一种用于新冠病毒核酸快速检测的Cpf1试剂盒及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种用于新冠病毒SARS‑CoV‑2核酸快速检测的Cpf1荧光试剂盒，包括适用于SARS‑CoV‑2快速检测的Cpf1检测体系和荧光报告体系。本发明专利技术中，针对SARS‑CoV‑2病毒orf1a、orf1b、N和E的4个基因，设计一系列特异性crRNA,可灵敏、特异检测到SARS‑CoV‑2病毒核酸。本发明专利技术系首次采用Cpf1检测新冠病毒SARS‑CoV‑2，具有灵敏度高、特异性强、耗时短、高通量、肉眼可直接判读和不依赖大型实验设备等优势。这些优势使得本发明专利技术开发的基于Cpf1荧光法方法方便用于临床一线对新冠肺炎病毒SARS‑CoV‑2核酸的快速检测和鉴定诊断。

A cpf1 kit for rapid detection of new coronavirus nucleic acid and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种用于新冠病毒核酸快速检测的Cpf1试剂盒及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种对新冠肺炎病毒核酸的快速检测方法及试剂盒，更具体的说，涉及基于Cpf1荧光法检测对新冠病毒SARS-CoV-2病毒核酸的快速诊断方法及其试剂盒，属于生物

技术介绍
国际病毒分类委员会(ICTV)将新型冠状病毒(2019-nCoV)的正式分类名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2，SARS-CoV-2)。世界卫生组织(WHO)宣布，由这一病毒导致的疾病的正式名称为COVID-19。目前，对于新冠肺炎的诊断主要有病毒核酸分子检测和胸部影像学检测两种。胸部影像学检测，主要依赖于胸肺部CT成像结果进行判断：早期呈现多发的小斑片影及间质改变，以肺外带明显，进而发展为双肺多发磨玻璃影、浸润影。严重者出现肺实变，甚至‘白肺’，胸腔积液少见。但是，胸肺部CT检测，需要依赖于专业。在分子生物学的手段上，目前常用的办法有两种：病毒的基因测序和核酸检测。二代测序因为可以检测微量物质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于新冠病毒SARS-CoV-2核酸快速检测的Cpf1试剂盒，其特征在于，包括适用于新冠病毒SARS-CoV-2快速检测的Cpf1荧光检测体系；所述Cpf1荧光检测体系包括：针对新冠病毒SARS-CoV-2基因orf1a、orf1b、N和E检测区段的特异性crRNA、Cpf1蛋白和ssDNA报告系统；/n所述特异性crRNA为针对orf1a基因的orf1a-crRNA1到orf1a-crRNA2,针对orf1b基因的orf1b-crRNA1到orf1b-crRNA3，针对N基因的N-crRNA1到N-crRNA2和针对E基因的E-crRNA1到E-crRNA2中的任意一种或多种，其序列...

【技术特征摘要】
1.一种用于新冠病毒SARS-CoV-2核酸快速检测的Cpf1试剂盒，其特征在于，包括适用于新冠病毒SARS-CoV-2快速检测的Cpf1荧光检测体系；所述Cpf1荧光检测体系包括：针对新冠病毒SARS-CoV-2基因orf1a、orf1b、N和E检测区段的特异性crRNA、Cpf1蛋白和ssDNA报告系统；
所述特异性crRNA为针对orf1a基因的orf1a-crRNA1到orf1a-crRNA2,针对orf1b基因的orf1b-crRNA1到orf1b-crRNA3，针对N基因的N-crRNA1到N-crRNA2和针对E基因的E-crRNA1到E-crRNA2中的任意一种或多种，其序列为SEQNO.1到SEQNO.9；
所述ssDNA报告系统包括用于酶标仪荧光检测或荧光灯下肉眼直接判读的ssDNAFQreporter,所述ssDNAFQreporter为利用6-羧基荧光素和荧光淬灭剂标记的ssDNA，标记产物如下：/56FAM/TTTATTT/3BHQ1/，命名为ssDNAFQreporter/56FAM/TTTATTT/3BHQ1/。


2.如权利要求1所述用于新冠病毒SARS-CoV-2核酸快速检测的Cpf1试剂盒，其特征在于，所述特异性crRNA为：等比例混合的orf1a-crRNA1和orf1a-crRNA2，命名为orf1a-crRNAmix；或等比例混合的orf1b-crRNA1、orf1b-crRNA2和orf1b-crRNA3，命名为orf1b-crRNAmix；或等比例混合的N-crRNA1和N-crRNA2，命名为N-crRNAmix；或等比例混合的E-crRNA1和E-crRNA2，命名为E-crRNAmix。


3.权利要求1或2所述用于新冠病毒SARS-CoV-2核酸快速检测的Cpf1试剂盒的制备方法，其特征在于，所述特异性crRNA的制备方法包括：针对SARS-CoV-...

【专利技术属性】
技术研发人员：王鑫杰，张玉，黄行许，
申请(专利权)人：上海科技大学，
类型：发明
国别省市：上海;31