用于治疗神经性疼痛的方法和组合物技术

本发明专利技术提供了一种通过软膜下施用少量组合物来治疗神经性疼痛的疗法，所述组合物用于使GAD65(谷氨酸脱羧酶)基因和VGAT(囊泡GABA转运蛋白)基因的脊髓节段上调，从而通过增强囊泡GABA从被感染的背角神经元释放至突触间隙来有效地引起伤害感受效应。

Methods and compositions for the treatment of neuropathic pain

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗神经性疼痛的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2017年9月8日提交的美国序列号62/556,088的优先权的权益，其全部内容通过引用被并入到本文中。序列表本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用而整体并入到本文。于2018年9月6日创建的ASCII副本命名为20378-201844_SL.txt，大小为22KB。
本专利技术总体上涉及治疗神经性疼痛，并且更具体地涉及包括在脊髓软膜下递送一种或多种基因以治疗慢性神经性疼痛的联合治疗方案。
技术介绍
神经性疼痛是由多种类型的神经损伤引起的疼痛。神经性疼痛病症的一些实例包括但不限于糖尿病周围神经病变、带状疱疹、疱疹后神经痛、三叉神经痛、复杂的区域性疼痛综合征、反射性交感神经营养不良、偏头痛、幻肢综合症、慢性疾病(多发性硬化症、HIV等)引起的神经性疼痛、外伤引起的神经性疼痛(灼性神经痛)、撞击引起的神经性疼痛(即坐骨神经痛、腕管神经痛等)、药物或有毒化学物质暴露引起的神经性疼痛、感染或感染后引起的神经性疼痛、器官功能受损引起的神经性疼痛、血管疾病引起的神经性疼痛、代谢性疾病引起的神经性疼痛、癌症或癌症治疗引起的神经性疼痛、自身免疫性疾病引起的神经性疼痛、神经性腰背痛、纤维肌痛引起的神经性疼痛，以及不明原因的神经性疼痛(特发性)。实际上，神经性疼痛通常基于症状来诊断，因此以灼热感和/或射痛和/或麻木感和/或刺痛和/或异常性疼痛为特征的任何疼痛通常被认为是神经性的。神经性疼痛的其他特征包括多发性神经病(对刺激的过度夸大疼痛感)、感觉过敏(对正常刺激的敏感性增加)、感觉迟钝(不悦异常感，当不是正在受到损伤时感受到好像正在受到损伤)和感觉异常(异常感觉，诸如“针刺感”，无论是自发的还是诱发的)。众所周知，伤害性疼痛和神经性疼痛是由不同的机制引起的，因此它们对不同的治疗方式有不同的响应。伤害性疼痛由位于皮肤、骨骼、结缔组织、肌肉和内脏的受体介导。这些受体通常对有害的化学刺激、热刺激和机械刺激产生响应，从而导致通常被描述为锐痛、酸痛、抽痛或持续性剧痛(gnawing)的疼痛。相反，神经性疼痛是由于周围或中枢神经系统的损伤或病理变化而产生的，通常产生会自然地被描述为“灼痛”、“电击痛”、“刺痛”和“射痛”的疼痛。最后，伤害性疼痛通常对阿片类药物和非甾体类抗炎药(NSAIDS)有响应，而采用这些方法治疗神经性疼痛的成功受到限制。目前，鞘内注入的抗伤害感受性化合物(如加巴喷丁和阿片类药物)用于实现脊髓限制的抗伤害感受性效果。然而，没有可用于治疗慢性神经性疼痛的基于基因治疗的技术。类似地，目前也没有可以有效地用于抑制特定脊髓节段中的为周围神经损伤部位同侧的伤害性传递基于基因治疗的技术。此外，当前可用的脊髓药物递送系统(诸如硬膜外递送或鞘内递送)不允许限制脊髓节段的治疗效果。因此，需要对神经性疼痛这种改进的治疗。
技术实现思路
本专利技术基于以下观察结果：由GAD65(谷氨酸脱羧酶)和VGAT(囊泡GABA转运蛋白)的脊髓节段特异性上调组成的联合治疗通过增强囊泡GABA从被感染的背角神经元释放到突触间隙而有效地引起伤害感受效应。因此，本专利技术提供了一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法。该方法包括软膜下施用包括以下的组合物：(i)在组织特异性启动子的控制下的病毒载体序列、GAD65基因序列(例如，SEQIDNO：2或5)和VGAT基因序列(例如，SEQIDNO：4或6)，(ii)药学上可接受的病毒载体，从而治疗受试者的神经性疼痛。在各种实施方式中，受试者可以是哺乳动物。在各种实施方式中，核酸构建体包封在AAV血清型9衣壳中。在各种实施方式中，组合物中核酸构建体的浓度为约0.1×1013gc/ml至2.0×1013gc/ml。在各种实施方式中，药学上可接受的病毒载体选自由慢病毒载体、腺病毒载体(AV)或腺相关载体(AAV)组成的组。在各种实施方式中，AAV选自由AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh8、AAVrh10、AAVrh33、AAVrh34和AAVAnc80组成的组。在各种实施方式中，组织特异性启动子选自由人泛素启动子和人突触蛋白启动子组成的组。在另一方面，本专利技术提供了一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法。该方法包括软膜下施用包括治疗有效量的基因治疗构建体和药学上可接受的载体的组合物，从而治疗受试者的神经性疼痛，所述基因治疗构建体包含在组织特异性启动子的控制下的(i)病毒载体序列、(ii)GAD65基因序列和(iii)VGAT基因序列。在各种实施方式中，核酸构建体包封在AAV血清型9衣壳内。在各种实施方式中，组合物中核酸构建体的浓度为约0.1×1013gc/ml至2.0×1013gc/ml。在各种实施方式中，药学上可接受的病毒载体选自由慢病毒载体、腺病毒载体(AV)或腺相关载体(AAV)组成的组。在各种实施方式中，AAV选自由AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh8、AAVrh10、AAVrh33、AAVrh34和AAVAnc80组成的组。在各种实施方式中，组织特异性启动子选自由人泛素启动子和人突触蛋白启动子组成的组。在另一方面，本专利技术提供了一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法。该方法包括软膜下施用编码GAD65(谷氨酸脱羧酶)基因的第一载体和编码VGAT(囊泡GABA转运蛋白)基因的第二载体，从而治疗受试者的神经性疼痛。施用第一载体和第二载体引起受试者中GAD65基因和VGAT基因的脊髓特异性上调。在各种实施方式中，第一病毒载体包括编码GAD65的多核苷酸，并且第二病毒载体包编码VGAT的多核苷酸，其中GAD65和VGAT在受试者中表达，从而治疗受试者的神经性疼痛。第一载体和第二载体可为慢病毒载体、腺病毒载体或腺相关载体(AAV)。AAV可以是AAV9型(AAV9)或AAVAnc80。在各种实施方式中，第一载体是AAV9-UBI-GAD65，并且第二载体是AAV9-UBI-VGAT。在另一方面，本专利技术提供了一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法。该方法包括向有需要的受试者软膜下施用治疗有效量的包含编码GAD65的多核苷酸的病毒载体，并向该受试者全身施用GABA激动剂，从而治疗该受试者的痉挛。该载体可以是慢病毒载体、腺病毒载体或腺相关载体(AAV)，并且可以被直接施用到受试者的脊髓。AAV可以是AAV9型(AAV9)或AAVAnc80。在各种实施方式中，载体是AAV9-UBI-GAD65。在另一方面，本专利技术提供了一种核酸构建体，该核酸构建体包括：在组织特异性启动子的控制下的病毒载体序列、GAD65基因序列和VGAT基因序列。在各种实施方式中，组织特异性启动子选自由人泛素启动子和人突触蛋白启动子组成的组。在各个实施方式中，病毒载体是腺相关病毒(AAV)载体，诸如AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh8、AA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法，所述方法包括软膜下施用包括以下的组合物：(i)在组织特异性启动子的控制下的病毒载体序列、GAD65基因序列和VGAT基因序列，以及(ii)药学上可接受的病毒载体，从而治疗所述受试者的神经性疼痛。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170908 US 62/556,0881.一种在受试者中治疗神经性疼痛的方法，所述方法包括软膜下施用包括以下的组合物：(i)在组织特异性启动子的控制下的病毒载体序列、GAD65基因序列和VGAT基因序列，以及(ii)药学上可接受的病毒载体，从而治疗所述受试者的神经性疼痛。


