一种促生复合内生菌剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种促生复合内生菌剂，属于微生物技术领域。所述促生复合内生菌剂，包括产气肠杆菌CT‑B09‑2，乙酸钙不动杆菌WYS‑A01‑1、解淀粉芽孢杆菌JL‑B05和解淀粉芽孢杆菌JL‑B06；产气肠杆菌CT‑B09‑2、乙酸钙不动杆菌WYS‑A01‑1、解淀粉芽孢杆菌JL‑B05和解淀粉芽孢杆菌JL‑B06的质量比为（3~5）:（3~6）:（3~6）:（3~8）；促生复合内生菌剂中的总活菌浓度为（5~8）×10

A growth promoting compound endophyte and its application

【技术实现步骤摘要】
一种促生复合内生菌剂及其应用
本专利技术属于微生物
，涉及一种促生复合内生菌剂及其应用。
技术介绍
植物内生细菌是指其生活史的一定阶段或全部阶段均生活在健康植物的各种组织和器官内部,并且与植物建立了和谐联合关系的细菌。内生细菌因能在植物体内长期定殖、传导，且不易受环境条件的影响，对植物生长发育、抵抗疾病以及不良环境具有广泛的生物学作用，是非常难得的天然生物资源。研究表明，含有内生菌的植物宿主一般都具有生长快、抗逆境、抗病害等优势，在农业生产中具有良好的研究和开发潜力。因此，加强植物内生细菌资源的研究，建立各种功能内生细菌的资源库具有重要的意义。毛竹（Phyllostachysedulis）属禾本科刚竹属，毛竹生长快，适应性强，用途多，经济价值大，是我国南方地区重要的森林资源。根据第6次森林资源清查统计，我国的毛竹林面积约为337.2万hm2，约占世界毛竹林总面积的47%。毛竹笋是一种全天然营养食品，竹笋中纤维素含量最高，其在保健上起着重要作用。竹材广泛应用于各行工程领域和人们日常生活的各个方面，毛竹发达的根系和坚固的竹株还起着水土保持的作用。但目前针对毛竹等林木具有较强促生功能的复合内生菌剂尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种促生复合内生菌剂及其应用。所述促生复合内生菌剂的组成菌种具有强解磷解钾固氮作用，能够在植物体内定殖。所述复合内生菌剂能够提高毛竹光合特性，提高毛竹生物酶活性，对调节毛竹生长和发育具有重要促进作用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了一种促生复合内生菌剂，包括产气肠杆菌CT-B09-2，乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06，均为毛竹内生细菌。所述促生复合内生菌剂中产气肠杆菌CT-B09-2、乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06的固体菌粉或发酵液的质量比为（3~5）:（3~6）:（3~6）:（3~8）。上述解淀粉芽孢杆菌JL-B05，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens），已于2019年11月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，保藏编号为：CGMCCNo.18998。上述解淀粉芽孢杆菌JL-B06，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens），已于2019年11月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，保藏编号为：CGMCCNo.18999。所述促生复合内生菌剂中的总活菌浓度为（5~8）×108cfu/ml或（2~3）×109cfu/g。所述促生复合内生菌剂为液体制剂或固体制剂。所述促生复合内生菌剂固体制剂的制备方法为：产气肠杆菌CT-B09-2，乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06的固体菌粉按质量比混合，制成固体混合菌粉；载体与固体混合菌粉以100:2~5的质量比混合后获得促生复合内生菌剂固体制剂，所述载体为麸皮。所述促生复合内生菌剂液体制剂的制备方法为：产气肠杆菌CT-B09-2，乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06的发酵液按照质量比为（3~5）:（3~6）:（3~6）:（3~8）的比例混合获得。本专利技术提供了所述的促生复合内生菌剂在促进毛竹生长中的应用。本专利技术的有益效果：本专利技术的促生复合内生菌剂的组成菌种具有强解磷解钾固氮作用，能够在植物体内定殖。所述促生复合内生菌剂能够提高毛竹光合特性，提高毛竹生物酶活性，对调节毛竹生长和发育具有重要促进作用。将促生复合内生菌剂通过灌根接种毛竹幼苗，能够明显提高叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)，降低叶片胞间CO2浓度(Ci)，与对照相比，差异达显著水平。