用于治疗蟹足肿的药物组合物及其用途制造技术

一种治疗受试者中蟹足肿的方法，包括：将药物组合物施用于受试者中蟹足肿处或有风险形成蟹足肿的区域，其中该组合物包含有效量的透明质酸和有效量的胶原蛋白，每单位体积内透明质酸与胶原蛋白的重量比大于1。

Pharmaceutical composition for the treatment of crab foot swelling and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗蟹足肿的药物组合物及其用途相关申请的交叉引用本申请要求2017年9月1日提交的美国临时申请62/553,267的优先权，其内容在此通过参考本文并入此处。背景蟹足肿(keloid)是一种由皮肤纤维化异常增生引起的疤痕。主要成因是细胞外基质过度堆积，这导致形成大块疤痕。疤痕不仅具有明显的外观，还会引起过度的炎性反应、发痒与疼痛感，甚至导致外围组织功能受损。蟹足肿发生于人体高张力的位置，如前胸、耻骨上区和上臂。疤痕形状多呈螃蟹或哑铃形状。其结构、弹性及强度也与正常组织不同。虽然可通过临床手术将蟹足肿疤痕切除，但患者的复发率仍高于60％。研究显示出除了家族遗传因素外，蟹足肿的致病机制大部分是与蟹足肿纤维母细胞有关。相较于从正常伤口组织分离出来的纤维母细胞，蟹足肿纤维母细胞会过度分泌细胞外基质组分，尤其是胶原蛋白、纤连蛋白、弹性蛋白和蛋白聚糖，以及一些生长因子，包含血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)、血小板来源的生长因子(PDGF)和结缔组织生长因子(CTGF)。蟹足肿患者伤口处的纤维组织的增生使得肉芽组织过大，超出了伤口的原面积，形成了蟹足肿疤痕。此外，蟹足肿纤维母细胞的连接蛋白(connexins)与凋亡基因的表达量低于正常水平，因此细胞凋亡程度相对较低。另外，在蟹足肿的疤痕组织中，胶原蛋白组分和糖胺聚糖(glycosaminoglycan)组分的增加会造成胶原蛋白束增厚并形成漩涡状(whorls)的排列。此外，伤口组织的代谢活性高于正常组织，导致伤口组织处于低氧状态(hypoxia)，故这种高氧消耗和低氧扩张的状态下容易形成蟹足肿。目前，蟹足肿的治疗方法主要靶向蟹足肿疤痕。存在多种治疗方法，包括压力涂敷、局部注射类固醇、激光焕肤、外部施用药物。根据疤痕程度选择治疗方法，因此无法防止蟹足肿再发生而导致高复发率。此外，目前也没有单一治疗方法适用于所有类型的蟹足肿患者，并且有些治疗方法甚至可能引起副作用。因此，重要的是研发出适用于大多数蟹足肿患者、且安全有效、并能降低复发率的药物组合物和治疗方法。
技术实现思路
一方面，本文描述了治疗受试者中蟹足肿的方法。该方法包括：将药物组合物施用于受试者中蟹足肿处或有风险形成蟹足肿的区域，其中所述组合物包含有效量的透明质酸和有效量的胶原蛋白，每单位体积内透明质酸与胶原蛋白的重量比大于1(例如1.5-1000、1.5-3.5、2-5、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4、4.5、5、5.5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、200、300、400、500、600、700、800、900或1000)。在一些实施方案中，有风险形成蟹足肿的区域是经过手术切除了蟹足肿疤痕的区域。在一些实施方案中，药物组合物通过包括以下的步骤制备：将透明质酸、pH值为7±2的0.001M-0.1M磷酸盐缓冲溶液和0.1％-0.9％NaCl溶液混合以形成透明质酸溶液；提供胶原蛋白溶液；将透明质酸溶液和胶原蛋白溶液在低于4℃下混合以得到混合物，使混合物中每单位体积内透明质酸与胶原蛋白的重量比大于1；并将混合物的pH值调节至7±1。透明质酸溶液的pH值可以低于6。在一些实施方案中，胶原蛋白溶液的pH值低于6。在一些实施方案中，药物组合物还包含选自由营养素、生物活性剂、抗微生物剂、细胞、细胞外基质组分和辅料所组成的组的添加剂。在一些实施方案中，透明质酸的分子量为4至5000kDa(例如，4至20、20至100、100至500、500至1000、1000至2000、2000至2500、2500至5000、5、10、50、100、200、300、400、500、750、1000、1500、1800、2000、2500、3000、3500、4000、4500或5000kDa)。在一些实施方案中，透明质酸溶液的浓度可以是3至1000mg/ml(例如3至200mg/ml)。在一些实施方案中，胶原蛋白溶液的浓度可以是0.03至500mg/ml(例如1至100mg/ml)。在一些实施方案中，药物组合物能够降低蟹足肿纤维母细胞中的纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、丝氨酸蛋白酶抑制剂肽酶抑制剂、进化枝B(卵清蛋白)、纤溶酶原激活物抑制剂-2(PAI-2)、1型胶原蛋白、纤连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)或结缔组织生长因子(CTGF)的基因表达。在一些实施方案中，所述生物活性剂选自由上皮生长因子、纤维母细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、血小板来源的生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子、神经生长因子、肝细胞生长因子、集落刺激因子、干细胞因子、角质细胞生长因子、粒细胞集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、胶质细胞源性神经营养因子、睫状神经营养因子、内皮单核细胞激活多肽、上皮中性粒细胞激活肽、红细胞生成素、骨形态发生蛋白、脑源性神经营养因子、BRAK、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子所组成的组。在一些实施方案中，细胞外基质组分选自由胶原蛋白、透明质酸、明胶、纤连蛋白、弹性蛋白、细胞粘合素(tenascin)、层粘连蛋白、玻连蛋白、硫酸乙酰肝素(heparansulfate)、软骨素、硫酸软骨素、角质素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、角叉菜胶、肝素、甲壳素、壳聚糖、海藻酸盐、琼脂糖、琼脂、纤维素、糖原、纤维蛋白，纤维蛋白原、凝血酶、聚麸胺酸和合成聚合物或它们的衍生物所组成的组。在一些实施方案中，抗微生物剂是抗生素、抗微生物蛋白质或抗微生物肽。在一些实施方案中，细胞是干细胞、卫星细胞、前驱细胞或组织细胞。在一些实施方案中，辅料是凡士林、甘油或卵磷脂。在一些实施方案中，营养素是糖类、氨基酸、肽、蛋白质、脂肪酸、脂质、维生素或矿物质。另一方面，本文描述了用于治疗或预防受试者中蟹足肿的药物组合物。该组合物包含有效量的透明质酸和有效量的胶原蛋白，每单位体积内透明质酸与胶原蛋白的重量比大于1。在附图及以下描述中阐述了一个或多个实施方案的细节。根据描述和附图以及权利要求书，实施方案的其它特征、目的和优点将会明显。附图说明图1为显示出在各个药物组合物组中正常纤维母细胞和蟹足肿纤维母细胞的形态的一组图片。图2为显示出在各个药物组合物组中正常纤维母细胞与蟹足肿纤维母细胞的迁移力的柱形图。*P<0.05。图3为显示出在各个药物组合物组中正常纤维母细胞与蟹足肿纤维母细胞的收缩力百分比的柱形图。**P<0.01；*P<0.05。图4A为显示出在各个药物组合物组中正常纤维母细胞和蟹足肿纤维母细胞的纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的基因表达量的柱形图。***P&l本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗受试者中蟹足肿的方法，包括：/n将药物组合物施用于受试者中蟹足肿处或有风险形成蟹足肿的区域；/n其中所述组合物包含有效量的透明质酸和有效量的胶原蛋白，每单位体积内所述透明质酸与所述胶原蛋白的重量比大于1。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170901 US 62/553,2671.一种治疗受试者中蟹足肿的方法，包括：
将药物组合物施用于受试者中蟹足肿处或有风险形成蟹足肿的区域；
其中所述组合物包含有效量的透明质酸和有效量的胶原蛋白，每单位体积内所述透明质酸与所述胶原蛋白的重量比大于1。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述透明质酸与所述胶原蛋白的所述重量比等于或大于2。


