嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA的应用制造技术

嵌合苯丙氨酰‑tRNA合成酶/tRNA的应用，属于化学生物技术领域。本发明专利技术提出利用嵌合苯丙氨酰‑tRNA合成酶/tRNA在哺乳动物细胞和大肠杆菌中高效的实现色氨酸/酪氨酸类似物在蛋白质特定位点的插入，通过这个系统筛选到了一系列色氨酸的衍生物和络氨酸类似物。

Application of chimeric phenylalanyl tRNA synthetase / tRNA

【技术实现步骤摘要】
嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA的应用
本专利技术属于化学生物学
，具体涉及嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA的应用。
技术介绍
遗传密码扩展技术(geneticcodeexpansion，简称GCE)拓展了合成蛋白质的砖瓦，在蛋白质上特异的引入具备新颖结构和独特性质的非天然氨基酸，从而为精准的蛋白质操控、蛋白质功能的鉴定和优化提供了强有力的工具。遗传密码扩展技术的核心是正交化的氨酰-tRNA合成酶/tRNA系统，要求不与细胞内源的氨酰-tRNA合成酶和tRNA相互识别，不影响细胞内正常的生理活动。现今，常用的氨酰-tRNA和tRNA的正交对主要有4种，但是只有来源于甲烷古菌Methanosarcinamazei或Methanosarcinabarkeri的pyrrolysyl—tRNA合成酶(PylRS)/tRNACUA正交对可以普适的应用在细菌、真核细胞和个体中。我们前期利用蛋白质嵌合的技术将pyrrolysyl—tRNA合成酶(PylRS)/tRNACUA正交对普适正交的特性移植到了人线粒体苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA在哺乳动物细胞和大肠杆菌中实现色氨酸/酪氨酸类似物在蛋白质特定位点插入的应用，所述的嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶的基因序列如SEQID NO.4所示。/n

【技术特征摘要】
1.嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA在哺乳动物细胞和大肠杆菌中实现色氨酸/酪氨酸类似物在蛋白质特定位点插入的应用，所述的嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶的基因序列如SEQIDNO.4所示。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于具体为嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA定点突变苯丙氨酰-tRNA合成酶的T456G和A507G使得苯丙氨酰-tRNA合成酶识别4-叠氮-苯丙氨酸，2-萘-丙氨酸和3-氰基-苯丙氨酸，并在蛋白质特定位点插入4-叠氮-苯丙氨酸，2-萘-丙氨酸和3-氰基-苯丙氨酸；嵌合苯丙氨酰-tRNA合成酶/tRNA定点突变苯丙氨酰-tRNA合成酶的T456G、A507G和E391D使得苯丙氨酰-...

【专利技术属性】
技术研发人员：林世贤，赵红霞，丁文龙，柳光龙，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33