用亚硒酸防止细胞培养收获物中的二硫键还原的方法技术

技术编号:24178317 阅读:43 留言:0更新日期:2020-05-16 05:31
本公开内容涉及用于防止重组宿主细胞中表达的多肽中二硫键还原的方法,其包括在发酵后将亚硒酸和/或其盐或衍生物添加到重组宿主细胞的收获物溶液,其中多肽中的二硫键保持非还原的。

Method of preventing disulfide bond reduction in cell culture harvest by selenite

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用亚硒酸防止细胞培养收获物中的二硫键还原的方法专利技术背景生物制药业使用细胞培养产生多种治疗性蛋白质。多种细胞类型(包括原核生物和真核生物两者)可以用于表达重组治疗性蛋白质。生物制药业严重依赖于哺乳动物细胞,这是由于它们具有产生正确折叠且翻译后修饰的蛋白质的能力。制造治疗性蛋白质通常通过在生物反应器中培养细胞开始。监测各种营养物和工艺参数,以确保最佳的细胞生长和蛋白质生产。治疗性蛋白质通常是分泌的,因此收获蛋白质的第一步是除去细胞。在生物反应器中以及细胞除去期间,细胞可能裂解,释放可改变或降解重组蛋白的成分。例如,收获物中的酶和其他成分可以还原二硫键。由于完整的二硫键对于维持蛋白质的结构和功能是至关重要的,因此,防止二硫键还原的方法引起了极大的兴趣。专利技术概述实施方案提供了用于防止重组宿主细胞中表达的多肽中的二硫键还原的方法,该方法包括在发酵后将亚硒酸(selenite)、其盐和/或衍生物添加到重组宿主细胞的收获物溶液,其中所述多肽中的所述二硫键保持非还原的。附图简述本领域技术人员将理解,以下描述的附图是仅用于说本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于防止重组宿主细胞中表达的多肽中二硫键还原的方法,其包括在发酵后将亚硒酸添加到所述重组宿主细胞的收获物溶液,其中所述多肽中的所述二硫键保持非还原的。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171002 US 62/566,8171.用于防止重组宿主细胞中表达的多肽中二硫键还原的方法,其包括在发酵后将亚硒酸添加到所述重组宿主细胞的收获物溶液,其中所述多肽中的所述二硫键保持非还原的。


2.权利要求1的方法,其中所述多肽包括抗体。


3.权利要求1的方法,其中所述多肽包括抗体的生物学功能片段。


4.权利要求1的方法,其中所述宿主细胞包括真核细胞。


5.权利要求4的方法,其中所述真核细胞包括哺乳动物细胞。


6.权利要求5的方法,其中所述哺乳动物细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。


7.权利要求1的方法,其中以0.01-100毫摩尔的范围将亚硒酸添加到所述收获物溶液。


8.权利要求1的方法,其中以0.1-10毫摩尔的范围将亚硒酸添加到所述收获物溶液。


9.权利要求1的方法,其中所述亚硒酸包括选自下组的亚硒...

【专利技术属性】
技术研发人员:K夸恩特
申请(专利权)人:拜耳医药保健有限公司
类型:发明
国别省市:美国;US

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