2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述受试者是哺乳动物。


3.根据权利要求1所述的方法，其中，核酸构建体包封在AAV血清型9或Anc80衣壳中。


4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述组合物中的核酸构建体的浓度为约0.1×1013gc/ml至2.0×1013gc/ml。


5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述药学上可接受的病毒载体选自由慢病毒载体、腺病毒载体(AV)或腺相关载体(AAV)组成的组。


6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述药学上可接受的病毒载体是AAV。


7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述AAV选自由AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh8、AAVrh10、AAVrh33、AAVrh34和AAVAnc80组成的组。


8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述组织特异性启动子选自由人泛素启动子和人突触蛋白启动子组成的组。


9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述GAD65基因序列是SEQIDNO:2或5。


10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述VGAT基因序列是SEQIDNO:4或6。


11.一种通过基因治疗在受试者中治疗神经性疼痛的方法，所述方法包括包括软膜下施用包括治疗有效量的基因治疗构建体和药学上可接受的载体的组合物，从而治疗所述受试者的神经性疼痛，所述基因治疗构建体包含在组织特异性启动子的控制下的(i)病毒载体序列、(ii)GAD65基因序列和(iii)VGAT基因序列。


12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述病毒载体选自由慢病毒载体、腺病毒载体(AV)或腺相关载体(AAV)组成的组。


13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述病毒载体是AAV。


14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述AAV选自由AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丁·马尔萨拉，宫之原厚司，田所孝广，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US