一种乳糖的高灵敏度检测方法技术

本发明专利技术公开了一种乳糖的高灵敏度检测方法。本发明专利技术利用温和环保的方式制备AuNCs/β‑GAL/GOx@ZIF‑8复合物；所述AuNCs/β‑GAL/GOx@ZIF‑8与AuNCs、GOX及β‑GAL溶液的均匀混合物相比较，荧光消减速率提高了3.4倍，且具有较高的长期贮存稳定性和抗消化酶及螯合物的稳定性，酶可以反复使用，检测条件温和，检测方法成本低，操作简便、灵敏性高、靶向性强，可以实现对乳糖的高灵敏度检测。

A high sensitive method for lactose detection

【技术实现步骤摘要】
一种乳糖的高灵敏度检测方法
本专利技术涉及糖类分析检测
，具体涉及一种乳糖的高灵敏度检测方法。
技术介绍
乳糖作为乳制品中主要组成成分，其含量的测定在乳制品等食品加工与质量控制领域非常重要。由于成年期乳糖酶缺乏所致的乳糖不耐症患者约占世界人口的65％。乳糖不耐症患者如果食用或饮用了含有乳糖的食品及乳制品后可能引起肠胃气胀、胃痛和腹泻等症状，影响身体健康。为了满足乳糖不耐受人群对钙和优质蛋白质的营养需求，系列无乳糖动物乳替代品及食品不断被开发，为确保无乳糖产品的安全性及乳糖不耐症患者的健康饮食，对食品及饮品中乳糖的测定有着迫切的需求，开发操作简便，高灵敏度的乳糖检测技术已成该领域的关注重点。目前检测乳糖的方法主要有气相色谱法、超高效液相色谱-串联质谱法和核磁共振法等。然而，这些方法大多需要昂贵的设备和复杂的取样过程。荧光检测方法具有操作简便、快速、灵敏度高、选择性好、成本低等优点，具有较高的实用性和推广价值。然而，荧光检测的原理主要是基于酶的催化反应，所需葡萄糖氧化酶(GOX)，β-半乳糖苷酶及过氧化物酶存活的条件较为苛刻，需要低温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，所述AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物由如下方法制备而成：/n将锕化锌溶液、葡萄糖氧化酶溶液、β-半乳糖苷酶溶液、金纳米簇溶液和2-甲基咪唑溶液按体积比为1：(0.9-1.1)：(1.4-1.6)：(0.7-0.9)：1混合，搅拌1-3min，然后静置8-12h；离心洗涤，制备得到AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物。/n

【技术特征摘要】
1.一种AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，所述AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物由如下方法制备而成：
将锕化锌溶液、葡萄糖氧化酶溶液、β-半乳糖苷酶溶液、金纳米簇溶液和2-甲基咪唑溶液按体积比为1：(0.9-1.1)：(1.4-1.6)：(0.7-0.9)：1混合，搅拌1-3min，然后静置8-12h；离心洗涤，制备得到AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物。


2.根据权利要求1所述的AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，所述锕化锌溶液的浓度为150-170mmol/L；所述葡萄糖氧化酶溶液的浓度为0.4-0.6mg/mL；所述β-半乳糖苷酶溶液的浓度为0.3-0.5mg/mL；所述金纳米簇溶液的浓度为0.6-0.9mg/mL；所述2-甲基咪唑溶液的浓度为0.13-0.17mol/L。


3.根据权利要求1所述的AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，所述金纳米簇溶液由如下方法制备而成：
(1)将HAuCl4水溶液加入到剧烈搅拌状态下的BSA溶液中，持续搅拌3-8min；
(2)向步骤(1)获得的溶液中加入NaOH溶液，持续剧烈搅拌20-28h；
(3)将步骤(2)获得的溶液在超纯水中透析40-50h，制备得到金纳米簇溶液。


4.根据权利要求3所述的AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，所述HAuCl4水溶液的浓度为8-12mmol/L；BSA溶液的浓度为40-60mg/mL；NaOH溶液的浓度为0.5-1.5mol/L。


5.根据权利要求4所述的AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物，其特征在于，HAuCl4水溶液、BSA溶液和NaOH溶液加入的体积比为(4-6)：(4-6)：(0.4-0.6)。


6.权利要求1-5任一项所述的AuNCs/β-GAL/GOx@ZIF-8复合物在如下1)或2)中的用途：
1)...

【专利技术属性】
技术研发人员：李向阳，李宗益，郭曼莉，迟静甜，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：山东;37