长链非编码RNA lncMGPF在调控猪肌肉发育功能中的应用制造技术

本发明专利技术属于动物基因工程技术领域，具体涉及长链非编码RNA lncMGPF在调控猪肌肉发育功能中的应用。本发明专利技术构建了长非编码RNA lncMGPF的超表达载体及干涉载体，通过慢病毒感染的方式在细胞水平感染猪骨骼肌卫星细胞并在活体水平感染猪的股二头肌，在多次感染病毒后采集猪的股二头肌，在猪个体上验证lncMGPF对肌肉生长发育的影响，为培育出更高产量的瘦肉猪新品种奠定技术基础。

Application of long-chain non coding RNA lncmgpf in the regulation of muscle development in pigs

【技术实现步骤摘要】
长链非编码RNAlncMGPF在调控猪肌肉发育功能中的应用
本专利技术属于动物基因工程
，具体涉及一个长链非编码RNAlncMGPF序列在促进猪骨骼肌卫星细胞分化及其在提高猪肌肉量的应用。
技术介绍
肌肉的生长发育是一个复杂的长期动态变化的过程，主要分为产前肌肉发育和产后的增长阶段。肌组织主要由肌纤维组成，大量的研究表明，动物的肌纤维数目在出生前已经确定，而肌肉量主要由肌纤维数目与大小决定。所以肌纤维的大小直接决定了肉类的产量，通过调控肌纤维的肥大来提高肉产量，是行之有效的方法和本领域研究的重点。从第一个lncRNAH19被识别以来，越来越多的lncRNA被发现在哺乳动物中，对其功能研究发现LncRNAs参与到多种生物学过程中，例如染色体失活，基因印记，染色体状态和基因组稳定性，干细胞的维持和多能性，细胞命运的决定，肌肉的生长发育癌症的发生和多种疾病控制等。目前在猪基因组中已经通过RNA-seq等技术识别了上万个lncRNAs，但在肌肉中的lncRNA的识别较少。Tang等(2017年)利用RNA-seq技术分析了贵州小型本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一个长链非编码的RNA lncMGPF在促进猪骨骼肌卫星细胞分化中的应用,其特征在于所述的应用包括如下步骤：/n(1)取1日龄仔猪肌肉组织，用胶原酶I消化，利用差速贴壁法纯化分离得到骨骼肌卫星细胞；/n(2)以所得的猪骨骼肌卫星细胞cDNA为模板，利用RACE方法获得lncMGPF的全长，该lncMGPF的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；/n(3)将步骤(2)所述的序列构建到一种慢病毒载体上，针对该序列设计siRNA，分别得到病毒载体LV-lncMGPF和载体LV-si-lncMGPF；/n(4)利用步骤(3)所得的慢病毒载体LV-lncMGPF和LV-si-lncMGPF感染猪骨...

【技术特征摘要】
1.一个长链非编码的RNAlncMGPF在促进猪骨骼肌卫星细胞分化中的应用,其特征在于所述的应用包括如下步骤：
(1)取1日龄仔猪肌肉组织，用胶原酶I消化，利用差速贴壁法纯化分离得到骨骼肌卫星细胞；
(2)以所得的猪骨骼肌卫星细胞cDNA为模板，利用RACE方法获得lncMGPF的全长，该lncMGPF的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示；
(3)将步骤(2)所述的序列构建到一种慢病毒载体上，针对该序列设计siRNA，分别得到病毒载体LV-lncMGPF和载体LV-si-lncMGPF；
(4)利用步骤(3)所得的慢病毒载体LV-lncM...

【专利技术属性】
技术研发人员：左波，吕威，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42