通过竹腔注射接种到II度毛竹，能够提高毛竹叶片叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量，与对照相比，差异达显著水平；能够提高毛竹地上部分生物量。因此，本专利技术提供了一种对毛竹具有强促生功能的复合内生菌剂。附图说明图1促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片SPAD值的变化。图2促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片MDA含量的变化。图3促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片POD活性的变化。图4促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片SOD活性的变化。图5促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片可溶性蛋白含量的变化。图6促生复合内生菌剂处理后毛竹叶片可溶性糖含量的变化。具体实施方式下面结合实例对本专利技术进一步说明。菌种材料：（1）产气肠杆菌CT-B09-2，其分类命名为产气肠杆菌（Enterobacteraerogenes）CT-B09-2，已于2017年7月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.14377，保藏地址：中国北京，已公开。产气肠杆菌CT-B09-2是从毛竹中分离纯化后得到的具有解磷解钾固氮作用的内生细菌。（2）乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1，其分类命名为乙酸钙不动杆菌（Acinetobactercalcoaceticus）WYS-A01-1，已于2017年7月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo.14378。保藏地址：中国北京，已公开。乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1是从毛竹中分离纯化后得到的具有解磷解钾固氮作用的内生细菌。（3）解淀粉芽孢杆菌JL-B05，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens），已于2019年11月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国北京，保藏编号为：CGMCCNo.18998。在本专利技术中，所述解淀粉芽孢杆菌JL-B05是从毛竹中分离纯化后得到的内生细菌，所述解淀粉芽孢杆菌JL-B05的菌落特征及菌体形态为：在NA平板培养基上培养24h后形成菌落颜色为白色，无光泽，菌落呈圆形、边缘不整齐，菌落4-5mm；菌体杆状，革兰氏染色阳性，有芽孢，无荚膜。所述解淀粉芽孢杆菌JL-B05的生理生化特征：接触酶反应呈阳性，V．P测定呈阳性，甲基红测定呈阴性，葡萄糖产酸试验阴性，葡萄糖产气试验阴性，柠檬酸盐试验阴性，硝酸盐还原反应呈阳性，淀粉水解呈阴性，需氧性测定呈阳性，吲哚试验呈阴性，丙二酸呈阴性，产H2S试验呈阳性。所述解淀粉芽孢杆菌JL-B05的16SrDNA序列与GenBank数据库中的序列比对，结果表明：JL-B05与Bacillusamyloliquefaciens同处于一个分支上，其16SrDNA序列与Bacillusamyloliquefaciens（KM117160）的相似度达100%。结合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促生复合内生菌剂，其特征在于：所述促生复合内生菌剂包括产气肠杆菌CT-B09-2，乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06。/n

【技术特征摘要】
1.一种促生复合内生菌剂，其特征在于：所述促生复合内生菌剂包括产气肠杆菌CT-B09-2，乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06。


2.根据权利要求1所述的一种促生复合内生菌剂，其特征在于：产气肠杆菌CT-B09-2、乙酸钙不动杆菌WYS-A01-1、解淀粉芽孢杆菌JL-B05和解淀粉芽孢杆菌JL-B06的固体菌粉或发酵液的质量比为（3~5）:（3~6）:（3~6）:（3~8）。


3.根据权利要求1所述的一种促生复合内生菌剂，其特征在于：所述促生复合内生菌剂中的总活菌浓度为（5~8）×108cfu/ml或（2~3）×109cfu/g。


4.根据权利要求1所述的一种促生复合内生菌剂，其特征在于：所述促生复合内生菌剂为液体制剂或固体制剂。

【专利技术属性】
技术研发人员：袁宗胜，刘芳，张国防，黄秋良，
申请(专利权)人：闽江学院，
类型：发明
国别省市：福建;35