生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用，属于肥胖男性生育力受损疾病领域。本发明专利技术的生物活性多肽PACAP类药物可以显著预防及缓解肥胖诱发的男性生育力损伤(主要通过改善血脂和性激素水平，降低睾丸组织氧化应激水平，改善肥胖诱发的睾丸生精细胞损伤，抑制高脂诱导的精原细胞GC‑1凋亡，改善精子功能以及体外受精后早期胚胎质量等功能)，修复肥胖男性生育力损伤的病理改变及生殖系统功能，能够初步理解肥胖与男性不育的关系，阐明PACAP对肥胖诱发的男性生殖损伤的保护作用，为临床上肥胖男性不育的诊治提供理论基础和实验依据以及新型靶向治疗策略。

Application of bioactive polypeptide PACAP in the preparation of fertility enhancing drugs for obese men

【技术实现步骤摘要】
生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用
本专利技术属于肥胖男性生育力受损疾病领域，特别涉及一种生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用；尤其涉及一种生物活性多肽PACAP在制备肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。
技术介绍
肥胖是遗传、生活方式和环境等多种因素相互作用引起的慢性代谢性疾病，以脂肪组织积聚和系统炎症为特点。肥胖与2型糖尿病、代谢综合征、高血压病、心脑血管疾病以及多种癌症的发生发展密切相关。除心血管疾病等并发症外，肥胖或超重的人群表现出不孕不育的发生率正在上升，然而，肥胖与男性不育之间的关系知之甚少且越来越受到重视。有研究显示有一些表现为父系肥胖可能会对基本精子参数产生负面的影响，比如精子的数量、运动能力以及正常形态等。脂肪在睾丸和附睾中的过度积累会直接导致睾丸和附睾的结构异常，还可释放活性氧(ROS)和氧化自由基以及炎症因子等，影响到睾丸组织的内分泌功能，对细胞增生及精子的发生过程都有着不同程度的影响。越来越多的研究表明，肥胖对男性的生殖系统有明显的负面效应。今天，肥胖已经作为一种流行病日益受到各个医学领域的关注。在生殖领域，对男性生殖能力的影响，也得到了很多重视。尽管越来越多的证据表明肥胖是男性不育的重要原因，但目前的研究大多聚焦于肥胖对精子浓度、活动力、形态和血清性激素等表面现象的影响，肥胖是否促进睾丸生精细胞的凋亡以及确切的作用机制仍然不清楚。通过简单的减肥和锻炼也不足以克服肥胖，所以亟需探究肥胖男性不育的分子机制以找到关键的干预靶点，寻求预防和治疗肥胖男性不育的有效方法。
技术实现思路
为了克服现有技术的缺点与不足，本专利技术的目的在于提供一种生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用。本专利技术的另一目的在于提供一种生物活性多肽PACAP在制备肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。生物活性多肽PACAP可以显著预防及缓解肥胖诱发的男性生育力损伤，修复肥胖男性生育力损伤的病理改变及生殖系统功能。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：本专利技术提供了一种生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用。进一步的，所述的生物活性多肽PACAP在制备提高高脂或营养性肥胖男性生育力的药物中的应用。本专利技术提供了一种生物活性多肽PACAP在制备肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。进一步的，所述的生物活性多肽PACAP在制备高脂或营养性肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。进一步的，所述的生物活性多肽PACAP在制备改善血脂和性激素水平，降低睾丸组织氧化应激水平，改善肥胖诱发的睾丸生精细胞损伤，抑制高脂诱导的精原细胞GC-1凋亡，改善精子功能以及体外受精后早期胚胎质量等功能的药物中的应用。进一步的，所述的生物活性多肽PACAP包括PACAP38、PACAP38的衍生物、PACAP27和PACAP27的衍生物中的至少一种；其中，生物活性多肽PACAP可以是野生型人PACAP，化学合成的PACAP等，但不限于此。进一步的，所述药物与一种或多种其他预防/治疗剂组合得到药物组合物。