【技术实现步骤摘要】
一种海洋弧菌及其在制备热稳定特性的ι-卡拉胶酶中的应用原申请的申请日2018年12月26日、申请号201811596818.9,专利技术创造名称一种具有热稳定特性的ι-卡拉胶酶及其应用。
本专利技术涉及一种海洋弧菌,以及该海洋弧菌在制备热稳定特性的ι-卡拉胶酶中的应用,属于微生物以及微生物应用的
技术介绍
卡拉胶是由1,4-α-D-吡喃半乳糖和1,3-β-D-吡喃半乳糖作为基本骨架,交替连接而成的硫酸线性多糖。根据是否含有3,6-内醚半乳糖结构以及硫酸基的含量的不同,目前工业上生产和使用的卡拉胶主要为ι-型、ι-型和λ-型三种,其二糖单元分别含有1个、2个和3个硫酸基。卡拉胶寡糖作为一种富含硫酸基的硫酸酯化糖类物质,具有广泛的抗病毒、抗肿瘤、降血脂、免疫调节和抗凝血等生物活性。卡拉胶降解酶是一种糖水解酶,通过断裂卡拉胶的β-1,4糖苷键将大分子卡拉胶降解为寡糖的酶。ι-卡拉胶酶是指专一性降解ι-卡拉胶的卡拉胶酶,传统的ι-卡拉胶酶是从海洋细菌的发酵液上清中直接分离提取,受限于天然ι-卡拉胶酶产量低, ...
【技术保护点】
1.一种海洋弧菌,海洋细菌Vibrio sp.SY08,菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCC No:M2018769,保藏日期2018年11月27日,保藏地址中国武汉市武汉大学。/n
【技术特征摘要】
1.一种海洋弧菌,海洋细菌Vibriosp.SY08,菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号CCTCCNo:M2018769,保藏日期2018年11月27日,保藏地址中国武汉市武汉大学。
2.如权利要求1所述的海洋细菌Vibriosp.SY08在制备具有热恢复特性的ι-卡拉胶酶CgiV中的应用。
3.如权利要求2所述的额英应该你,其特征是:所述海洋细菌Vibriosp.SY08的基因序列在制备具有热恢复特性的ι-卡拉胶酶CgiV中的应用。
4.如权利要求2所述的额英应该你,其特征是:所述应用方法如下:将海洋细菌Vibriosp.SY08中ι-卡拉胶酶CgiV基因序列以限制性内切酶NcoI和XhoI为酶切位点,设计重组引物如下:
正向引物:SEQIDNO.3:PCgiVF:
5’-CATGCCATGGATGATTAAAGCATCTGATTTC-3’(NcoI)
反向引物:SEQIDNO.4:PCgiVR:
5’-CCGCTCGAGTTTACCTTGTTTACAGTTTTTTAC-3’(XhoI)
PCR扩增条件为:94℃预变性3分钟;94℃变性30秒,55℃退火30秒,72℃延伸1.5分钟,共30个循环;72℃延伸5分钟;4℃稳定15分钟;
PCR产物用限制性内切酶NcoI和Xho...
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