可延缓肿瘤生长的β-CD-PEG-G分子的合成及作为药物递送系统的应用技术方案

本专利合成了β‑环糊精‑PEG‑鸟苷(β‑CD‑PEG‑G)分子，该分子可在水中自组装形成带负电的球形聚集体，并且其能够在水溶液中稳定存在。该聚集体可包载阿霉素(Dox)形成β‑CD‑PEG‑G‑Dox纳米药，包封率为79±6.3％，而Dox从β‑CD‑PEG‑G‑Dox纳米药中释放时具有缓释性和pH响应性。除此之外，通过生物试验表明，β‑CD‑PEG‑G聚集体可以延缓肿瘤的生长，具有一定的抗肿瘤活性；同时β‑CD‑PEG‑G‑Dox纳米药可有效诱导肿瘤细胞凋亡，能够更好的发挥抗肿瘤作用。因此，β‑CD‑PEG‑G分子作为优异的药物载体具有重要的研究意义。

Synthesis of \u03b2 - cd-peg-g molecule and its application as drug delivery system

【技术实现步骤摘要】
可延缓肿瘤生长的β-CD-PEG-G分子的合成及作为药物递送系统的应用
本专利技术属于医药领域，具体涉及一种具有良好生物相容性、水溶性、稳定性好的聚集体及良好水溶性、稳定性的载药聚集体的制备及体内外的生物评价方法。
技术介绍
据最新统计的数据显示，癌症是美国第二大致死原因。前期诊断是癌症治疗重要的预防措施，后续的药物治疗也是重中之重。虽然化疗药物给癌症患者的生活带来了希望，但是由于这些药物自身的一些缺点从而在很大程度上限制了它们在临床上的使用。如阿霉素(Dox)是一种强效的广谱抗肿瘤化学治疗药物，它主要是通过产生细胞毒性并且在细胞有丝分裂的中期阶段抑制DNA的复制，从而杀死癌细胞发挥抗肿瘤作用。但是这种药物特异性比较差，无法区分正常细胞和癌细胞，在杀伤癌细胞的同时也对正常人体细胞造成损伤，从而引发一系列的严重副作用。因此寻找一种合适的药物载体来包载Dox，在不降低其治疗效果的前提下降低对正常组织的毒副作用受到了越来越多研究者的关注。环糊精是合成纳米载体常用的原料，环糊精由一系列的环糖分子组成，根据环糖分子个数的不同可以分为α-CD、β-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.本专利技术β-CD-PEG-Guanosine聚集体及负载阿霉素(Dox)的纳米药β-CD-PEG-G-Dox；其中，环糊精为(6A-Azido-6A-deoxy-β-cyclodextrin，简写为β-CD-N

【技术特征摘要】
1.本发明β-CD-PEG-Guanosine聚集体及负载阿霉素(Dox)的纳米药β-CD-PEG-G-Dox；其中，环糊精为(6A-Azido-6A-deoxy-β-cyclodextrin，简写为β-CD-N3)与5-己炔酸(5-HexynoicAcid)通过CLick反应生成产物S1(β-CD-C6H8N3O2)；然后由PEG(21-Amino-4,7,10,13,16,19-hexaoxahenicosanoicAcid,简写为PEG)和2',3'-异亚丙基鸟苷(2',3'-isopropyLideneguanosine，简写为G)通过酯化反应生成S2(PEG-G)；最后由S1和S2通过酰胺反应得到环糊精-PEG-异亚丙基鸟嘌呤核苷分子(β-CD-PEG-G)分子式如下：





2.本发明β-CD-PEG-G聚集体及负载阿霉素(Dox)的纳米药β-CD-PEG-G-Dox的制备方法是首先合成β-CD-PEG-G分子，然后确定β-CD-PEG-G分子能否在水中进行自组装及自组装后的聚集体形貌；其次，将亲脂性的抗癌药物阿霉素负载到β-CD-PEG-G纳米载体中形成β-CD-PEG-G-Dox纳米药，采用有机溶剂挥发法进行阿霉素的包载，并确定包载率；然后，体外模拟肿瘤微环境对β-CD-PEG-G-Dox纳米药进行体外释放研究，确定pH值对β-CD-PEG-G-Dox纳米药体外释放的影响；最后，评价β-CD-PEG-G聚集体的细胞毒性及β-CD-PEG-G-Dox纳米药的抗癌活性和抗肿瘤效果。


3.本发明β-CD-PEG-G分子的合成方法：
S1分子的合成：将43.1mg(0.1742mmoL)硫酸铜溶解于40mLDMF-H2O溶液(VDMF:VH2O＝10:1)中,然后加入34.2mg(0.1742mmoL)L-抗坏血酸钠，超声溶解。再依次分别加入100.2mg(0.08621mmoL)β-CD-N3(6A-Azido-6A-deoxy-β-cyclodextrin)和19.0μL(0.17242mmoL)5-己炔酸，超声溶解，在氮气保护下室温搅拌48h。冷冻干燥得粗品。粗品经HP-20大孔树脂纯化，洗脱剂用甲醇洗脱，最后将含有β-CD-C6H8N3O2的洗脱液收集并进行冷冻干燥，得到β-CD-C6H8N3O2纯品。
S2分子的合成：取112.6mg(0.4244mmoL)2',3'-异亚丙基鸟苷(鸟苷)以及100.2mg(0.2829mmoL)H2N-PEG-COOH于圆底烧瓶中，加入20mLDMF超声使其溶解。然后再加入65.08mg(0.3395mmoL)EDC,41.47mg(0.3395mmoL)DMAP,400μL(0.3395mmoL)DIPEA超声溶解，室温下搅拌24h。冷冻干燥混合液得到样品粗品。用中性氧化铝作为固定相，用二氯甲烷：甲醇(95：5–9：1)洗脱液洗脱。最后将含有PEG-G的洗脱液收集并进行冷冻干燥，得到PEG-G纯品。
β-CD-PEG-G分子的合成:取0.115g产物S1(0.13559mmoL)于圆底烧瓶中，超声溶解于200mLDMF中,然后依次加入27.2mg(0.13559mmoL)DCC,16mgNHS(0.13559mmoL)，超声溶解，室温下搅拌12h，再加入0.1903gS2(0.3076mmoL)，室温下继续搅拌24h，使其充分反应。然后将反应后的溶液冷冻干燥得样品粗品。使用中性氧化铝作为固定相,采用二氯甲烷：甲醇(99：1-5：5)洗脱剂洗脱，最后将含有β-CD-PEG-G的洗脱液收集并进行冷冻干燥，得到β-CD-PEG-G纯品。


4.本发明采用有机溶剂挥发法对载体进行阿...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丽英，魏光成，李静，辛美秀，
申请(专利权)人：滨州医学院，
类型：发明
国别省市：山东;37