治疗或预防儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速的方法和组合物技术

本发明专利技术提出AIP肽和多核苷酸组合物、使用此类组合物治疗CPVT的方法、以及人诱导多能干细胞衍生心肌细胞模型，可用于表征调节心肌传导和收缩的剂。

Methods and compositions for the treatment or prevention of catecholamine sensitive pleomorphic ventricular tachycardia

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗或预防儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请是指定美国的国际申请，并基于35U.S.C.§119(e)而主张2017年7月6日提交的美国临时申请62/529,256的权益，该临时申请的内容通过引用而整体并入本文。联邦资助研究下作出的专利技术权利的声明本专利技术在政府支持下完成，由美国国立卫生研究院资助(项目编号：NIHU01Hl100401和UG3TR002145)。政府享有本专利技术的某些权利。
技术介绍
儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速(CPVT)是一种以异常心律为特征的病症，患病率高达万分之一。CPVT的症状包括与运动或情绪压力相关的头晕或晕厥。室性心动过速的发作可造成心脏的有效跳动停止(心脏骤停)，导致儿童和年轻人的突然死亡而未发现心脏异常。对于CPVT的治疗，包括运动限制、β-受体阻滞药的使用、以及埋藏式自动复律除颤器。其它治疗是外科交感神经切除术和使用氟卡尼(flecainide)治疗。不幸的是，这些治疗并非对所有患者均有效，并且受限于病人依从性、药物副作用、或负面事件的风险例如由埋藏式除颤器引起的致命电流风暴。
技术实现思路
本申请的具体实施例部分地基于下述发现：对CaMKII激活和随之而来的下游信号传导的抑制，显著减少了与钙兰尼碱(ryanodine)通道RYR2相关的儿茶酚胺刺激潜伏性心律失常。在体内实验中，专利技术人发现，当该肽的抑制剂AIP被表达在CPVT模型鼠体内的心脏组织中时，AIP抑制鼠的心律失常。参见实施例2、图17和图18。专利技术人还发现，在CPVT突变中，位于RYR2中S2814处的丝氨酸残基的CaMKII介导的磷酸化作用对于儿茶酚胺刺激潜伏性心律失常至关重要。丝氨酸突变为丙氨酸逆转了对于在RYR2蛋白中具有CPVT相关突变的心脏细胞所记录的不正常Ca2+火花频率(sparkfrequency)。据此，如下所述，本专利技术提出Ca2+-钙调蛋白依赖性激酶II(CaMKII)抑制肽，包括autocamtide-2相关抑制肽(AIP)和相关的肽、以及CaM-KNtide和相关多肽(例如CN19o)；以及相关的多核苷酸组合物；以及使用此类组合物治疗CPVT的方法。本专利技术还提供CPVT诱导多能干细胞心肌细胞(iPSC-CM)和使用它们表征用于治疗CPVT的剂的方法。一方面，本申请提供一种药物组合物，包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的载体。一方面，本文提供一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的载体，用于治疗心律失常例如儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速(CPVT)。一方面，本文提供一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的载体，用于制造治疗心律失常例如CPVT的药品。另一方面，本文提供一种表达载体，包含编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸。一方面，本文提供一种表达载体，所述表达载体包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸，用于治疗心律失常例如CPVT。一方面，本文提供一种表达载体，所述表达载体包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸，用于制造治疗心律失常例如CPVT的药品。另一方面，本文提供一种包含表达载体的细胞，包含编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸。一方面，本文提供一种包含表达载体的细胞，所述表达载体包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸，用于治疗心律失常例如CPVT。一方面，本文提供一种包含表达载体的细胞，所述表达载体包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸，用于制造治疗心律失常例如CPVT的药品。另一方面，本文提供一种调节受试者体内心律失常的方法，所述方法包含令包含心脏兰尼碱通道(RYR2)的细胞与CaMKII抑制剂、CaMKII肽抑制剂、或编码所述CaMKII肽抑制剂的多核苷酸接触。