进一步的，所述肥胖男性生育力损伤性疾病包括由一种因素或多种因素引起的高脂饮食刺激损伤或营养性肥胖引诱损伤。进一步的，所述的生物活性多肽PACAP的有效剂量为0.4mg/kg小鼠/d。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：本专利技术的生物活性多肽PACAP类药物可以显著预防及缓解肥胖诱发的男性生育力损伤(主要通过改善血脂和性激素水平，降低睾丸组织氧化应激水平，改善肥胖诱发的睾丸生精细胞损伤，抑制高脂诱导的精原细胞GC-1凋亡，改善精子功能以及体外受精后早期胚胎质量等功能)，修复肥胖男性生育力损伤的病理改变及生殖系统功能，能够初步理解肥胖与男性不育的关系，阐明PACAP对肥胖诱发的男性生殖损伤的保护作用，为临床上肥胖男性不育的诊治提供理论基础和实验依据以及新型靶向治疗策略。附图说明图1是PACAP对肥胖小鼠体重以及血脂和性激素水平的影响；其中，A：PACAP对肥胖小鼠体重的影响；B：PACAP对肥胖小鼠摄食量的影响；C：PACAP对肥胖小鼠附睾脂肪重量的影响；D：PACAP对肥胖小鼠睾丸指数的影响；E：PACAP对肥胖小鼠血脂的影响；F：PACAP对肥胖小鼠性激素水平的影响。图2是PACAP对肥胖小鼠睾丸组织结构的病理改变。图3是PACAP对肥胖小鼠睾丸内Sirt1/Ac-p53通路以及凋亡相关蛋白表达的影响。图4是PACAP对肥胖小鼠睾丸内转染Sirt1shRNA慢病毒后精子顶体反应的影响。图5是PACAP对GC-1细胞高脂损伤转染Sirt1shRNA慢病毒后细胞凋亡的影响。图6是PACAP对GC-1细胞高脂损伤转染Sirt1shRNA慢病毒后Sirt1/p53通路以及凋亡相关蛋白表达的影响。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为从商业途径得到的试剂和材料。所述的PACAP38(≥95.95％(HPLC),CatNo:122105)购自吉尔生化(上海)有限公司。实施例1一、选用PACAP38类药物进行实验验证(后续统一写成PACAP)：细胞及动物：应用选择了GC-1小鼠睾丸精原细胞系(细胞来源：ATCCCRL-2053；细胞特点：正常小鼠睾丸分离的精原细胞，可增值传代培养)进行细胞实验研究，选择C57/BL6J小鼠(购自广东省医学实验动物中心，SPF级)进行动物实验研究。(1)高脂饮食喂养构建肥胖小鼠模型：给小鼠随机分组并分别喂食标准食物(对照：Controldiet，CD)和高脂饮食(Highfatdiet，HFD)8周，每周监测体重和食物摄入量的变化。当HFD组小鼠体重超过CD组体重20％时，判定为肥胖小鼠造模成功。随后，连续四周每天给小鼠腹腔注射不同浓度的PACAP(0.1mg/kg，0.2mg/kg，0.4mg/kg)或无菌生理盐水(对照组)，同样每周监测小鼠体重和摄食量的变化。保留一部分小鼠以注射Sirt1shRNA慢病毒和对照慢病毒(controlshRNA，简称ctrlshRNA)(Sirt1shRNA慢病毒、对照慢病毒均购自美国CyagenBiosciences)，每只小鼠注射10μL慢病毒悬液(108transducingunits/mL)，转染7天。实验结束后对小鼠进行安乐死。使用全自动生化检测仪测定血脂四项(甘油三酯：TG、总胆固醇：TC、低密度脂蛋白胆固醇：LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇：HDL-C)和血清性激素水平(睾酮：T、雌二醇：E2、卵泡刺激素：FSH、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.生物活性多肽PACAP在制备提高肥胖男性生育力的药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
所述的生物活性多肽PACAP在制备提高高脂或营养性肥胖男性生育力的药物中的应用。


3.生物活性多肽PACAP在制备肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：
所述的生物活性多肽PACAP在制备高脂或营养性肥胖男性生育力损伤性疾病的预防、治疗或修复药物中的应用。


5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：
所述肥胖男性生育力损伤性疾病包括由一种因素或多种因...

【专利技术属性】
技术研发人员：马义，洪岸，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44