一种抗TMV药剂的筛选方法技术

本公开提供了一种抗TMV药剂的筛选方法，所述筛选方法的步骤为：1)选取5‑6叶期的心叶烟幼苗，在筛选前一天去除顶芽，选取同一位置叶片为接种叶；2)取浓度为3ng/μL的TMV病毒溶液到接种叶的左右半叶面上涂抹进行摩擦接种；3)完成接种后静置，然后对接种叶面进行清洗；4)待接种叶片干后，采用半叶枯斑法在接种叶的一侧表面均匀涂抹上待测抗TMV药剂，另一侧添加相同体积的灭菌水作为对照；5)将处理好的心叶烟进行培养，48h后对接种叶进行观察，记录左右两侧半叶上的枯斑数目，计算枯斑抑制率，对比分析待测抗TMV药剂对TMV的抑制效果。所述方法能够提高筛选抗TMV药剂结果的稳定性及准确性。

A screening method of anti TMV agents

【技术实现步骤摘要】
一种抗TMV药剂的筛选方法
本公开涉及病毒抑制剂筛选
，具体涉及一种抗TMV药剂的筛选方法。
技术介绍
烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)，为单链RNA植物病毒，是目前世界上危害最严重的10种植物病毒之一，该病毒能够感染包括十字花科、茄科、豆科、苋科等36科350多种植物，导致严重的植物病害。心叶烟是TMV的抗病品种，受到TMV侵染后会在48h内产生枯斑。枯斑的大小和数量可以说明病毒浓度、侵染力的强弱。药剂对病毒的抑制作用越强，产生的枯斑数量就越少，因此可根据枯斑的数量判断药剂的抗病毒活性。针对TMV在农业生产中造成的严重危害，建立以心叶烟为主体的筛选体系，从植物提取物或微生物代谢物中初步筛选出具有抗TMV活性的药剂。目前生产上抗TMV病毒的单剂品种十分有限，而且许多单剂并不具有抗TMV病毒的作用，因此筛选有效的抗TMV病毒单剂在实践和理论研究上都十分有意义，即便是筛选出单剂的作用效果低于商品药剂，也仍然可能具有复配价值。但是目前筛选抗TMV药剂的方法具有很多的问题，例如：在接种TMV病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗TMV药剂的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法的具体操作步骤为：/n(1)选取5-6叶期的心叶烟幼苗，在筛选前一天去除顶芽，选取同一位置的叶片作为接种叶；/n(2)在接种叶的表面上均匀的喷洒一层金刚砂，然后取浓度为3ng/μL的TMV病毒溶液接种叶的左右半叶面上涂抹均匀，进行摩擦接种；/n(3)完成接种后静置，然后对接种叶面进行清洗；/n(4)待清洗后的接种叶片干后，采用半叶枯斑法在接种叶的一侧表面均匀涂抹上待测抗TMV药剂，另一侧添加相同体积的灭菌水作为对照；/n(5)将处理好的心叶烟进行培养，48h后对接种叶进行观察，记录左右两侧半叶上的枯斑数目，计算枯斑抑制率，对比分析待测抗T...

【技术特征摘要】
1.一种抗TMV药剂的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法的具体操作步骤为：
(1)选取5-6叶期的心叶烟幼苗，在筛选前一天去除顶芽，选取同一位置的叶片作为接种叶；
(2)在接种叶的表面上均匀的喷洒一层金刚砂，然后取浓度为3ng/μL的TMV病毒溶液接种叶的左右半叶面上涂抹均匀，进行摩擦接种；
(3)完成接种后静置，然后对接种叶面进行清洗；
(4)待清洗后的接种叶片干后，采用半叶枯斑法在接种叶的一侧表面均匀涂抹上待测抗TMV药剂，另一侧添加相同体积的灭菌水作为对照；
(5)将处理好的心叶烟进行培养，48h后对接种叶进行观察，记录左右两侧半叶上的枯斑数目，计算枯斑抑制率，对比分析待测抗TMV药剂对TMV的抑制效果，枯斑抑制率的公式为：



其中Y代表待测抗TMV药剂对心叶烟产生枯斑的抑制率，C为对照枯斑总数，A为接种叶片涂抹待测抗TMV药剂一侧的枯斑总数。


...

【专利技术属性】
技术研发人员：马思思，周翠姬，刘雨帆，陈文胜，何丽烂，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：广东;44