罗·科蒂尼奥，伊尔瓦·达纳·鲁彭塔尔，
申请(专利权)人：奥克兰联合服务有限公司，
类型：发明
国别省市：新西兰;NZ