一种采用ND-EESI-MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法技术

本发明专利技术属于检测领域，具体涉及一种采用ND‑EESI‑MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法。以哥伦比亚生态型拟南芥为研究对象，分别对其施加50、100、200和300 mM NaCl溶液，盐胁迫处理1、4、7 d，比较不同盐胁迫条件下拟南芥的生长状况。在正离子模式下采用ND‑EESI‑MS技术，对盐胁迫下拟南芥叶进行原位活体无损分析，快速获取盐胁迫下叶中组份的变化信息，为植物应答非生物胁迫研究提供理论和技术支撑。

A method for the detection of Arabidopsis metabolites under salt stress by ND-EESI-MS

【技术实现步骤摘要】
一种采用ND-EESI-MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法
本专利技术属于检测领域，具体涉及一种采用ND-EESI-MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法。
技术介绍
植物应答盐胁迫代谢组学研究，是解析植物对盐胁迫耐受性和敏感性复杂生命过程的关键。为了深入全面地认识盐胁迫对植物的影响以及植物的抗逆性，需要发展实时、高效的分析植物代谢组份的检测技术。已有的代谢组学分析手段如GC-MS需要对样品进行提取、分离或衍生化等预处理，且更偏向于检测植物挥发性代谢产物；HPLC-MS需要样品预处理，仪器操作条件需要反复优化，需依赖纯的标准物对物质定性定量分析。因此，建立一种快速准确、不需要样品预处理，且能实时在线监测植物随环境变化而变化的代谢过程的研究方法，对掌握植物代谢产物的种类和数量具有积极意义。这样不仅能对代谢物进行全方面的分析，更有助于了解生物的代谢途径、生物体中各种复杂的相互作用及生物系统对环境和基因变化的响应。直接质谱技术指无需进行样品预处理，可直接对复杂样品进行快速分析的质谱技术，在代谢组学研究中应用越来越广泛。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种采用ND-EESI-MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法，其特征在于,包括以下步骤：/n(1)种子前处理：将种子置于1.5mL离心管中浸水处理，置于4℃低温下处理3d，然后将已春化的种子用牙签蘸取置于培养基质表面，用保鲜膜封盖，保鲜膜表面戳5-15个小洞，覆膜4d，放入光照培养室内，垂直培养，其培养条件为温度为22℃，相对湿度为60％，光照条件为16h光照培养，8h黑暗培养，光照强度为120μml.m

【技术特征摘要】
1.一种采用ND-EESI-MS方法检测盐胁迫下拟南芥代谢产物的方法，其特征在于,包括以下步骤：
(1)种子前处理：将种子置于1.5mL离心管中浸水处理，置于4℃低温下处理3d，然后将已春化的种子用牙签蘸取置于培养基质表面，用保鲜膜封盖，保鲜膜表面戳5-15个小洞，覆膜4d，放入光照培养室内，垂直培养，其培养条件为温度为22℃，相对湿度为60％，光照条件为16h光照培养，8h黑暗培养，光照强度为120μml.m-2s-1；
(2)盐胁迫处理：分别用50、100、200和300mM浓度的NaCl溶液替代蒸馏水浇灌拟南芥植株，浇灌15mL至浇透，用NaCl分别处理1、4、7d，每个处理设三个重复，以浇蒸馏水的植株作为实验对照组；
(3)植物样品采集：拟南芥培养至28d时，莲座叶用于直接质谱分析；
(4)ND-EESI-MS分析：选取拟南芥植株上大小均一的莲座叶叶片，将加工的采样装置置于叶片表面，由阀门控制的氮气直接用作解吸气，原位分析拟南芥叶子样品表面组分，分析物在EESI环境中进行离子化，出样品口和电喷雾束形成一个60°的角度β，样品出口和电喷雾口之间的距离为2mm，电喷雾和LTQ仪器离子传输管之间角度α和样品出口和LTQ仪器离子传输管之间角度γ都为150°，整个EES...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗丽萍，吴栋，郝影宾，崔萌，黄学勇，薛阿辉，宁方建，罗火林，郭夏丽，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西;36