黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离工艺及其应用制造技术

技术编号:24194006 阅读:51 留言:0更新日期:2020-05-20 10:20
本发明专利技术涉及黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离技术领域,具体涉及黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的定向分离工艺及其应用。其制备方法:提取、微孔树脂柱富集、亲水制备液相色谱分离及亲水制备液相色谱纯化四个步骤。本发明专利技术成本低廉、产品纯度大于95%;本发明专利技术采用的技术手段可进行规模化生产:原料要求不高、成本低廉,易于批量备料;甲醇室温冷浸提取,易于操作;分离采用微孔树脂柱粗分,该微孔树脂分离材料可以装于中压柱层析系统中,易于规模化;分离纯化中使用的亲水制备液相色谱,为快速的等度方法。

Separation technology and application of natural antioxidant amino acid derivatives from mushroom

【技术实现步骤摘要】
黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离工艺及其应用
本专利技术涉及黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离
,具体涉及黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离工艺及其应用。
技术介绍
黄蘑菇,又名黄绿卷毛菇、黄绿蜜环菌,是高山草地珍稀野生蕈菌的代表。其子实体中含丰富的蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质、挥发油及多糖等营养成分,特别是“硒”的含量很高,是极佳的高原珍品之一。研究表明黄蘑菇提取物具有较好的抗氧化活性。然而,并不清楚其抗氧化成分是什么。目前,已报道从黄蘑菇中分离出抗氧化活性组分(李世峰,陈桂琛,毕玉蓉.两种野生食用菌抗氧化及抗肿瘤活性研究,中国食用菌.2004,24(3):58-63),研究报道采用多次溶剂分配法得到具有良好的抗氧化活性的醇溶性组分及水溶性多糖组分,其中溶剂分配次数为4~12次,过程较繁琐、不适于规模化生产。中国专利(CN201410040146.9、CN201410040010.8)曾报道采用反相固相萃取或制备液相色谱得到主要成分为核苷类化合物的黄蘑菇抗氧化组分,但是并未得到抗氧化活性成分。>目前,有关黄蘑菇中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.黄蘑菇中天然抗氧化的氨基酸衍生物的分离工艺,其特征在于:该工艺具体包括如下步骤:/n步骤1,提取:将黄蘑菇鲜样,粗碎后按料液比1g:5~100mL的甲醇提取,在室温下提取2~4次,每次2~4 h,过滤、合并滤液,即滤液A,该滤液A经减压干燥至膏状,即得唐黄蘑菇甲醇提取物浸膏;/n步骤2,微孔树脂柱富集:在所述黄蘑菇甲醇提取物浸膏中加入其质量5~10倍的体积浓度为70~90%的甲醇进行溶解,配制样品浓度为50.0~100.0 mg/mL,经0.45 μm微孔滤膜过滤,得到黄蘑菇甲醇样品溶液,即滤液B,取1 mL滤液B,利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选黄蘑菇样品中抗氧化的活性成分;/...

【技术特征摘要】
1.黄蘑菇中天然抗氧化的氨基酸衍生物的分离工艺,其特征在于:该工艺具体包括如下步骤:
步骤1,提取:将黄蘑菇鲜样,粗碎后按料液比1g:5~100mL的甲醇提取,在室温下提取2~4次,每次2~4h,过滤、合并滤液,即滤液A,该滤液A经减压干燥至膏状,即得唐黄蘑菇甲醇提取物浸膏;
步骤2,微孔树脂柱富集:在所述黄蘑菇甲醇提取物浸膏中加入其质量5~10倍的体积浓度为70~90%的甲醇进行溶解,配制样品浓度为50.0~100.0mg/mL,经0.45μm微孔滤膜过滤,得到黄蘑菇甲醇样品溶液,即滤液B,取1mL滤液B,利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选黄蘑菇样品中抗氧化的活性成分;
步骤3,亲水制备液相色谱分离:所述滤液B经亲水色谱柱分离,经检测波长为254nm的紫外检测器检测,收集制备色谱图中主要的色谱峰馏分,该色谱峰馏分经减压干燥得到含有目标化合物的组分;
步骤4,亲水制备液相色谱纯化:所述含有目标化合物的组分用体积分数为0~10%的甲醇-水溶液溶解,配制样品浓度为20.0~50.0mg/mL,均经0.45μm微孔滤膜过滤,得到滤液,即滤液C,滤液C经亲水液相制备色谱纯化,经检测波长为254nm的紫外检测器检测,收集滤液C制备色谱图中主要的色谱峰馏分,该色谱峰馏分经减压干燥即得纯度大于95%的抗氧化的L-(+)-ergothioneine。


2.根据权利要求1所述的黄蘑菇中天然抗氧化的氨基酸衍生物的分离工艺,其特征在于:所述步骤2中,在线HPLC-DPPH色谱联用系统,第一台高效液相色谱仪采用两性离子柱ClickXION(250×4.6mm,5μm)亲水色谱柱,检测波长为254nm;第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液,检测波长为517nm。


3.根据权利要求1所述的黄蘑菇中天然抗氧化...

【专利技术属性】
技术研发人员:王启兰党军陶燕铎
申请(专利权)人:中国科学院西北高原生物研究所
类型:发明
国别省市:青海;63

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