【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于改进分析物检测的测定方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年8月8日提交的美国申请62/542,612的优先权;该申请的公开内容通过引用并入本文。
本专利技术涉及用于改进分析物检测的测定方法、侧向流测定条带和装置。
技术介绍
免疫测定用于根据产生的抗体试剂的特异性和选择性对生物学上感兴趣的分子进行定量。对于即时检验(point-of-caretesting),免疫测定通常以侧向流测定形式使用。参见,例如,美国专利号7,192,555和美国专利号6,303,081。固相侧向流装置并入了固体支撑条带,固体支撑条带结合分析物-靶标对的成员。常常将多孔材料如尼龙、硝酸纤维素、醋酸纤维素、玻璃纤维、纸和其它多孔聚合物用作固体支撑条带。可能含有目标分析物的样品在整个测定中沿固体支撑物流动。可以利用几种程序,包括使分析物或其衍生物结合到固定的靶标上并且检测分析物或其衍生物的存在,或者分析物或其衍生物可以反应形成产物,然后对产物进行检测。先前的侧向流测定条带已用于通过在测试线上的定向靶分子捕获样品中的分析物来检测各种分析物。例如,在一条HIV-1/2侧向流测定条带中,通过使链霉亲和素(SA)与锚蛋白如牛血清白蛋白(BSA)缀合,并用缀合物在硝酸纤维素的测试线位置划条纹来制备测试线。参见例如,美国专利号8,062,908、美国专利号7,192,555、美国专利号6,303,081、美国专利号7,541,194和OraQuick快速HIV-1/2抗体测试包插页。SA-BSA缀合物允许生物素化肽在测试线上的高 ...
【技术保护点】
1.一种用于检测液体生物样品中的分析物的测定方法,所述测定方法包括:/na)使怀疑含有分析物的所述液体生物样品与液相中至少一种配体-靶标缀合物接触,其中所述配体-靶标缀合物与至少一部分所述分析物结合以形成配体-靶标-分析物复合物;/nb)使所述生物样品中的分析物和来自步骤a)的所述复合物与受体-标记物缀合物接触,以形成分析物-受体-标记物复合物和配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物;/nc)在包含能够结合配体的捕获剂的表面上捕获来自步骤b)的所述标记复合物,其中所述捕获剂的一部分配体结合位点被配体-靶标缀合物占据,以在所述表面上形成配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物;以及/nd)检测在所述表面上捕获的所述配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170808 US 62/542,6121.一种用于检测液体生物样品中的分析物的测定方法,所述测定方法包括:
a)使怀疑含有分析物的所述液体生物样品与液相中至少一种配体-靶标缀合物接触,其中所述配体-靶标缀合物与至少一部分所述分析物结合以形成配体-靶标-分析物复合物;
b)使所述生物样品中的分析物和来自步骤a)的所述复合物与受体-标记物缀合物接触,以形成分析物-受体-标记物复合物和配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物;
c)在包含能够结合配体的捕获剂的表面上捕获来自步骤b)的所述标记复合物,其中所述捕获剂的一部分配体结合位点被配体-靶标缀合物占据,以在所述表面上形成配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物;以及
d)检测在所述表面上捕获的所述配体-靶标-分析物-受体-标记物复合物。
2.根据权利要求1所述的测定方法,其中所述分析物是抗体并且所述靶标是抗原。
3.根据权利要求2所述的测定方法,其中所述分析物是选自抗HIV-1和抗HIV-2的抗HIV抗体,并且所述抗原选自由HIV-1肽、HIV-2肽、rAg及其混合物组成的组。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的测定方法,其中所述配体是生物素。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的测定方法,其中所述液体生物样品选自由口腔液、全血和血浆组成的组。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的测定方法,其中所述受体是蛋白质A。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的测定方法,其中所述标记物是胶体金。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的测定方法,其中所述捕获试剂是链霉亲和素。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的测定方法,其中所述配体-靶标缀合物选自由生物素化HIV-1肽、生物素化HIV-2肽、生物素化rAg肽或其混合物组成的组。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的测定方法,其中所述测定方法在侧向流测定条带上进行,还包括使所述侧向流测定条带与显影剂溶液接触的步骤,其中,在接触之后,所述显影剂溶液移动穿过所述侧向流测定条带。
11.根据权利要求10所述的测定方法,其中将所述液体生物样品添加到所述显影剂溶液中。
12.根据权利要求10所述的测定方法,其中将所述液体生物样品添加到所述侧向流测定条带的样品接收部分。
13.根据权利要求10所述的测定方法,其中将所述靶标-配体缀合物添加到所述显影剂溶液中。
14.根据权利要求10所述的测定方法,其中将所述靶标-配体缀合物从所述样品接收区下游的所述侧向流测定条带的一部分洗脱下来以与所述分析物结合。
15.一种用于从液体生物样品中检测分析物的侧向流测定条带,所述侧向流测定条带包括:
样品接收区;
所述样品接收区下游的阻滞剂区,其任选地含有配体-靶标缀合物;
所述阻滞剂区下游的缀合物区,其含有标记物-受体缀合物;
所述缀合物区下游的测试区段,其包含能够结合配体的固定的捕获剂,其中一部分所述配体结合位点被配体-靶标缀合物占据;
任选地,所述测试区段下游的所述侧向流测定条带上的对照区段,其指示测定完成;和
任选地,吸收垫,其与所述侧向流测定条带流体连通并且位于所述对照区段下游。
16.根据权利要求15所述的侧向流测定条带,其中所述分析物是抗体并且所述靶标是抗原。
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【专利技术属性】
技术研发人员:G·耶尔伍德,M·里德,
申请(专利权)人:奥瑞许科技公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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