另一方面，本文提供一种调节受试者体内的兰尼碱通道(RYR2)多肽磷酸化作用的方法，所述方法包含令包含心脏的细胞与CaMKII抑制剂、CaMKII肽抑制剂、或编码所述CaMKII肽抑制剂的多核苷酸接触。另一方面，本文提供一种治疗具有心律失常相关突变的受试者的方法，所述方法包含向所述受试者给药CaMKII抑制剂、CaMKII肽抑制剂、其类似物或片段、多编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸。另一方面，本文提供一种表征心肌细胞的方法，所述方法包含使用表达包含CPVT相关突变的心脏兰尼碱通道(RYR2)的诱导多能干细胞衍生心肌细胞来监测心肌传导或收缩，或监测心律失常。另一方面，本文提供一种筛选化合物的方法，所述方法包含令表达包含CPVT相关突变的心脏兰尼碱通道(RYR2)的诱导多能干细胞衍生心肌细胞与备选试剂接触，并测量所述细胞内的心肌传导或收缩。在所述任何一方面的一个具体实施例中，CaMKII肽抑制剂是AIP、CN19、CN19o、CN27、CN21、或其类似物或片段。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，CaMKII肽抑制剂可操作地链接至适用于驱动所述肽在哺乳动物心脏细胞内表达的启动子。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，载体是包含有效量的CaMKII肽抑制剂或其类似物或片段的药物组合物。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，载体是逆转录病毒、腺病毒或腺相关病毒载体。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，突变是在心脏兰尼碱通道(RYR2)中。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，突变选自RYR2R4651I、RYR2R176Q、RYR2D385N、RYR2S404R和RYR2G3946S所组成的组。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，所述方法抑制心律失常。在所述任何一方面的一个具体实施例中或前述具体实施例的任一个中，所述方法抑制受试者体内的儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速。本专利技术定义的组合物和物品是关于下文所提供的实施例而单离或另外制造的。从具体实施方式和权利要求书可明了本专利技术的其它特征和优点。定义除非另做定义，否则本文中使用的所有科技术语均具有本专利技术所属领域技术人员所一般理解的意义。下述参考文献对技术人员提供本专利技术中使用的多个术语的一般性定义：Singleton等人所著《微生物学和分子生物学词典(第二版)》(Singletonetal.,DictionaryofMicrobiologyandMolecularBiology(2nded.1994))；《剑桥科技词典》(TheCambridgeDictionaryofScienceandTechnology(Walkered.,1988))；Rieger等人编撰的《遗传性术语表(第五版)》(TheGlossaryofGenetics,5thEd.,R.Riegeretal.(eds.),SpringerVerlag(199本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物组合物，包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的载体。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170706 US 62/529,2561.一种药物组合物，包含有效量的编码CaMKII肽抑制剂的载体。


2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述CaMKII肽抑制剂是AIP、CN19、CN19o、CN27、CN21、或其类似物或片段。


3.一种表达载体，包含编码CaMKII肽抑制剂的多核苷酸。


4.根据权利要求3所述的表达载体，其中所述CaMKII肽抑制剂可操作地链接至适用于驱动所述肽在哺乳动物心脏细胞内表达的启动子。


5.根据权利要求3或4所述的表达载体，其中所述载体是药物组合物，所述药物组合物包含有效量的CaMKII肽抑制剂或其类似物或片段。


6.根据前述权利要求3至5中任一项所述的表达载体，其中所述载体是逆转录病毒、腺病毒或腺相关病毒载体。


7.一种细胞，包含根据前述权利要求3至6中任一项所述的表达载体。


8.一种调节受试者体内心律失常的方法，所述方法包含令包含心脏兰尼碱通道(RYR2)的细胞与CaMKII抑制剂、CaMKII肽抑制剂、或编码所述CaMKII肽抑制剂的多核苷酸接触。


9.一种调节受试者体内的...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·普，V·比兹泽里德斯，D·张，
申请(专利权)人：儿童医疗中心有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US