【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于温度和压力控制的低温保存的方法和装置相关申请的交叉引用本申请要求35U.S.C.§119下于2017年8月11日提交的临时申请No.62/544219的优先权,此处通过引用将该申请的公开并入。
本公开提供了用于通过使用等容系统对样品进行温度和压力控制的低温保存的方法。
技术介绍
生物材料在冰点以下的温度的长期保存(低温保存)已经变得对许多医学应用必不可少;从临床应用(诸如冷冻卵母细胞的保存)到诺贝尔奖启用的研究(诸如秀丽隐杆线虫(C.Elegans)的低温保存)。
技术实现思路
开发用于在低温温度长期保存生物器官的低温保存技术越来越受关注。迄今为止,温度测量被认为是低温保存方案的设计和控制中最重要的热力学变量。在单相系统中,需要两个热力学性质来定义系统。在低温保存中,通常假设压力是等压的(恒定的),并且体积是恒定的。然而,该假设未得到验证,并且在低温保存方案中,不监测压力和体积。压力和体积可能根据容器的构造和所用的容器材料而变化。此处提供了指示更可靠手段的研究结果,该手段用于通 ...
【技术保护点】
1.一种用于样品的低温保存的方法,该方法包括:/n将生物样品放置在等容系统中;/n以受控方式降低所述等容系统的温度,该方式包括:/n(i)冷却所述生物样品直到达到第一温度为止;/n(ii)将所述样品在所述第一温度维持特定时间段,使得在所述第一温度达到压力和温度的热力学平衡;/n(iii)在X个温度重复步骤(i)和(ii),直到达到所述生物样品的冰点以下的温度为止,/n其中,X为2或更大的整数。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170811 US 62/5442191.一种用于样品的低温保存的方法,该方法包括:
将生物样品放置在等容系统中;
以受控方式降低所述等容系统的温度,该方式包括:
(i)冷却所述生物样品直到达到第一温度为止;
(ii)将所述样品在所述第一温度维持特定时间段,使得在所述第一温度达到压力和温度的热力学平衡;
(iii)在X个温度重复步骤(i)和(ii),直到达到所述生物样品的冰点以下的温度为止,
其中,X为2或更大的整数。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,X为4至1000的整数。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,X为6至1000的整数。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,对于(ii),将所述样品在所述温度维持从约10秒钟至约1小时选择的时间段。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,对于(ii),将所述样品在所述温度维持约30秒钟至30分钟。
6.根据权利要求1所述的方法,其中,所述生物样品的所述冰点以下的温度是-20℃或更低。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述生物样品的所述冰点以下的温度是-80℃或更低。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述生物样品的所述冰点以下的温度是-135℃或更低。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,所述生物样品的所述冰点以下的温度是从-135℃到-210℃。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,(i)的所述冷却是从在先温度开始的约1℃至约10℃的变化。
11.根据权利要求1所述的方法,其中,所述生物样品是一种或多种生物分子、一种或多种细胞成分、一种或多种细胞、一种或多种病毒、一种或多种胚胎、一种或多种组织、一个或多个器官或整个生物体。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述一种或多种生物分子选自氨基酸、寡肽、多肽、蛋白质、核碱基、核苷酸、核苷、寡核苷酸、多核苷酸、核酸、单糖、寡糖、多糖、碳水化合物、脂肪酸、蜡、固醇、单甘酯、甘油二酯、甘油三酯、磷脂质、代谢物、维生素、激素、类固醇或前述的任意组合,其中,一种或多种生物分子能够是天然存在的生物分子、是合成制造的、或其组合。
13.根据权利要求11所述的方法,其中,所述一种或多种细胞是雄性生殖细胞或雌性生殖细胞。
14.根据权利要求11所述的方法,其中,所述整个生物体是原核生物体。
15.根据权利要求11所述的方法,其中,所述整个生物体是真核生物体。
16.根据权利要求1所述的方法,其中,所述生物样品还包括一种或多种低温防护剂。
17.一种用于识别低温防护剂或其溶液是否防止在玻璃化和/或反玻璃化低温保存过程中的样品中的冰晶形成的方法,该方法包括:
将包括所述低温防护剂或其溶液的所述样品置于等容系统中;
在将所述等容系统的温度降低至冰点以下的温度的同时测量所述等容系统的压力;和/或
在从所述冰点以下的温度加温所述等容系统的同时测量所述等容系统的压力,
其中,压力在等容系统的冷却或加温期间的变化指示低温防护剂或其溶液未能防止样品中冰形成,并且
其中,如果在所述等容系统的冷却...
【专利技术属性】
技术研发人员:B·鲁宾斯基,G·纳斯塔塞,G·乌柯派,
申请(专利权)人:加利福尼亚大学董事会,
类型:发明
国别省市:美国;US
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