3.根据权利要求2所述的方法，其中所述透明质酸与所述胶原蛋白的所述重量比等于或大于3。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过包括以下的步骤制备，
将透明质酸、pH值为7±2的0.001M-0.1M的磷酸盐缓冲溶液和0.1％-0.9％的氯化钠溶液混合以形成透明质酸溶液；
提供胶原蛋白溶液；
在低于4℃下，将所述透明质酸溶液与所述胶原蛋白溶液混合以得到混合物，使所述混合物中每单位体积内所述透明质酸与所述胶原蛋白的所述重量比大于1；和
调节所述混合物的pH值至7±1。


5.根据权利要求4所述的方法，其中所述透明质酸溶液的pH值低于6。


6.根据权利要求4所述的方法，其中所述胶原蛋白溶液的pH值低于6。


7.根据权利要求1所述的方法，其中所述有风险形成蟹足肿的区域是经过手术切除了蟹足肿疤痕的区域。


8.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含添加剂，所述添加剂选自由营养素、生物活性剂、抗微生物剂、细胞、细胞外基质组分和辅料所组成的组。


9.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述透明质酸的分子量为4-5000kDa。


10.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述药物组合物能够降低蟹足肿纤维母细胞中的纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、丝氨酸蛋白酶抑制剂肽酶抑制剂、进化枝B(卵清蛋白)、纤溶酶原激活物抑制剂-2(PAI-2)、1型胶原蛋白、纤连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)或结缔组织生长因子(CTGF)的基因表达量。


11.根据权利要求8所述的方法，其中所述生物活性剂选自由上皮生长因子、纤维母细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、血小板来源的生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子、神经生长因子、肝细胞生长因子、集落刺激因子、干细胞因子、角质细胞生长因子、粒细胞集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、胶质细胞源性神经营养因子、睫状神经营养因子、内皮单核细胞激活多肽、上皮中性粒细胞激活肽、红细胞生成素、骨形态发生蛋白、脑源性神经营养因子、BRAK、转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子所组成的组。


12.根据权利要求8所述的方法，其中所述细胞外基质组分选自由胶原蛋白、透明质酸、明胶、纤连蛋白、弹性蛋白、细胞粘合素、层粘连蛋白、玻连蛋白、硫酸乙酰肝素、软骨素、硫酸软骨素、角质素、硫酸角质素、硫酸皮肤素、角叉菜胶、肝素、甲壳素、壳聚糖、海藻酸盐、琼脂糖、琼脂、纤维素、糖原、纤维蛋白、纤维蛋白原、凝血酶、聚麸胺酸和合成聚合物或它们的衍生物所组成的组。


13.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗微生物剂为抗生素、抗微生物蛋白质或抗微生物肽。


14.根据权利要求8所述的方法，其中所述细胞为干细胞、卫星细胞、前驱细胞或组织细胞。


15.根据权利要求8所述的方法，其中所述辅料为凡士林、甘油或卵磷脂。


16.根据权利要求8所述的方法，其中所述营养素为糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：黃玲惠，
申请(专利权)人：黄玲惠，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71